این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
یافته، جلد ۲۲، شماره ۴، صفحات ۱۶۲-۱۶۹
عنوان فارسی تولید رده سلولی ناک اوت IDUA توسط تکنیک ویرایش ژنی CRISPR/Cas
چکیده فارسی مقاله مقدمه: موکوپلی ساکاریدوز تیپ (MPSI) I  بیماری شایع ذخیره ای لیزوزومی است که به واسطه کمبود آنزیم آلفا-ال – ایدورونیداز  (IDUA) بر روی کروموزوم 4 (4p16.3) ایجاد می گردد. این آنزیم در تجزیه گلیکوزآمینوگلیکانها یا موکوپلی ساکاریدهای درماتان سولفات و هپاران سولفات دخالت دارد و نقص در آنزیم مذکور منجر به افزایش سطح گلیکوز آمینو گلیکان ها (GAG) در خون و تجمع آن در اعضای مختلف بدن می شود. این ترکیبات پروتئوگلیکانی زیربنای ساختاری ماتریکس خارج سلولی و ساختار غضروفی نقاطی مثل مفاصل، دریچه­های قلبی را فراهم می­نماید؛ بعلاوه در تنظیم ارتباطات سلولی نقش دارد. در این مطالعه ما سیستم CRISPR/Cas را طراحی کردیم که ژن کد کننده انزیم IDUA را مورد هدف قرار داده  است و ما توانستیم سلوهای ناک اوت این ژن را تولید کنیم. مواد و روش ­ها: ابتدا sgRNA هدف IUDA در پلاسمید px335 کلون شد، با استفاده از نقشه برداری محدودکننده، پلاسمید نوترکیب تأیید شد. سپس پلاسمید نوترکیب به رده سلولی اپیتلیال انسانی، HEK-293 ترانسفکت شد. کلون های جهش یافته توسط آنالیز melting غربالگری شدند و جهش آنها با تعیین توالی سنگر مشخص شد. یافته­ ها: هضم آنزیمی و تعیین توالی سنگر، القای جهش ایندل را در دو کلون هتروزیگوت و یک کلون هموزیگوت تایید کرد. بحث و نتیجه­ گیری:  در این مطالعه، ما با استفاده از سیستم CRISPR-Cas9 یک مدل سلولی سندرم هورلر تولید کردیم که این مدل می تواند جهت استفاده در رویکرد های درمانی این بیماری استفاده شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله سندرم هرلر، CRISPR-Cas ، ژن ناک اوت ، IDUA
عنوان انگلیسی Generation of IDUA knockout cell lines by CRISPR/Cas mediated genome editing
چکیده انگلیسی مقاله Background: The hurler syndrome is the most common form of lysosomal storage diseases (LSDs). In the present experiment, we intended to generate an IDUA targeting CRISPR-Cas system and deactivate the target gene using it. Materials and Methods: IUDA targeting sgRNA pair were cloned into the px335 plasmid and resulted plasmid identity was confirmed using restriction mapping. Recombinant plasmid was transfected into the human epithelial cell line, HEK-293. Mutated clones were screened by melting analysis and their mutation w::as char::acterized by Sanger sequencing. Results: Analytical digestion and Sanger sequencing confirmed indel mutation induction in two clones in heterozygote and one clone in homozygote state. Conclusion: In this study, we produced an IDUA knockout cell model using CRISPR-nCas9 system. This model can be used in the therapeutic approaches of this disease.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Hurler syndrome, CRISPR-Cas, Gene knock out, IDUA
نویسندگان مقاله علی حاتمی بردر | Ali Hatami bardar
Department of Biology, Marvdasht Branch, Islamic Azad University, Marvdasht, Iran
گروه زیست شناسی، واحد مرودشت، دانشگاه آزاد اسلامی، مرودشت، ایران

محسن عظیمی نژاد | Mohsen Azimi nejad
Department of Basic Medical Sciences, Neyshabour University of Medical Sciences, Neyshabour, Iran.
گروه علوم پایه پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی نیشابور، نیشابور، ایران

مجتبی جعفری نیا | Mojtaba Jafarinia
Department of Biology, Marvdasht Branch, Islamic Azad University, Marvdasht, Iran
گروه زیست شناسی، واحد مرودشت، دانشگاه آزاد اسلامی، مرودشت، ایران

حمید رضا گودرزی | Hamid reza Goodarzi
Department of Biology, Marvdasht Branch, Islamic Azad University, Marvdasht, Iran
گروه زیست شناسی، واحد مرودشت، دانشگاه آزاد اسلامی، مرودشت، ایران

مجید مجرد | Majid Mojarrad
Department of Medical Genetics, School of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
گروه ژنتیک پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران

نشانی اینترنتی http://yafte.lums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2784-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ژنتیک
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات