این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
دانشور پزشکی، جلد ۱۸، شماره ۶، صفحات ۱-۸
عنوان فارسی تهیه و تخلیص آنتی‌بادی منوکلونال علیه آنتی‌ژن لیپوآرابینومان مانوزیله مایکوباکتریوم بویس
چکیده فارسی مقاله مقدمه و هدف: لیپوآرابینومان مانوزیله (ManLAM)­ از آنتی­ژن‌های گلیکولیپیدی است که درصد قابل توجهی از دیواره سلولی باکتری مایکوباکتریوم بویس ب ث ژ را تشکیل می‌دهد. نظر به اینکه تولید آنتی‌بادی‌ منوکلونال آن، به­ویژه در طراحی کیت تشخیص سریع بیماری سل کاربردهایی فراوان دارد، لذا هدف از تحقیق حاضر، تولید آنتی بادی منوکلونال ضد این آنتی­ژن می‌باشد. مواد و روش کار: پس از تزریق‌های منظم موش‌های BALB/c با BCG سونیکیت­شده، آنتی‌ژن LAM­، تیتر آنتی‌بادی تولیدشده بررسی­گردید. لنفوسیت‌های طحالی موش­ها و سلول­های میلومای Sp2/0 با کمک پلی‌اتیلن‌گلیکول امتزاج­داده­شدند. سلول­ها در محیط HAT­ انتخاب­شدند و کلون‌های مولد آنتی‌بادی ضد آنتی‌ژن LAM با استفاده از آزمون الایزا­ شناسایی­شدند؛ پس از تخلیص آنتی­بادی منوکلونال، شناسایی آنتی­ژن­های لیپوآرابینومان مانوزیله و BCG سونیکیت­شده با روش وسترن بلاتینگ انجام­گرفت. نتایج: تعداد­2 کلون H2-3B9 , H1-3D3 مولدآنتی‌بادی اختصاصی با جذب بالا در آزمایش الایزا، انتخاب­شدند. نتایج وسترن بلاتینگ، باند­30 کیلو دالتونی مربوط به آنتی­ژن‌های لیپوآرابینومان مانوزیله و BCG سونیکیت­شده با استفاده از آنتی­بادی‌های منوکلونال IgM و IgG3 را تأییدمی‌کرد. نتیجه­گیری: نتایج نشان­داد که امکان تولید و تخلیص آنتی­بادی منوکلونال با استفاده از امتزاج لنفوسیت‌های B طحال موش­های ایمن­شده و­ سلول­های میلوما وجودداشته، تأیید واکنش اختصاصی آنتی­بادی مذکور قبل از انجام مطالعات تشخیصی در شناسایی سریع سل در ادرار بیماران­ و بررسی‌های مصونیت­زایی واکسن ب ث ژ مورد توجه خواهدبود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله لیپوآرابینومانان مانوزیله، مایکوباکتریوم بویس، آنتی‌بادی منوکلونال‌،
عنوان انگلیسی Production and Purification of Monoclonal Antibody against ManLAM antigen ‌‌from Mycobacterium Bovis
چکیده انگلیسی مقاله Background and Objective: Lipoarabinomannan mannesylated (Man­LAm) is one of the lipoglycans which forms a considerable percent of Mycobacterium Bovis BCG’ cellular wall. Considering that generation of monoclonal antibody against Man­LAM antigen has many applications, specifically, in order to design the diagnostic kit for rapid diagnosing of tuberculosis, so the main objective of this study was based on production of monoclonal antibody against this antigen. Materials and Methods: The female BALB/c mice were immunized by regular injections of sonicated BCG and LAM antigen, then after each injection, circulation of generated antibodies were investigated. Spleen lymphocytes of immunized mice and SP2/0 myeloma cells were fused into each other. The cells were selected by HAT medium. Identification and selection of anti-LAM antigen producing clones were performed using ELISA test. After purification of anti-ManLAM, detection of ManLAM antigen and sonicated BCG carried out by western blot technique. Results: The two H1-3D3, H2-3B9 clones, producing specified antibody were selected which had higher absorbance in ELISA test. The results of Western blotting showed that 30KDa band was related to sonicated BCG and ManLam antigen, using IgG3 IgM antibodies. Conclusion: The results indicated that using the fusion of hybridoma myeloma cells, it is possible to produce and purify monoclonal antibodies, and before performing diagnostic studies in order to have rapid diagnosing of tuberculosis in patient`s urine, and investigations for immunizing the BCG vaccine, conformation of specified reaction of mentioned antibody will be considered.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله لیپوآرابینومانان مانوزیله, مایکوباکتریوم بویس, آنتی‌بادی منوکلونال‌
نویسندگان مقاله رسول موخواه |
مجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتوپاستور ایران

محمد تقی‌خانی |
گروه بیوشیمی ‌بالینی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس

علیرضا خبیری |
گروه انگل‌شناسی، انستیتوپاستور ایران

سید عطاالله سادات شاندیز |
مجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتوپاستور ایران

نشانی اینترنتی http://daneshvarmed.shahed.ac.ir/article_1443_dce51a513f120512ab353aee31b168cb.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات