این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۶، شماره ۲، صفحات ۱۰-۲۰
عنوان فارسی بررسی اثر حلال بسازودگداز کولین کلرید: گلیسرول بر ویژگی‌های سینتیکی آنزیم وحشی و جهش‌یافته لوسیفراز
چکیده فارسی مقاله لوسیفراز حشره شب‌تاب، یک آنزیم مولد نور است که در زمینه‌های مختلف بیوتکنولوژی و زیست‌شناسی مولکولی استفاده می‌شود. لوسیفراز کاربردهای گسترده‌ای در بسیاری از حوزه‌های آنالیز ژنتیکی نظیر ردیابی بیان ژن، سنجش ژن گزارشگر و مطالعات پروتئومیکس نظیر برهمکنش‌های پروتئین- پروتئین دارد. علیرغم مزیت هایی که این آنزیم دارد، محدودیت هایی نیز در سامانه های مبتنی بر لوسیفراز وجود دارد که مهم ترین آن ها پایداری پایین آنزیم است. یکی از جدیدترین روش هایی که برای حل این مشکل توسعه یافته است، استفاده از حلال های بسا زودگداز(DES) می باشد. یک گروه از حلال های بسا زودگداز از نمک آلی همراه با یک دهنده هیدروژن ساخته می شود که به سبب آن، پیوندهای هیدروژنی درون مولکولی باعث کاهش نقطه ذوب آن نسبت به هر یک از ترکیبات سازنده می باشد. در تحقیق حاضر، اثرات این حلال را روی ویژگی های سینتیکی آنزیم لوسیفراز Lampyris turkestanicus وحشی و جهش‌یافته(I232R - E354R/Arg356) بررسی شد. بدین منظور،آنزیم‌های وحشی و جهش‌یافته در BL21 بیان گردید و پروتئین‌های مورد نظر از طریق کروماتوگرافی تمایلی تخلیص و برای مطالعات سینتیکی استفاده شد. در اینجا، از حلال کولین کلراید:گلیسرول به عنوان حلال بسازودگداز استفاده گردید. با توجه به نتایج، پایداری دمایی لوسیفراز وحشی در حلال DES نسبت به جهش یافته بسیار بیشتر است. همچنین، فعالیت باقیمانده هر دو آنزیم وحشی و جهش یافته در حضور حلال DES نسبت به عدم حضور آن بیشتر است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله لوسیفراز، حلال های بسازودگداز، پایداری دمایی،
عنوان انگلیسی Study the effects of deep eutectic solvent choline chloride: glycerol on kinetic properties of wild-type and mutant luciferas
چکیده انگلیسی مقاله Firefly luciferase is a light generating enzyme, which is used in different fields of biotechnology and molecular biology. Luciferase has found widespread applications in many areas of genetic analysis such as detecting gene expression, reporter gene assay and proteomics studies such as protein-protein interactions. Despite many advantages, there are some limitations in luciferase-based systems, the most important of which is its low stability. One of the newly developed methods to solve this problem is to take advantage of Deep Eutectic Solvents (DES). One group of DESs is those that composed of organic salts with hydrogen donor, due to which, intermolecular hydrogen bonds cause lower melting point in comparison with each of the component. In this study, we investigated the effects of DES on kinetic properties of wild type and I232R - E354R/Arg356 mutant Lampyris turkestanicus luciferases. For this, both enzymes, wild type and mutant, expressed in BL21, the protein of interest purified through affinity chromatography and used for kinetic studies. Here, we used choline chloride: glycerol as DES. According to the results, the wild type luciferase is much more thermostable in DES than I232R - E354R/Arg356 mutant. Furthermore, the remaining activity of both wild type and mutant luciferases are greater in the presence of DES than those in the absence of DES.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Luciferase, Deep eutectic solvents, thermostability
نویسندگان مقاله فرشته رحمتی |
دانشجوی دکترای دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

امین تشکر |
دانشجوی دکترای بیوشیمی دانشگاه تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

اکبر حیدری |
استاد شیمی دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

سامان حسینخانی |
استاد بیوشیمی دانشگاه تربیت مدرس
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

نشانی اینترنتی http://biot.modares.ac.ir/article_13752_34f8486140fe08e4f52d1849a51bcb8d.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/899/article-899-187057.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات