این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله پزشکی ارومیه، جلد ۳۲، شماره ۳، صفحات ۲۲۵-۲۳۳
عنوان فارسی بررسی کارآیی متدهای تخلیص ویزیکول های خارج سلولی مشتق از بیفیدوباکتریوم بیفیدوم (یک مطالعه مقایسه ایی)
چکیده فارسی مقاله پیش زمینه و هدف: باکتری ها به طور طبیعی وزیکول هایی در مقیاس نانو که حاوی طیف وسیعی از بیومولکول ها مانند پروتئین ها، DNA و RNA هستند را تولید می کنند. به این ویزکول ها، وزیکول های خارج سلولی (EVs) گفته می شود. این وزیکول ها نقش مهمی در تعامل میزبان و میکروبیوتا دارند. برای جداسازی EVs روش های مختلفی ارائه شده و هر روش دارای مزایا و همچنین محدودیت هایی نیز می باشد. در مطالعه حاضر ما کارآیی دو روش استخراج EVs را مورد بررسی قرار داده ایم. مواد ورش کار: بیفیدوباکتریوم بیفیدوم در محیط کشت MRS broth در شرایط بیهوازی کشت داده شد. در پروتکل اول از روش اولتراسانتریفیوژ استفاده گردید (روش اولترا) و در روش دوم از اولتراسانتریفیوژ استفاده نشد (روش غیراولترا). بعد از استخراج ویزیکول ها، میزان پروتئین آن ها توسط دستگاه NanoDrop اندازه گیری شد. از روش SDS-PAGE برای مقایسه الگوی پروتئین EVs استفاده شد. تصاویر SEM از نمونه ها گرفته شده و اندازه آن ها توسط نرم افزار Digimizer ارزیابی شد. یافته ها: نتایج نشان داد که EVs جدا شده با روش اولترا به طور معنی داری میزان پروتئین بالاتری نسبت به روش غیر اولترا(به ترتیب 3/42 و 0/26 mg/ml) داشتند. روش اولترا در مقایسه با روش غیراولترا EVs بیشتر و بزرگتری (حداکثر 235 نانومتر و 117 نانومتر به ترتیب) را جدا کرده بود. همچنین ، الگوی پروتئینی EVs در هر دو روش مشابه بودند. بحث و نتیجه گیری: نتایج ما نشان داد که روش اولترا سانتریفیوژ روش مناسبتری برای جداسازی EVs بیفیدوباکتریوم بیفیدوم بوده و ویزیکول های بیشتر، با پروتئین بالاتر و اندازه مناسب تر تخلیص می کند. با این حال ، مطالعات بیشتری برای تأیید نتایج ما مورد نیاز است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله بیفیدوباکتریوم بیفیدوم، ویزیکول های خارج سلولی، اولتراسانتریفیوژ، روش های تخلیص
عنوان انگلیسی Evaluation of efficiency of Methods used for extraction of Bifidobacterium bifidum-Derived Extracellular Vesicles: An experimental study
چکیده انگلیسی مقاله Background & Aims: Bacteria naturally secret nano-scale vesicles containing a wide range of biomolecules, such as proteins, DNA, and RNA. These vesicles are called extracellular vesicles (EVs). EVs play important roles in host-microbiota interactions. For isolating EVs, different methods have been proposed and each method has its advantages and also limitations. Therefore, in the current study, efficacy of two methods used for extraction of EVs was investigated. Materials & Methods: For this purpose, Bifidobacterium bifidum was cultured in MRS broth under anaerobic conditions. In the first isolation protocol, ultra-centrifugation was used (Ultra-method) and in the second protocol, ultra-centrifugation (Non-Ultra method) was not used. After isolation, protein content was measured by the NanoDrop system. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) technique was utilized to compare protein pattern of the EVs. Scanning electron microscopy (SEM) images of the EVs҆ samples were taken and size of the EVs was evaluated by Digimizer software. Results: The results showed that the EVs isolated by the Ultra-method had significantly higher vesicle-associated protein content compared to those isolated by the Non-Ultra method (3.42 and 0.26 mg/ml, respectively). More and larger EVs (up to 235 nm and with frequent size ranging between 100 – 125 nm) were isolated by the Ultra-method compared to the Non-Ultra method (up to 117 nm and with frequent size ranging between 50–75 nm). Also, protein patterns of the EVs were similar in both methods and protein bands were observed at 25 to 250 KDa in both methods. Conclusion: Our results showed that ultra-centrifugation method is a more proper method for isolation of B. bifidum-derived EVs and produces a higher amount of EVs with higher protein content and proper sizes. However, further studies are required to confirm our results.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Bifidobacterium bifidum, Extracellular Vesicles, Ultra-Centrifugation, Isolation Methods
نویسندگان مقاله سونیا حسنی | Sonia Hassani
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
دپارتمان زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

فتاح ستوده نژاد نعمت الهی | Fattah Sotoodehnejadnematalahi
Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
دپارتمان زیست شناسی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران

ابوالفضل فاتح | Abolfazl Fateh
Department of Mycobacteriology and Pulmonary Research, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات میکروب شناسی - انیستیتو پاستور ایران-تهران ایران

سید داور سیادت | Seyed Davar Siadat
Microbiology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات میکروب شناسی - انیستیتو پاستور ایران-تهران ایران

نشانی اینترنتی http://umj.umsu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4548-1&slc_lang=en&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده en
موضوعات مقاله منتشر شده میکروبیولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی(توصیفی- تحلیلی)
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات