این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، جلد ۱۹، شماره ۳، صفحات ۲۵۵-۲۶۵
عنوان فارسی پیشگیری از بیان ژن VEGFR-۱ در محیط کشت، با استفاده از به‌کارگیری siRNA اختصاصی در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: آنژیوژنز، از مهمترین فرایندهای زیستی است که هر گونه اختلال در آن، به بیماری منجر می‌شود. نقطه اصلی در هدایت سیگنالینگ این فرایند، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی است که از طریق رسپتورهایش اعمال اثر می‌کند. مطالعه حاضر، در جهت مهار بیان رسپتور تیپ І این فاکتور (VEGFR-1)، با استفاده از siRNA اختصاصی در محیط کشت، به منظور استفاده از تأثیر مهاری آن در درمان نئوواسکولاریزاسیون چشم صورت گرفته است. روش تحقیق: در این مطالعه تجربی، ابتدا با استفاده از توالی ژن هدف، توالی‌های siRNA اختصاصی، علیه آن طراحی، Blast و ساخته شد. از طرف دیگر، cDNA سلولHUVEC، سنتز و ژن هدف، با کمک پرایمر اختصاصیVEGFR1 و PCR، به میزان مورد نیاز تکثیر شد؛ سپس در وکتور بیانی PEFGP-N1، کلون و تأیید شد. پلاسمید ناقل حاصل، با استفاده از لیپوفکتامین، به سلول Hela که فاقد بیان ژن هدف بود، انتقال داده شد. میزان بیان GFRدر وکتور اولیه و وکتور کلون‌شده، در حضور و عدم حضور siRNA اختصاصی علیهVEGFR1 مورد ارزیابی قرار گرفت و میزان مهار ژن، از طریق ارزیابی کاهش فلورسانس سبز رنگ ناشی از GFP، وسترن بلات و RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتایج، با استفاده از آزمون تی‌تست، مورد آنالیز قرار گرفت و 05/0P< معنی‌دار در نظر گرفته شد. یافته‌ها: فلورسانت ناشی از اثر siRNA در گروه هدف در مقایسه با گروه کنترل کاهش داشت SDS Page و وسترن بلاتینگ از سلول حاوی وکتور مواجهه ‌یافته با هر دو نوع siRNA، کاهش میزان پروتئین را نشان داد. نتایج حاصل از دو siRNA به کاررفته، بیانگر کاهش بیان ژن در سطح رونویسی و ترجمه در مقایسه با گروه کنترل بود (05/0P<). نتیجه‌گیری: siRNA اختصاصی طراحی‌شده علیه VEGFR-1، با استفاده از لیپوفکتامین، به طور مناسب به داخل سلول منتقل و از بیان رسپتور، به طور معنی‌دار جلوگیری نمود؛ لذا احتمالاً به عنوان یک فاکتور مناسب درمانی جدید، در جلوگیری و یا کاهش نئوواسکولاریزاسیون در چشم، مطرح باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله VEGFR-1، siRNA، نئوواسکولاریزاسیون، HUVEC، RT-PCR
عنوان انگلیسی Preventing the expression of VEGFR-1 in culture medium using specific SiRNA - as a potential therapeutic method in eye neovascularization
چکیده انگلیسی مقاله Background and Aim: Angiogenesis is one of important biological processes any disruption in which leads to disease. The main signaling factor in this process is VEGF which acts through its receptors. The present study was done in order to inhibit the expression of receptor type1of this factor (VEGFR-1) using specific siRNA in the culture medium to use its inhibitory effect on neovascularization in the eye. Materials and Methods: In this experimental study first, using target gene sequences, sequences of the specific siRNA were designed against them blasted and manufactured. On the other hand, cDNA of HUVEC cell was synthesized and PCR, with specific primers for target gene, was reproduced as necessary. Then, PEFGP-N1 expression vectors were cloned and confirmed. Then, the obtained plasmid vector was transferred to Hela cells lacking target expressive genes through lipofectamin. GFR expression rate in the initial vector and in the cloned one, both in presence and in absence of specific VEGFR1 siRNA, was assessed. Evaluation of gene inhibition was carried out through decreasing of green fluorescence from GFR, Western blot and RT-PCR. Results were analyzed using T-test and P< 0.05 was taken as the significant level. Results: The fluorescence emission from defined siRNA decreased compared to control group. SDS pages and blots from vector cloned cells exposed to both siRNA showed reduced protein expression The outcome of applying two siRNA indicates gene expression in the form of transcription and translation, compared to the control group (P< 0.05). Conclusion: Specifically designed siRNA against VEGFR1, through lipofectamin, was appropriately transferred into cell and significantly prevented from the receptor expression. In fact, by blocking angiogenesis signaling route, it was able to prevent neovascurization. Thus, this can be made use of as an appropriate factor in preventing or decreasing neovascularization in the eye.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله VEGFR-1, siRNA Neovascularization, HUVEC, RT-PCR
نویسندگان مقاله علی زارعی محمودآبادی | ali zarei mahmud abadi
biochemistry department amp;amp; chemical damage research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
گروه بیوشیمی و مرکز تحقیقات آسیب های شیمیایی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

معصومه معصومی کریمی | masoomeh masoomi karimi
, immunology department, torbateheydariyeh university of medical science. torbateheydariyeh, iran
گروه ایمونولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تربت حیدریه، تریت حیدریه، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تربت حیدریه (Torbat heydariyeh university of medical sciences)

مجید بهابادی | majid bahabadi
biochemistry department, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran
گروه بیوشیمی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

مهدی کمالی | mahdi kamali
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

رضا کوشکی | reza kushki
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

فریبا خلیلی | fariba khalili
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

نیما فرهادی | nima farhadi
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

مصطفی نادری | mostafa naderi
department of ophthalmology, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
گروه چشم پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

سامان سجادی | saman sajadi
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

مسلم جعفری ثانی | moslem jafari sani
biochemistry department, torbateheydariyeh university of medical science. torbateheydariyeh, iran
تلفن 09365998426 فکس 2242038-0531

جواد علیزاده | javad alizadeh
nano-biotechnology research center, baghiyatallah university of medical science, tehran, iran.
مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله عج ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://journal.bums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-736-1&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده بیوشیمی
نوع مقاله منتشر شده تجربی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات