این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
تولید محصولات زراعی و باغی، جلد ۲، شماره ۵، صفحات ۱۷۵-۱۸۷
عنوان فارسی بهینه‌سازی انتقال ژن به ارقام گلابی (Pyrus communis L.) با استفاده از ژن گزارشگر gus
چکیده فارسی مقاله امروزه استفاده از روش‌های مهندسی ژنتیک توانسته است ضمن کوتاه کردن دوره طولانی اصلاح درختان میوه، این برنامه‌ها را هدفمندتر کند. منظور از اجرای این تحقیق، بهینه‌سازی و بررسی عوامل مؤثر بر انتقال ژن با استفاده از Agrobacterium tumefacience به دو رقم گلابی بارتلت (Bartlett) و هرو دیلایت (Harrow Delight) بود. در همین راستا، دو ریزنمونه برگی و مریستم جوانه جانبی با استفاده از اگروباکتریوم سویه EHA101 دارای ناقل دوتایی pBI121 شامل ژن‌های nptII و gus تلقیح شدند. عوامل مؤثر بر باززایی گیاهان تراریخت و فعالیت ژن gus که در این مطالعه بررسی شدند شامل غلظت باکتری مورد استفاده در تلقیح با دو تیمار OD600 (2/0 و 6/0)، غلظت استوسرینگون (µmol 100 و µmol250)، پلورونیک F-68 (صفر و 02/0%) و مدت زمان هم‌کشتی (24، 72 و 120 ساعت) بودند. نتایج نشان داد که رقم گلابی بارتلت از نظر باززایی و بیان ژن gus موفق‌تر از رقم هرو دیلایت است. هم‌چنین ریزنمونه جوانه جانبی جایگزین مناسبی برای ریزنمونه برگی شناخته شد. نتایج بهینه‌سازی عوامل مورد بررسی در این آزمایش نشان داد که در هر دو ریزنمونه، استفاده از غلظت کمتر باکتری باعث افزایش کارآیی انتقال ژن می‌شود. از سوی دیگر، استفاده از 250 میکرومول استوسرینگون می‌تواند بر انتقال ژن به هر دو ریزنمونه اثر مثبتی داشته باشد. در این بهینه‌سازی، حضور پلورونیک به عنوان یک ماده روکنش‌گر مؤثر شناخته شد. در بین مدت زمان‌های هم‌کشتی، کوتاه‌ترین تیمار (24 ساعت) بیشترین میزان انتقال ژن را نشان داد. تأیید انتقال ژن به ژنوم گیاهان تراریخته به‌وسیله آزمون شیمی سلولی GUS، واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) و هم‌چنین لکه‌گذاری نقطه‌ای (Dot Blot) و لکه‌گذاری سادرن (Southern Blot) انجام شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله مهندسی ژنتیک، باززایی، گیاهان تراریخت
عنوان انگلیسی Optimization of Gene Transformation in Pear (Pyrus communis L.) Cultivars Using gus Reporter Gene
چکیده انگلیسی مقاله Nowadays, genetic engineering methods are able to reduce the time of breeding programs for improvement of fruit trees, as well as offering a focused breeding system. The purpose of the present investigation was to study the factors that affect Agrobacterium tumefacience mediated transformation of two pear cultivars: Bartlett and Harrow Delight. Two explants (leaves and axillary shoot meristems) were inoculated with Agrobacterium strain EHA101 harboring the binary vector pBI121 carrying the nptII and gus genes. Factors that effected the regeneration and gus gene expression were bacterial density OD600 (0.2 and 0.6), acetosyringone concentration (100 µM and 250 µM), usage of pluronic F-68 (0% and 0.02%) and co-cultivation time (24, 72 and 120 hours). The results showed that transformation of Bartlett cultivar was more successful than Harrow Delight cultivar. Also, axillary shoot meristem was a good substitute for leaf explant. Results of the optimization of investigated factors showed that in both explants, low concentration of bacteria increased the rate of gene transformation. On the other hand, applying 250 µM acetosyringone could have positive effect on gene transformation in both explants. In this optimization process, pluronic F-68 was recognized as an effective surfactant. Regarding duration of co-cultivation, the shortest treatment (24 hours) showed the highest amount of gene transformation. Expression, presence and integration of transgenic plants were confirmed by histochemical GUS assay, polymerase chain reaction, dot blot and southern blot hybridization.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Genetic engineering, Regeneration, Transgenic plants.
نویسندگان مقاله سوده دشتی | s. dashti1
islamic azad univ., sci. and res. branch, tehran, iran
دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

علی اکبر حبشی | a a habashi
پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، کرج
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران

حمید عبدالهی | h. abdollahi
مؤسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر، کرج
سازمان اصلی تایید شده: موسسه تحقیقات اصلاح و تهیه نهال و بذر

محمد چمنی | m. chamani
islamic azad univ., sci. and res. branch, tehran, iran
دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

مریم جعفرخانی کرمانی | m jafarkhani kermani
پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، کرج
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران

نشانی اینترنتی http://jcpp.iut.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-25&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات