این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
تولید محصولات زراعی و باغی، جلد ۱۱، شماره ۱، صفحات ۳۶۷-۳۸۰
عنوان فارسی کلون سازی cDNA سیستاتین ذرت (CCs)، و ارزیابی اثر بازدارندگی پروتئین آن در شرایط آزمایشگاهی
چکیده فارسی مقاله جداسازی و کلون سازی ژن‌های نوترکیب بازدارنده پروتاز (PIs)گیاهی و انتقال آنها به ژنوم گیاهان دیگر، راه را برای مقاومت گیاهان تراریخته در مقابل بعضی آفات مهاجم هموار ساخته است. در پژوهش حاضر با علم به قدرت مهارکنندگی سیستاتین‌ها به‌عنوان عامل مهارکننده پروتاز سیستئین، ژن‌های سیستاتین از ژنوم ذرت جداسازی گردید. cDNA مربوط به این ژن‌ها با استفاده از پرایمرهای اختصاصی در محیط آزمایشگاه ساخته شد و پس از خالص سازی محصول RT - PCR در ناقل‌های پلاسمید pUC19 و pGEX 2T کلون گردید. ناقل‌های پلاسمید نوترکیب (حاوی سیستاتین‌های ذرت) با استفاده از دستگاه شوک الکتریکی به سلول‌های مستعد اشرشیاکولی Dh5α انتقال داده شدند. سلول‌های مستعد حاوی کلون‌های نوترکیب در محیط کشت مساعد رشد داده شدند و پروتئین‌های سیستاتین متصل به گلوتاتیون-اس-ترانسفراز (GST) با استفاده از فیلتر گلوتاتیون آگاروز بید (Glutation Agarose Bead) خالص سازی گردیدند. در هر مرحله از پیشرفت کار وجود ژن‌های سیستاتین به‌وسیله الکتروفورز نمونه‌ها مورد تأیید قرار گرفت. در آزمایش‌های بعدی اثر بازدارندگی پروتئاز و پایداری نسبی سیستاتین‌های نوترکیب مورد ارزیابی قرار گرفت.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Cloning of Corn Cystatin cDNA and Evaluation of Its Protein Inhibitory Effect in vitro
چکیده انگلیسی مقاله Isolating and cloning of plant protease inhibitor (PIs) genes and transforming them to the genome of other plants have paved the way for producing resistant transgenic plants against pests. Knowing that cystatins act as inhibitor factor against cysteine protease, short and long cystatin genes were isolated from maize mRNA. By using specific primers, cDNA of these genes were constructed and cloned in pUC19 and pGEX 2T plasmid vectors. The recombinant plasmid vectors were then transformed to E. coli (strain DH5 α) competent cells using electroporation. The competent cells harboring the clones were grown in suitable medium and cystatin proteins fused to Glutation-S-transferase (GST) were purified by glutation agarose bead filter. In each step of the procedure the presence of cystatin genes were confirmed through electrophoresis. Further evaluation proved the inhibitory effect and a mild stability of at least one of the corn cystatin (CC II) when incubated with cysteine protease.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله قدرت اله ریاضی | gh riazi


نشانی اینترنتی http://jcpp.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-669&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات