این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
ژنتیک نوین، جلد ۱۰، شماره ۳، صفحات ۳۴۷-۳۵۸
عنوان فارسی بررسی روش‌های مختلف انتقال ژن به ریز جلبک Dunaliella salina
چکیده فارسی مقاله ریز جلبک Dunaliella salina از جمله جلبک‌های سبز تک سلولی متحرک می‌باشد که دارای توانایی بسیار بالایی برای رشد در شرایط شور بوده و به دلیل دارا بودن مزایای مختلف به عنوان‌‌ یک کارخانه سلولی سبز جهت تولید فرآورده‌های ارزشمند دارویی از قبیل واکسن‌ها، هورمون‌ها، فاکتورهای رشد، آنتی‌بادی‌های مونوکلونال و سایر پروتئین‌های نوترکیب مورد توجه می‌باشد. در این تحقیق روش‌های انتقال ژن خارجی به این ریزجلبک مورد بررسی قرار گرفته است. در اولین قدم و به منظور استفاده از نشانگرهای انتخابی در فرآیند انتقال ژن، آزمون تعیین میزان حساسیت به ترکیبات بازدارنده‌ رشد از قبیل کانامایسین، هیگرومایسین، کلرامفنیکل و فسفینوتریسین انجام شد. نتایج این آزمون حاکی از حساسیت ریز جلبک به فسفینوتریسین در غلظت 7 میکروگرم در میلی‌لیتر بود. برای انتقال ژن از روش‌های همزدن با ذرات شیشه، الکتروپوراسیون، اگروباکتریوم و بمباران با تفنگ ژنی استفاده شد. سازه‌ها‌ی مورد استفاده در این تحقیق حاوی ژن‌های گزارشگر gus، ژن انتخابگر bar و همچنین ژن کدکننده آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت بی تحت کنترل پیشبر‌های 35S و‌‌ یوبی‌کوئیتین بود. نتایج حاصله حاکی از موفقیت‌آمیز بودن روش استفاده از ذرات شیشه و همچنین تفنگ ژنی در فرآیند انتقال ژن بود. در این روش‌ها سلول‌های جلبک تراریخته قابلیت رشد خود را در محیط کشت حاوی نشانگر انتخابی فسفینوتریسین حفظ کرده و حضور و بیان ژن‌های خارجی و نشانگر انتخابی با روش‌های PCR و RT-PCR تایید شد. همچنین بیان ژن gus در سلول‌های تراریخته، با استفاده از رنگ‌آمیزی هیستوشیمیایی مورد تایید قرار گرفت.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله انتقال ژن،ریز جلبک،ژن گزارشگر gus،واکسن هپاتیت ب،Dunaliella salina
عنوان انگلیسی Assessment of some gene transformation methods in microalgae Dunaliella salina
چکیده انگلیسی مقاله Microalgae Dunaliella salina is a single-cell eukaryotic organism which is able to grow in high salt concentration. It has several advantages as a green bioreactor for producing of several pharmaceutical drugs including vaccines, hormones, growth factors, monoclonal antibodies and other recombinant proteins. In present study some gene transformation methods were applied for insertion of foreign genes into the microalgae cells. In the first step and to determine suitable selectable marker, some growth inhibitory compounds, such as kanamycin, hygromaicin, chloramphenicol and phosphinotricine were used. The results indicate the sensitivity of micro-algae D. salina to phosphinotricine in concentration of 7 µg/ml. Then, the gene bar, encoding phosphinotricine transferase, was introduced as selectable marker in transformation process. The methods applied in gene transformation include agitation with glass beads, electroporation and gene gun bombardment. The constructs containing the GUS gene applied for optimizing of the transformation process. To evaluate the effect of different promoters, the cauliflower mosaic virus 35S and maize ubiquitine promoters were used for expression of the GUS reporter gen. The expression of GUS reporter gene was evaluated by histochemical staining method. The results obtained here proved efficiency of the glass beads method for successful expression of foreign gene. In stable nuclear transformation methods, the transformed D. salina cells were cultured on media containing phosphinotricine selectable marker. These results proved capability of 35S promoter in transformation using glass beads method. The construct harbouring HBsAg gene was applied for gene transformation into microalga by using biolistic, glass beads agitation and agrobacterium co-cultivation. The transformed cells were moved into selective media. The presence of foreign gene in the transformed cells was analyzed by molecular approaches including PCR and RT-PCR. These results prove capability of biolistic and glass bead approaches for successful gene transformation into D. salina.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله محمدرضا صفرنژاد | محمدرضا صفرنژاد


محمد علیمردانی | محمد علیمردانی


عبدالقادر سعدی زاده | عبدالقادر سعدی زاده


مولود خلیلیان | مولود خلیلیان


محمد حسین دانشور | محمد حسین دانشور


محمد علی ابراهیمی | محمد علی ابراهیمی


غلامرضا صالحی جوزانی | غلامرضا صالحی جوزانی


نشانی اینترنتی http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-370&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/1516/article-1516-1988801.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات