این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
دانشور پزشکی، جلد ۲۶، شماره ۶، صفحات ۱-۸
عنوان فارسی بیان ژن FSH انسانی در سلول تخمدان همستر چینی و بررسی فعالیت آن در مدل حیوانی رت
چکیده فارسی مقاله مقدمه و هدف: FSH هورمون گلیکوپروتئین هترودایمری است که در رشد و بلوغ اندام‌های جنسی و صفات ثانویه مؤثر است. گنادوتروپین‌های قابل تزریق نقش پیشرو در درمان ناباروری داشته‌اند. تولید FSH در داخل کشور یکی از اهداف مهم پیرامون این دارو است. هدف از این مطالعه امکان تولید آزمایشگاهی FSH نوترکیب می‌باشد. مواد و روش­ها: وکتور حاوی زیر واحد آلفا و بتای ژن FSH انسانی در باکتری DH5α انتقال و پلاسمید جداسازی و توسط لیپوفکتامین 2000 به سلول تخمدان همستر چینی ترانسفکت شد. سلول‌ها بوسیله نئومایسین به مدت 10 روز تیمار و سلول‎های ترانسفکت شده انتخاب شدند. بیان پروتئین بوسیله الایزا مورد بررسی قرار گرفت. محصول با روش کروماتوگرافی افینیتی خالص شد. جهت محاسبه راندمان تخلیص، غلظت پروتئین قبل و بعد از کروماتوگرافی به وسیله الایزا مورد سنجش قرار گرفت. جهت تائید خلوص پروتئین از روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ استفاده شد. سپس به رت ماده تزریق و عملکرد پروتئین بررسی شد. نتایج: بیان پروتئین با استفاده از تست الایزا در 450 نانومتر mIU/ml 538/43 تائید شد. در مرحله تخلیص با روش کروماتوگرافی افینیتی، پیک مربوط به FSH در بازه زمانی حدود 9/7 دقیقه مشاهده و راندمان تخلیص 70% محاسبه شد. وجود باند 45 کیلودالتونی بر روی ژل و غشای PVDF پس از تخلیص، حضورFSH را تائید نمود. افزایش وزن تخمدان بعد از تزریق، عملکردی بودن پروتئین را تائید نمود. نتیجه‌گیری: در حال حاضر تولید هورمون‌های نوترکیب از نیازهای کشور محسوب می‌شود، بنابراین دست‌یابی به این هدف ارزشمند نیاز به برنامه‌ریزی بلندمدت دارد و ما در این پژوهش سعی نمودیم این مسیر را به منظور تولید هورمون FSH انسانی به‌ عنوان یک داروی نوترکیب مؤثر در درمان ناباروری هموار نماییم.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله انتقال، بیان، E.coli، FSH، سلول تخمدان همستر چینی،
عنوان انگلیسی Expression of human FSH in Chinese hamster ovarian cells and its activity in a rat model
چکیده انگلیسی مقاله Background and Objective: FSH is a heterodimeric glycoprotein that performs an important role in the regulation of reproductive processes. Over the past decades, injectable gonadotrophins have played a leading role in the treatment of infertility. The production of FSH in the country is one of the main goals around this drug. The aim of this study was to produce a semi- industrial recombinant FSH. Materials and Methods: In this research study, the FSH gene contained within the pVITRO2-neo-mcs vector was transfected into the cell line of CHO after transformation in DH5α and plasmid purification. The amount of FSH in cell supernatant was measured by ELISA. The FSH protein was purified by HPLC. The presence of FSH protein after purification was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting methods. Finally, the clinical effects of purified FSH on the ovary in the rat model were investigated. Results: The expression of the protein was determined by ELISA test at 450 nm that was 43.538 mIU/ml. In the HPLC purification step, the FSH peak was observed at a time interval of about 7.9 minutes, and the purification efficiency was 70%. The existence of a 45 KDa band on the pvdf membrane was confirmed after western blotting of FSH. Increasing the weight of the ovary after the injection has confirmed the functionality of the protein. Conclusion: At present, the production of recombinant hormone is one of the basic needs of every country. In order to arrive at this aim, a long-term planning is required. We are trying to pave the way for producing human FSH hormone as an effective recombinant drug in the treatment of infertility.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله انتقال, بیان, E.coli, FSH, سلول تخمدان همستر چینی
نویسندگان مقاله اعظم موسیوند |
گروه میکروبیولوژی دانشکده علوم پایه دانشگاه شاهد، تهران، ایران

شهرام تیموریان |
گروه ژنتیک ﭘزشکی و زیست شناسی مولکولی دانشگاه علوم ﭘزشکی ایران، تهران، ایران

مریم رضایی |
گروه ژنتیک ﭘزشکی و زیست شناسی مولکولی دانشگاه علوم ﭘزشکی ایران، تهران، ایران

امیرحسن شهابی یونسی |
گروه داروسازی دانشگاه شهید بهشتی،تهران، ایران

ایرج رسولی |
گروه زیست شناسی میکروبیولوژی دانشگاه شاهد، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://daneshvarmed.shahed.ac.ir/article_1855_aec9178723b0781b8e2e3cc1b3a3b40f.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات