این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
ژنتیک نوین، جلد ۲، شماره ۲، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی استفاده از پروتئین گزارشگر جدید لیچناز برای مطالعه بیان ژن های وحشی و ساختگی cry۳a در سلول های پروکاریوت و یوکاریوت
چکیده فارسی مقاله در این پژوهش نسل جدیدی از گزارشگرها بر اساس آنزیم متحمل به حرارت لیچناز (b-1,3 -1,4 glucunase) باکتری Clostridium thermocellum برای بررسی نحوه تنظیم تظاهر ژن ها در سلول های پروکاریوت (E.coli) و یوکاریوت (مخمر و گیاه) توسعه یافت. لیچناز یک آنزیم مقاوم به حرارت می باشد که پیوندهای مجاور b-1,4 , b-1,3 را در پلی گلوکان های حاوی پیوند مخلوط تجزیه می کند ولی در گلوکان های حاوی یکی از پیوندها تاثیری ندارد. شناسایی و آشکارسازی فعالیت این پروتئین بسیار راحت و ساده بوده و از طریق روش های مختلف مثل آزمون پتریدیش و زیموگرام صورت می پذیرد. برای اثبات اینکه ژن licBM2 (رمزکننده لیچناز) را می توان به عنوان گزارشگر در سطح رونویسی در موجودات مختلف استفاده نمود، توالی تغییر یافته ژن لیچناز تحت کنترل پیشبردهای مختلف T7 و در Gal, (E.coli) Lacz و TDH (در مخمر)، و Rbcs (در گیاه سیب زمینی) قرار گرفت. نتایج تظاهر تحت پیشبردهای مختلف، نشان داد که این ژن می تواند در بررسی های پیشبردهای مختلف کاربرد داشته باشد. علاوه بر آن برای بررسی امکان استفاده از ژن لیچناز به عنوان گزاشگر در سطح ترجمه، ژن licBM2 به ژن طبیعی E.coli، مخمر و سیب زمینی توسط توالی های دو رگ cry3a-licBM2 و cry3aM-licBM2 تراریخت شدند. به کمک اندازه گیری میزان فعالیت آنزیم لیچناز در ساختار پروتئین های دو رگ، مشخص گردید که میزان بیان ژن های طبیعی و تغییر یافته cry3a در مخمر به عنوان یک یوکاریوت به طور معنی داری افزایش نشان داد. نتایج تراریختی گیاه، بررسی فعالیت پیشبر اختصاصی (فعال در شرایط نور) و زیست سنجی بر علیه سوسک کلرادو نشان داد که میزان تظاهر ژن ساختگی در گیاه نسبت به ژن وحشی حدود 100 برابر شده است. نتایج آزمایش ها نشان داد که لیچناز می تواند به عنوان یک ژن گزارشگر که دارای حساسیت بالا و کار با آن بسیار ساده می باشد، برای انتخاب سلول های تراریخت و بررسی میزان بیان تراژن ها در مطالعات پایه و یا کاربردی استفاده شود
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی
چکیده انگلیسی مقاله
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله غلامرضا صالحی جوزانی | غلامرضا صالحی جوزانی


علی سیفی نژاد | علی سیفی نژاد


ایرینا واسیلیونا گلدنکوا | ایرینا واسیلیونا گلدنکوا


الئونورا سورنوناپیروزیان | الئونورا سورنوناپیروزیان


نشانی اینترنتی http://mg.genetics.ir/browse.php?a_code=A-10-109-288&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/1516/article-1516-1989159.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات