این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان، جلد ۱۶، شماره ۲، صفحات ۳۶-۴۴
عنوان فارسی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
چکیده فارسی مقاله چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترکیب می‌باشد. روش بررسی: در این تحقیق وکتور pET28aحاوی ژن BoNT/A-Hc به باکتری اشریشیاکلی نوترکیب انتقال داده شد. در ادامه، بهترین کلنی از سویه نوترکیب بر اساس سه شاخصه مهم میزان رشد باکتری، بیان پروتئین و پایداری پلاسمید انتخاب شد. سپس بیان محصول در محیط کشت LB و M9 اصلاح شده بررسی، و پروتئین مورد نظر با ستون کروماتوگرافی رزینی تخلیص گردید. یافته‌ها: در شرایط بهینه شده کشت باکتری در مقیاس فلاسک، 52 میلی‌گرم پروتئین محلول BoNT/A-Hcبه ازای یک لیتر محیط کشت حاصل شد. نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های این تحقیق می‌توان نتیجه‌گیری کرد که انتخاب سویه مناسب براساس شاخصه‌های مهم رشد باکتری، بیان پروتئین نوترکیب و پایداری پلاسمید در افزایش بازدهی تولید پروتئین نوترکیب مؤثر است. کلید واژه‌ها: بیان پروتئین، اشریشیاکلی، کلستریدیوم بوتولینوم، بوتولیسم وصول مقاله: 26/11/89 اصلاحیه نهایی: 21/2/90 پذیرش مقاله: 28/2/90
کلیدواژه‌های فارسی مقاله بیان پروتئین، اشریشیاکلی، کلستریدیوم بوتولینوم، بوتولیسم
عنوان انگلیسی Expression of recombinant Hc domain of Clostridium botulinum neurotoxin A in E. coli and its purification as a vaccine candidate against botulism
چکیده انگلیسی مقاله ABSTRACT Background and Aim: Botulism is a lethal disease which is caused by the one of the neurotoxins of the 7 types of Clostridium botulinum. The carboxylic domain of the heavy chain of Clostridium botulinum type A neurotoxin (BoNT/A-Hc), is highly capable of activating immune system and is used for production of a vaccine against botulism. The aim of this study was to express and produce soluble form of BoNT/A-Hc in recombinant E. coli. Materials and Methods: Hc part of BoNT/A was subcloned in pET28a vector and clone was expressed in E. coli BL21 (DE3). Then the best recombinant clones were selected based on three main factors: expression, growth and plasmid stability. Then protein expression was evaluated in LB and M9 media and the protein was purified by resin column chromatography. Results: In flask culture, under optimal conditions of bacterial culture yielded 52mg of BoNT/A-Hc soluble protein from each liter of culture medium. Conclusions: According to the results of this study, selection of suitable strains on the basis of important growth indices of the bacteria, expression of recombinant protein and plasmid stability can lead to in increased efficiency of the recombinant protein production. Key Words: Protein Expresion, E. coli, Clostridium botulinum, Botulism Conflict of Interest: Nill Received: Feb 15, 2011 Accepted: May 18, 2011
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Protein Expresion, E. coli, Clostridium botulinum, Botulism
نویسندگان مقاله سید صفا علی فاطمی | seyed safa ali fatemi
industrial and environmental biotechnology dept., national institute of genetic engineering and biotechnology nigeb tehran, iran
گروه زیست فناوری صنعت و محیط زیست، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

خیرا یاری | khairollah yari
cell and molecular biology dept., medical biology research center, kermanshah university of medical sciences, kermanshah, iran
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، مرکز تحقیقات بیولوژی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه (Kermanshah university of medical sciences)

محمود تولایی | mahmood tavallaei
biotechnology dept., genetic research center, baqiyatallah medical sciences university, tehran, iran
گروه زیست فناوری، مرکز تحقیقات ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

دانیال کهریزی | danial kahrizi
agronomy and plant breeding dept., razi university, kermanshah, iran
گروه زراعت و اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه رازی (Razi university)

نشانی اینترنتی http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-290&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات