این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان، جلد ۲۰، شماره ۱، صفحات ۱۰-۱۷
عنوان فارسی شناسایی همزمان و مقایسه بروسلاهای بیماری زا در بین نمونه‌های سرمی و خون انسان به روش Multiplex PCR وتایید نتایج آن با روش PCR-RFLP
چکیده فارسی مقاله مقدمه: مطالعات کمی در خصوص جداسازی بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس عامل بروسلوزیس از سرم بیماران انجام است، این مطالعه با هدف جداسازی همزمان بروسلاهای بیماری زا از نمونه‌های سرمی انسان به روش Multiplex PCR طراحی گردید. روش ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، 50 نمونه خون و سرم بیمار مشکوک با علائم بالینی بروسلوزیس، پس از تیترسنجی به محیط کشت بروسلا اگار تلقیح شده و برای تشخیص، از تکنیک مولکولی Multiplex-PCR با سه پرایمر استفاده شد. به منظور کشت نمونه‌های سرم، ml 5/0 از سرم در بروسلا براث تلقیح شده و به مدت 72 ساعت در انکوباتور 37 درجه سلسیوس و 5% گاز دی اکسید کربن، گرمخانه گذاری شد. برای تأیید نتایج PCR، محصولات PCR با استفاده از آنزیم های برش دهنده TaqI و RsaI مطابق مطالعات قبلی تحت برش آنزیمی قرار گرفتند. یافته ها: از میان 50 نمونه خون 4 مورد (8%) کشت مثبت بودند که هر 4 مورد (100%) پس از بررسی خصوصیات و انجام تست های بیوشیمیایی و افتراقی به عنوان بروسلا ملی تنسیس شناسایی شدند. پس از انجام Multiplex PCR، 9 مورد (18%) مثبت و 41 مورد (82%) منفی بودند. در میان موارد مثبت سرم، باند مربوط به بروسلا ملی تنسیس در 7 مورد (78%) و باند مربوط به بروسلا ابورتوس در 2 مورد (22%) مشاهده گردید. از مجموع 50 نمونه خون 5 مورد (10%) مثبت و 45 مورد (90%) منفی بودند که در تمامی آن‌ها (100%) باند مربوط به بروسلا ملی تنسیس مشاهده گردید. تمام نتایج با روش PCR_RFLP تایید شد. نتیجه گیری: مطالعه ما نشان داد که این روش ساده و سریع بوده و حساسیت آن برای جداسازی بروسلاها (به خصوص بروسلا ابورتوس و ملی تنسیس) از سرم در مقایسه با خون کامل، بیشتر است. کلمات کلیدی: بروسلا، Multiplex-PCR، سرم خون، PCR-RFLP وصول مقاله: 16/4/93 اصلاحیه نهایی:19/7/93 پذیرش:19/9/93
کلیدواژه‌های فارسی مقاله بروسلا، Multiplex-PCR، سرم خون، PCR-RFLP
عنوان انگلیسی Simultaneous identification and comparison of pathogenic Brucella species in human serum and blood samples by means of multiplex PCR and confirmation of the results by PCR-RFLP
چکیده انگلیسی مقاله Background and Aim: There are few studies on the isolation of Brucella abortus and Brucella melitensis from patients´ sera. The aim of this study was simultaneous isolation of pathogenic brucella species from human serum samples by multiplex PCR method. Material andMethods: 50 blood and serum samples isolated from patients with clinically suspected brucellosis were inoculated into brucella agar medium and we used multiplex-PCR, with three primers to detect brucella species. We incubated 0.5 ml of serum in Brucella broth for 72 hours at 37 °C in 5% carbon dioxide. To confirm the results of PCR, the PCR products were restricted by restriction enzymes, TaqI and RsaI. Result: From 50 blood samples 4 (8%) cultures were positive. Using biochemical tests and after determination of the characteristics of the positive cases, they were identified as B. melitensis. After multiplex PCR, 9 cases (18%) were positive and 41 cases (82%) were negative. Among the positive sera, B. melitensis was identified in 7 cases (78%) and B. abortus in 2 cases (22%). Of 50 blood samples, 5 (10%) were positive and 45 (90%) were negative for B. melitensis. All the results were confirmed by PCR-RFLP. Conclusion: Our study showed that multiplex PCR method was simple, rapid and is more sensitive for isolation of brucella from serum (especially B. abortus and B. melitensis) in comparison to complete blood. Keywords: Brucella spp., Multiplex-PCR, Serum blood, PCR-RFLP Received: Jul 7, 2014 Accepted: Dec 10, 2014
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Brucella spp., Multiplex-PCR, Serum blood, PCR-RFLP
نویسندگان مقاله الناز اکبرزاده | elnaz akbarzadeh
master of microbiology, department of microbiology, islamic azad university, tehran north branch, tehran, iran.
کارشناس ارشد میکروب شناسی، گروه میکروب شناسی، دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شمال، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی تهران شمال (Islamic azad university of tehran north)

جمیله نوروزی | jamileh noroosi
phd of medical microbiology, department of microbiology, islamic azad university, tehran north branch, tehran, iran.
دکتری میکروب شناسی پزشکی، گروه میکروب شناسی، دانشگاه ازاد اسلامی واحد تهران شمال، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی تهران شمال (Islamic azad university of tehran north)

وهاب پیرانفر | vahab piranfar
master of microbiology, molecular biology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.
کارشناس ارشد میکروب شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

داریوش قاسمی | dariush ghasemi
master of medical biotechnology, molecular biology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.
کارشناس ارشد بیوتکنولوزی پزشکی، مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

شیوا میرکلانتری | shiva mirkalantari
phd of medical bacteriology, department of microbiology, school of medicine, semnan university of medical, semnan, iran.
دکتری باکتری شناسی پزشکی، گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی سمنان (Semnan university of medical sciences)

رضا میرنژاد | reza mirnejad
phd of medical bacteriology, molecular biology research center, baqiyatallah university of medical
دکتری باکتری شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... عج ، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-486&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات