این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران، جلد ۲۲، شماره ۱، صفحات ۲۳-۳۱
عنوان فارسی همسانه‌سازی، بیان و تخلیص انتهای کربوکسیل زیرواحد C آنزیم اوره‌آز هلیکوباکتر پیلوری به منظور تولیدIgY در زرده تخم مرغ
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (H.pylori) نوعی باکتری گرم منفی اسپیرال و میکروآیروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر و ایجاد عفونت می نماید. رویکردهای جدید در جهت بکارگیری درمان های اختصاصی نظیر ایمنوتراپی برای ریشه کنی این عفونت میباشند. آنزیم اوره آز یکی از مهمترین عوامل بیماری زا و آنتی ژنیک این باکتری است. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ابتدا بخش انتهای کربوکسیل زیر واحد C اوره آز، پس از تخلیص ژنوم باکتری، با کمک واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) تکثیر شده و محصول روی ناقل بیانی pET28a کلون شد. پروتئین نوترکیب پس از تراریخت سازه نوترکیب به باکتری E.coli سوش Bl21DE3 بیان شد و نتایج با استفاده از SDS-PAGE تحلیل و پروتئین نوترکیب از طریق کروماتوگرافی میل ترکیبی با کمک ستون Ni-NTA تخلیص شد. پروتئین نوترکیب تخلیص شده، به مرغ لگهورن سفید تزریق و IgY با روش استون/کلروفرم تخلیص و با روش ELISA و SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: با تعیین توالی سازه نوترکیب، صحت انجام همسانه سازی تأیید شد. بررسی با SDS-PAGE نشان داد پروتئین نوترکیب rUreCc به خوبی بیان و تخلیص شده است. همچنین نتایج الایزا ایمن‌زایی بالای این پروتئین نوترکیب را نشان داد. نتیجه‌گیری: تولید پروتئین نوترکیب rUreCc هلیکوباکتر پیلوری در E.coli به عنوان سلول میزبان، امکان دسترسی آسان به آنتی-ژن را فراهم کرد. علیرغم کوچک بودن آنتی‌ژن نوترکیب، توانایی ایمنی زایی آن شبیه به کل زیر واحد C اوره آز است
کلیدواژه‌های فارسی مقاله هلیکوباکتر پیلوری، اوره‌آز، زیر واحد UreC، IgY
عنوان انگلیسی Cloning, expression and purification of C-terminal of Helicobacter pylori urease enzyme C subunit for production IgY in chicken egg yolk
چکیده انگلیسی مقاله Background: H. pylori is a spiral, microaerophilic gram negative bacterium, that multiplies and causes infection in human gastric mucosal layer. New approaches have focused on using specific treatments, such as immunotherapy, to eradicate this infection. Urease, as one of the most important virulent and antigenic factors of the bacterium, is a suitable target for this purpose. Material and methods: In this experimental study, after purification of bacterial genomic, 3’ segment of ureC gene was amplified by polymerase chain reaction (PCR). The PCR product was ligated to pET28a. The recombinant protein was expressed followed by transformation of recombinant construct into E. coli BL21DE3. SDS-PAGE analysis was carried out and the recombinant protein was purified by Ni-NTA affinity chromatography. The purified recombinant protein was injected to hens. IgY recovered from egg yolk, was purified by aceton/chloroform precipitation. The purified IgY was analyzed by ELISA and SDS-PAGE. Results: Sequencing of recombinant construct confirmed accuracy of cloning. SDS-PAGE analysis revealed a good expression and purification of the recombinant protein rUreCc. ELISA observation demonstrated high immunogenicity of the recombinant protein. Conclusion: Production of rUreCc recombinant protein of H. pylori within E.coli, as host cell, provides an easy availability to antigen. In spite of recombinant antigen small size, its immunization potency is similar to total subunit of urease. Also, small size of recombinant protein has an important role in its stability, expression and purification.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Helicobacter pylori, Urease, UreC, IgY technology
نویسندگان مقاله حسین بصیری | hossein basiri
islamic azad university, science and research campus, tehran, iran
دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم و تحقیقات
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

سیدلطیف موسوی گرگری | seyed latif mousavi gargari
shahed university, tehran, iran
دانشگاه شاهد
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شاهد (Shahed university)

ایرج رسولی | iraj rasuli
shahed university, tehran, iran
دانشگاه شاهد
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه شاهد (Shahed university)

کاظم پریور | kazem parivar
islamic azad university, science and research campus, tehran, iran
دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم و تحقیقات
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

طاهر نژادستاری | taher nejad satari
islamic azad university, science and research campus, tehran, iran
دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم وتحقیقات
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

نشانی اینترنتی http://www.iau-tmuj.ir/browse.php?a_code=A-10-155-33&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده گوارش
نوع مقاله منتشر شده تجربی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات