این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Journal of Agricultural Science and Technology، جلد ۲۲، شماره ۶، صفحات ۱۶۰۳-۱۶۱۲
عنوان فارسی بیان موقت ژن اکسندین-۴ متصل به زیر واحدBسم وبا (CTB) توسط آگروباکتریوم در تنباکو (Nicotiana tabacum)
چکیده فارسی مقاله اکسندین-4 آنالوگ GLP-1 انسانی می‌باشد که مقاوم به آنزیم دی پپتیدیل پپتیداز IV است و ترشح انسولین را افزایش داده که منجر به بهبود کنترل قند خون می شود. در این مطالعه، اکسندین-4 جدا‌سازی شده از بزاق مارمولک، که آگونیست GLP-1 می‌باشد، به‌عنوان یک پروتئین متصل شده به زیر‌واحد B سم وبا، به‌طور موقت در گیاه تنباکو بیان شد. ابتدا توالی ژن اکسندین-4 متصل به زیر‌واحد B سم وبا طراحی و جایگاه‌های برش آنزیمی Bam HI وSacI به‌ترتیب در ابتدا زیر‌واحد B سم وبا و در انتهای توالی ژن اکسندین-4 قرار داده شد و سپس توالی طراحی شده سنتز گردید. ژن اکسندین-4 متصل به زیر‌واحد B سم وبا همسانه‌سازی شده در داخل ناقل کلونینگPUC57 ، به باکتری اشرشیاکلی منتقل گردید. سپس پلاسمید pUC57-CTB-EX4 استخراج شده از باکتری اشرشیاکلی، با استفاده از آنزیم‌های محدودکننده Bam HI وSacI برش داده شد و در ناقل دوتایی بیانی pBI121 همسانه‌سازی گردید و از طریق آگرواینفیلتراسیون به برگ گیاه تنباکو انتقال یافت. رونویسی ژن اکسندین-4 متصل به زیر‌واحد B سم وبا، به‌روش RT-PCR در برگ گیاه تنباکو تایید گردید. از برگ‌های آگرواینفیلتره شده، پروتئین کل استخراج گردید و با استفاده از آنتی بادی ضد زیر‌واحد B سم وبا، آزمون الایزا صورت گرفت و تولید پروتئین نوترکیب تایید گردید.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Transient Expression of CTB-Exendin Fused Genes in Nicotiana tabacum via Agrobacterium tumefaciens
چکیده انگلیسی مقاله Exendin-4 is a human Glucagon-Like Peptide-1 (GLP-1) analogue, resistant to DiPeptidyl Peptidase (DPP), which activates the GLP-1 receptor, increases insulin secretion, and improves glycemic control. In this study, Exendin-4 (EX4) was fused to Cholera Toxin B subunit (CTB) and transiently expressed in tobacco leaves. The sequence of the Ex4 fused to CTB subunit gene, with BamHI and SacI restriction enzymes sites at the beginning of CTB and at the end of EX4 gene. After codon optimization, the sequence was synthesized and cloned in pUC57 plasmid. The recombinant vectors were transformed into Escherichia coli strain DH5α. The pUC57-CTB-EX4 construct was digested with BamHI and SacI restriction enzymes, cloned into pBI121 expression binary vector, and transferred into tobacco leaves through agroinfiltration. Transcription of the Ex4 fused to cholera toxin B subunit gene in leaves was confirmed by RT-PCR analysis. After agroinfiltration, the protein was extracted from treated leaves, and ELISA test was performed using anti-CTB antibody. The production of recombinant protein was approved by ELISA test in transformed leaves.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Agroinfiltration, CTB-EX4 gene, Restriction enzymes, Tobacco.
نویسندگان مقاله | S. Kokei
Department of Agronomy and Plant Breeding, University of Kurdistan, Sanandaj, Islamic Republic of Iran.


| B. Bahramnejad
Department of Agronomy and Plant Breeding, University of Kurdistan, Sanandaj, Islamic Republic of Iran.
نشانی اینترنتی http://jast.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-12498-2&slc_lang=en&sid=23
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده en
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات