این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
دانشور پزشکی، جلد ۱۵، شماره ۷۱، صفحات ۶۵-۷۲
عنوان فارسی راه‌اندازی و به‌کارگیری روش الیزا به‌منظور تشخیص حضور آنتی‌ژن p۲۴ در خون افراد آلوده به HIV
چکیده فارسی مقاله هدف: ویروس نقص ایمنی انسان، موجب اختلال و ضعف در دستگاه ایمنی می‌گردد و بنابراین فرد در برابر عفونت‌های فرصت‌طلب و بروز علائم بیماری ایدز حساس می‌گردد. انتشار ویروس از طریق انتقال خون و ضرورت تشخیص آلودگی آن در بیمارستان‌ها و مراکز بهداشتی، همواره در سراسر جهان مورد توجه بوده است. روش‌های متنوعی به‌منظور تشخیص عفونت HIV وجود دارند. روش الیزا با توجه به مزایای خاص خود، به‌صورت معمول در اکثر مراکز بهداشتی مورد استفاده قرار می‌گیرد. به‌منظور کوتاه کردن دوره پنجره و همچنین تشخیص عفونت در نوزادان متولد شده از مادران آلوده، می‌توان حضور آنتی‌ژن‌های HIVرا مورد بررسی قرار داد. هدف این پژوهش، طراحی و راه‌اندازی روش کپچر الیزا برای تشخیص حضور آنتی‌ژن کپسید (p24) HIV در خون افراد آلوده به HIV بود. مواد و روش کار: در این تحقیق، آنتی‌بادی پلی کلونال علیه آنتی‌ژن نوترکیب p24 ویروس HIV در خرگوش تولید و با روش‌های متنوع کروماتوگرافی جذبی اختصاصی IgG و آنتی‌بادی علیه p24 تخلیص گردید. آنتی‌بادی اختصاصی استخراج شده پس از تأیید، با آنزیم پراکسیداز کنژوگه و روش کپچر الیزا طراحی و راه‌اندازی شد. به‌منظور ارزیابی و تعیین حساسیت و ویژگی این روش، نمونه‌های سرمی HIV مثبت‌و منفی، در مقایسه با تست استاندارد بررسی و ارزیابی گردید. نتایج: نتایج حاصل از این تحقیق مشخص کرد که روش راه‌اندازی شده را می‌توان به‌منظور تشخیص و تأیید عفونت HIV در دوران پنجره و عفونت به کار برد. ویژگی الیزای راه‌اندازی شده 100 درصد و حساسیت آن پس از تیمار حرارتی 96 درصد در مقایسه با کیت تجاری بود. پس از مقایسه نتایج الیزا میان تحت تیپ‌های A و B ویروس، تفاوت معناداری مشاهده نگردید. نتیجه‌گیری: این تست حساسیت و ویژگی بالایی برای تشخیص آنتی‌ژن ویروس دارد و همچنین دارای مزایای زیادی، شامل مدت‌زمان نسبتاً کوتاه انجام آزمایش و تولید راحت آنتی‌بادی به میزان کافی است. در مقایسه با روش‌های دیگر تشخیص، تست راه‌اندازی شده، ساده، سریع، دقیق و از نظر اقتصادی، مقرون به صرفه است. از این روش می‌توان برای تشخیص عفونت HIV در نوزادان متولد شده از مادران آلوده که به دلیل انتقال آنتی‌بادی مادری از جفت با روش‌های معمول قابل تشخیص نمی‌باشد و همچنین کوتاه کردن دوران پنجره که عفونت قابل انتقال است، استفاده کرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Developing ELISA Assay to Detect HIV P24 Antigenemia
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: Human immunodeficiency virus is the etiologic agent of immune system deficiency and the infected patients are susceptible to opportunistic infections and AIDS. Transmission of infection during blood transfusion and diagnosis of infection in hospitals and public health settings have steadily been a worldwide concern. Different techniques are now available for the diagnosis of HIV infection. ELISA detection system is used in the diagnosis of antibodies. In order to shorten the window period and detect the infection in newborn, a capture ELISA assay was developed for the diagnosis of HIV capsid or p24 antigenemia in the infected patients. Objective: The aim of this study was to establish and develop of a capture ELISA assay for diagnosis of HIV capsid antigen in serum samples of HIV positive patients. Materials & Methods: In this study polyclonal monospecific antibody against recombinant HIV p24 antigen was developed in rabbits. Then, it was purified by IgG, and p24 specific affinity chromatography. Purified antibody was confirmed and conjugated with conjugated peroxidase “HRP”. Thus, the capture ELISA was developed. To evaluate the sensitivity and the specificity of the technique, HIV positive and negative serum samples were checked and compared to the standard assay. Results: The results indicated that the developed assay could be useful for the detection and confirmation of HIV infection during the window period. The specificity of the assay was %100 and its sensitivity was %96.87. After comparison of findings among subtypes A, B and C of HIV, it was found that there was no statistically significant variation. Conclusion: The developed assay showed high sensitivity and specificity for detection of viral antigen. In addition, it is not time consuming and specific antibody production in animal model is relatively easy. In comparison to other assays, this method is easy to perform, rapid, accurate and inexpensive. The assay could be readily used for the diagnosis of HIV infection in newborns, since the maternal antibodies could pass through the placenta. Moreover, it could to shorten the window period.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سیدرضا محبی | seyed reza
دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

مهرداد روانشاد |
گروه ویروس شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

فرزانه صباحی |
گروه ویروس شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

فریدون مهبودی |
گروه بیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://daneshvarmed.shahed.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-242&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده فیزیولوژی ورزش
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات