این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پزشکی قانونی، جلد ۱۴، شماره ۳، صفحات ۱۵۹-۱۶۵
عنوان فارسی مقایسه کارایی روش استخراجی فنل کلروفرم سیلیکا با روش گوانیدین تیوسیانات سیلیکا در بازیابی DNA از بقایای اسکلتی
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: تست های DNA Typing نقش بسیار مهمی در تعیین هویت اجساد و شناسایی قربانیان بلایای دسته جمعی و اجساد سربازان جنگی دارند. به دست آوردن DNA با وزن مولکولی مناسب برای انجام آزمایشات DNA Typing در اجساد سوخته، اجسادی که مدتی طولانی از مرگ آنها گذشته یا مدتی در آب غوطه ور بوده اند به علت تجزیه DNA با مشکلات زیادی همراه می باشد. هدف از این بررسی، مقایسه و ارزیابی دو روش استخراجی مختلف به نام های فنل-کلروفرم سیلیکا و گوانیدین تیوسیانات سیلیکا به منظور بررسی DNA استخوان های قدیمی می باشد. روش بررسی: از بیست نمونه استخوانی از اجساد مجهول الهویه که به طور تصادفی انتخاب شده بودند و به طور میانگین هشت سال از زمان مرگ آنها می گذشت، با استفاده از روشهای فنل کلروفرم سیلیکا و گوانیدین تیوسیانات سیلیکا، مولکول DNA استخراج گردید. کمیت DNA با استفاده از روش اسپکتروفتومتری تعیین شد. سپس DNA استخراج شده درهشت منطقه پلی مورفیک کوتاه تکرارشونده متوالی (STRs)به نام های CD4, vWA, LPL, D5S818, D16S539, D13S317, F13, FES در واکنش زنجیره ای پلیمرازی (PCR) تکثیر گردید. نرخ موفقیت در انجام DNA پروفایلینگ نمونه ها، به وسیله محاسبه تعداد آلل های قابل شماره گذاری بر روی ژل اکریل آمید بعد از الکتروفورز در هر مورد اندازه گیری شد. یافته ها: میزان DNA استخراج شده و میزان خلوص آن بوسیله روش فنل-کلروفرم به طور متوسط به ترتیب 27/ 256 میکروگرم بر میلی لیتر و 07/1 به دست آمد؛ در مقایسه، غلظت و میزان خلوص DNA استخراج شده با روش گوانیدین - تیوسیانات به طور متوسط به ترتیب 86/170 میکروگرم بر میلی لیتر و 94/0 به دست آمد. نتایج ما بر اساس نرخ موفقیت کلی تکثیر در واکنش PCR در هشت منطقه STRs اشاره شده در بالا نشان می دهد که روش فنل کلروفرم (76%) نسبت به روش گوانیدین تیوسیانات سیلیکا (64%) کارآتر می باشد. نتیجه گیری: هرچند روش فنل کلروفرم سیلیکا نتایج بهتری را نسبت به روش گوانیدین تیوسیانات سیلیکا در STR Typing از نمونه های استخوان تجزیه شده ارایه می دهد، ولیکن ما استفاده همزمان از هر دو روش را در آنالیز بافت های استخوان قدیمی برای بهبود تفسیر نتایج پیشنهاد می کنیم.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Comparison the effectiveness of extraction protocols Phenol-Chloroform-Silica and Guanidinium Thiocyanate-Silica in recovering DNA from human skeletal remains
چکیده انگلیسی مقاله Background & Aim: DNA Typing methods offer great help in identification of single deceased individuals, war and mass disaster victims. It has been a challenge to extract DNA from bones previously soaked in water, burned or buried for a long time, due to the reduced quality and quantity of DNA in the bone samples. The aim of this investigation is the comparison and evaluation of two different DNA extraction methods, namely the phenol-chloroform-silica and the guanidinium thiocyanate-Silica for DNA analysis of old bones. Materials & Methods: DNA was extracted from twenty randomly chosen bone samples, with 8 years passing of their death, from unknown human remains by using of phenol-chloroform-silica and guanidinium thiocyanate-Silica methods. Spectrophotometer was used to estimate the quantity and quality of DNA. Then, extracted DNA was profiled by a set of eight short tandem repeats (STRs) loci named CD4, vWA, LPL, D5S818, D16S539, D13S317, F13 and FES. The successfulness of the DNA profiling of the specimens was measured by counting all type able electrophoretic results in each case. Findings: DNA quantification results showed that the phenol-chloroform-silica extracted on average 256.27 µg/ml of DNA with the average purity degree of 1.07, compared with the DNA concentration of 170.86 µg/ml and purity of 0.94 by the guanidinium thiocyanate-Silica. Our results on the overall success rate of polymerase chain reaction (PCR) amplification in eight STRs loci mentioned above indicates that phenol-chloroform-silica method (76%) was more effective than guanidinium thiocyanate-Silica (64%). Conclusions: Although the phenol-chloroform-silica showed better results in STR Typing from degraded bone samples than guanidinium thiocyanate-Silica, we suggest using both methods in analysis of old bone tissue simultaneously to improve the interpretation of results.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله علیرضا صبوری |
اصفهان، فلکه فیض، اداره کل پزشکی قانونی

محمد فضیلتی |


حمیده یادگاری |


نشانی اینترنتی http://www.sjfm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-59&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده forensic medicine
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات