این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
ژنتیک نوین، جلد ۱۱، شماره ۱، صفحات ۱-۱۲
عنوان فارسی بهبود کارایی انتقال ژن به گیاه نارنج (Citrus aurantium L.) با استفاده از اگروباکتریوم تومفاشینس
چکیده فارسی مقاله استفاده از اگروباکتریوم جهت انتقال ژن به مرکبات از روش‌های رایج و معمول است. در این تحقیق قطعه‌ای موزاییک از دو ژن کد کننده پوشش پروتئینی ویروس تریستزای مرکبات (CTV) جداسازی و در وکتور خاموشی pFGC5941 کلون شد. انتقال وکتور به روش الکتروپوریشن به اگروباکتریوم سویه EHA105 انجام و با استفاده از PCR حضور ژن خارجی تایید شد. دانهال‌های نارنج به مدت 4 هفته در تاریکی و 10 روز در دوره نوری 16 ساعته در شرایط In vitro رشد کرده و سپس ریز نمونه از اپی‌کوتیل و هیپوکوتیل آن‌ها تهیه شد. ریزنمونه‌ها با اگروباکتریوم هم کشت و در محیط شامل غلظت‌های مختلف هورمون‌های B‌AP و NAA قرار گرفتند. تأثیر شکاف طولی در انتهای ریزنمونه‌ها، نقش غلظت‌های مختلف استوسرینگون در محیط القایی، هم‌چنین اثر استفاده از خلا جهت هم‌کشتی و نیز نقش منبع هیدروکربن (گلوکز و ساکارز) بر کارایی تراریختی بررسی شد. در این تحقیق شاخساره‌ها به روش باززایی مستقیم و بدون ورود به مرحله کالوس‌زایی از ریزنمونه‌ها تولید شد که مزیت مهمی در ممانعت از ایجاد تنوع سوماکلونال بود. تأیید انتقال تراژن به ژنوم گیاه میزبان با کشت ریزنمونه‌های حامل شاخساره در محیط گزینشی حاوی علف‌کش بستا و انجام واکنش PCR با دو ژن داخل T-DNA انجام شد. بر اساس تکنیکPCR Real-Time نیز تعداد نسخه‌های رونوشت برداری شده ژن CTV در گیاهان تراریخت تعیین شد. بالاترین کارایی انتقال ژن در تیمارهای حاوی mg/l2 BAP و mg/l25/0 NAA همچنین از ریز نمونه‌هایی به دست آمد که به روش هم‌کشتی تلقیح شده و دارای برش طولی در انتها بوده‌اند. در این تیمار برگزیده هم‌کشتی تحت تیمار استوسرینگون صفر، و با استفاده از منبع هیدروکربن گلوکز در محیط کشت القایی انجام شده بود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله استوسرینگون،Agrobacterium tumefaciens،کارایی ترانسفورماسیون،نارنج،باززایی
عنوان انگلیسی Improvement of transformation efficiency in Citrus aurantium using Agrobacterium tumefaciens
چکیده انگلیسی مقاله Agrobacterium mediated transformation is a routine approach for stable transformation of crop plants. In the present research EHA105 strain of Agrobacterium harboring pFGC5941 binary vector was used to transform sour orange. A three-day culture was performed in order to induce virulence genes. Seeds were cultured in MS medium for three weeks in darkness followed by 10 days at 16-h photoperiod. Epicotyl-originated explants were extracted and cultured in regeneration medium at different concentrations and combination of BAP (0, 1 and 2 mg/l) and NAA (0, 100 and 200 mg/l). Effects of longitudinal incision at the end of explants on regeneration, concentration of Acetosyringone, effects of vacuum as well as two carbohydrate sources on transformation efficiency were analysed. Confirmation of transformation was achieved using selectable medium contain Basta herbicide as well as PCR analysis via three gene specific primers. The highest transformation efficiency was achieved in the presence of 2 mg/l BAP, 0.25 mg/l NAA from explants derived from dark grown seedlings. The highest transformation efficiency was achieved in the lack of Acetosyringone and presence of glucose in induction medium. Putative transformed seedlings are kept in growth room for further analysis regarding resistance to citrus tristeza virus pathogen.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله محمد‌مهدی سوهانی | محمد‌مهدی سوهانی


مینا خوشبخت | مینا خوشبخت


محمد حسین رضادوست | محمد حسین رضادوست


امیرحسین زمانی | امیرحسین زمانی


بنفشه فتاح | بنفشه فتاح


بهروز گلعین | بهروز گلعین


علیرضا افشاریفر | علیرضا افشاریفر


نشانی اینترنتی http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-390&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/1516/article-1516-1988765.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات