این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۷، شماره ۲، صفحات ۶۰-۷۰
عنوان فارسی تثبیت آنزیم اندوگلوکاناز AaCel۹A برروی ماکروبیدهای کیتوزانی
چکیده فارسی مقاله سلولاز آنزیمی پرکاربرد در صنایع مختلف می باشد. تثبیت سلولاز یکی از روش‌های پایدارسازی آن است که نه تنها امکان جداسازی آنزیم از واکنش، بلکه امکان استفاده مجدد از آن را فراهم می‌سازد و در نتیجه هزینه استفاده آنزیم در صنعت به طور قابل توجهی کاهش می‌یابد. استفاده از کیتوزان به عنوان بستر جهت تثبیت آنزیم و استفاده گسترده آن در فرآیند‌های صنعتی همواره مورد توجه بوده است. ویژگی‌های فوق العاده از جمله زیست سازگاری، زیست تخریب پذیری و غیر سمی بودن آن، کیتوزان را بستری مناسب جهت فرآیند تثبیت معرفی می‌کند. در این مطالعه توالی ژنی کد کننده آنزیم اندوگلوکاناز AaCel9A در وکتور بیانی pET28a(+) همسانه سازی شد. نتایج حاصل از تعیین توالی مؤید قرارگیری صحیح قالب ژنی AaCel9A در وکتور بود. سپس وکتور حاوی ژن به سلول های مستعد اشریشیا کلی سویه BL21 منتقل شده و بیان پروتئین در آن ها القا شد. بیان آنزیم با استفاده از روش الکتروفورز SDS-PAGE و سنجش فعالیت آنزیم تایید و با ستون نیکل آگارز تخلیص بعمل آمد. ساخت ماکروبیدهای کیتوزان با روش ژله ای شدن صورت گرفت. مولکولهای آنزیم با استفاده از لینکرهای گلوتارآلدئیدی به صورت کووالان به بستر متصل و تایید تثبیت آنزیم توسط FTIR و نیز سنجش فعالیت آنزیمی از ماکروبیدهای حاوی آنزیم انجام پذیرفت. آنالیز نتایج نشان داد که بهترین شرایط برای تثبیت کوالان آنزیم بر روی بستر در غلظت گلوتارآلدئید 7/0% و بافر سدیم فسفات (7 pH) می باشد. همچنین آنالیز برادفورد و سنجش فعالیت آنزیمی مؤید تثبیت 85% از مولکول‌های آنزیم برروی بستر بود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله اندوگلوکاناز AaCel9A، پایدار سازی، تثبیت، کیتوزان،
عنوان انگلیسی Immobilization of AaCel9a endoglucanase on chitosan macrobeads
چکیده انگلیسی مقاله Cellulase enzyme has shown their potential application in different industry. cellulase immobilization is one of the different methods for enzymatic stabilization. An advantage of immobilization is enzymatic reusability, which have an economical advantage for enzyme using in industry. Properties of Chitosan as a support for enzyme immobilization are always considerable. Due to its unique biological properties such as biocompability, biodegradability and non-toxicity, chitosan is an attractive support for immobilization. In this investigation Aa-cel9A endoglucanase gene was cloned in pET28 (+) expression vector. Sequencing result had been proved gene cloning in vector. Then the constructed vector was transformed to Eshershia.Coli (BL21) cells and enzyme production was induced. The result obtained from SDS-PAGE analysis and enzymatic assay showed the recombinant protein has been expressed and protein purification was done with Ni-NTA column. Chitosan macrobeads were prepared by precipitation procedure. After immobilization of enzyme with glutaraldehyde as linker, enzyme immobilization has been proved with FTIR and Bradford analysis. The obtained result showed optimum condition for covalent immobization on support are 0.7% of glutaraldehyde concentration and sodium phosphate buffer with pH 7. Bradford analysis and enzymatic activity assay have proved 85% of enzyme molecules immobilized on support.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله پرستو رحیمی زاده |
دانشجو دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

سعید نژاوند |
هیئت علمی- دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

محمد پاژنگ |
هیات علمی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

علیرضا امانی قدیم | amani ghadim
هیات علمی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

نادر چاپارزاده |
هیات علمی دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

فرشته سادات یونسی | fereshte sadat
دانشجو دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شهید مدنی (Azarbaijan shahid madani university)

نشانی اینترنتی
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات