این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان، جلد ۲۸، شماره ۳، صفحات ۱۱-۲۱
عنوان فارسی بیان، تخلیص و بررسی ایمونوژنیسیتی پروتئین نوترکیب بخش کربوکسیل زیر واحد اتصال‌دهنده نوروتوکسین بوتولینوم تیپ B (BoNT/B-HcC)
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: بوتولیسم، سندروم ناشی از مسمومیت غذایی، به دنبال استفاده از  غذای آلوده به سموم عصبی بوتولینوم بوجود می‌آید که بسیار خطرناک و کشنده هست. بیماری بوتولیسم به علت تأثیر سم باکتری بر پایانه‌های اعصاب حرکتی ایجاد می‌شود. نوروتوکسین‌های بوتولینوم جزء قوی‌ترین سموم شناخته‌شده می‌باشند. هدف از این تحقیق تولید، تخلیص و بررسی میزان ایمونوژنیسیتی پروتئین نوترکیب BoNT/B-HcC به عنوان یک کاندید ایمونوژن در حیوان آزمایشگاهی موش بود. مواد و روش‌ها: انتهای کربوکسیل ناحیه اتصال‌دهنده نوروتوکسین بوتولینوم تیپ B به عنوان آنتی‌ژن مورد ارزیابی‌های بیوانفورماتیک قرارگرفت. پلاسمید pET17b-BoNT/B-HcC  به روش شوک دمایی به باکتری E. coli BL21(DE3) منتقل شد. پروتئین نوترکیب به روش کروماتوگرافی تمایلی، تخلیص و با تکنیک SDS-PAGE بررسی گردید. پس از تائید پروتئین نوترکیب با روش وسترن‌بلات، ایمنی‌زایی پروتئین در موش‌ آزمایشگاهی انجام شد. تیتر آنتی‌بادی با استفاده از الایزای غیرمستقیم ارزیابی و نتایج با  آزمون آماری t ارزیابی و مقایسه گردید. یافته‌ها: ژن بهینه سازی شده شاخص سازگاری کدون 99/0 را دارا شد. درصد کدون‌های با شیوع بالا در ژن به 78 درصد بهبود یافت. توالی ساز ژنی 1119 جفت ‌باز با برش آنزیمی تائید و  پروتئین نوترکیب  با وزن 8/43 کیلودالتون در میزبان پروکاریوتی بیان گردید. میزان پروتئین خالص‌شده برای هر لیتر از محیط کشت 23 میلی‌گرم بود. ایمن‌سازی موش‌ها پاسخ آنتی‌بادی سرمی را القا کرد و آنالیز‌های آماری نشان داد که میزان تیتر آنتی‌بادی در مقایسه با نمونه کنترل تفاوت معنی‌داری دارد. نتیجه‌گیری: آنتی‌ژن نوترکیب طراحی‌شده آنتی‌ژنیسیته بالایی نشان داد و می‌تواند به‌عنوان یک ایمونوژن علیه نوروتوکسین بوتولینوم تیپ‌B در تحقیقات بعدی  مورد بررسی قرار‌گیرد.  
کلیدواژه‌های فارسی مقاله کلستریدیوم بوتولینوم، واکسن، ایمنی‌زایی، آنتی‌بادی، بخش عملکردی
عنوان انگلیسی Expression, purification and immunogenicity study of recombinant C-terminus of the receptor-binding domain of neurotoxin botulinum protein type B(BoNT/B-HCC)
چکیده انگلیسی مقاله Background and Aim: Botulism, a syndrome caused by food poisoning, results from the use of food contaminated with the botulinum toxin, which is very dangerous and deadly. Botulism is caused by the effects of bacterial toxins on the terminals of the motor nerves. Botulinum neurotoxins are among the most potent toxins known. The aim of this study was expression, purification and, evaluate the immunogenicity of recombinant BoNT/B-HcC protein as an immunogen candidate in mice. Materials and Methods: The C-terminus of the receptor-binding domain of neurotoxin botulinum protein type B(BoNT/B-HcC) was selected as the antigen for bioinformatics evaluations. The pET17b-BoNT/B-HcC Plasmid was transferred to E. coli BL21(DE3) by heat shock. The recombinant protein was purified and analyzed on SDS-PAGE. After verification of the recombinant protein with Western blot, immunization of mice was performed. Antibody titers of recombinant proteins were evaluated by ELISA and the result was compared using a t-test. Results: The Codon adaptation index (CAI) of the optimized gene was 0/99. The Percentage of codons having high-frequency distribution was improved to78%. Restriction analysis confirmed the 1119 bp construct gene and the recombinant protein with a molecular weight of 43/8 kDa was expressed in the prokaryotic host. The total yield of purified protein was 23 mg of protein per liter culture. Immunization of mice induced serum antibody response. Statistical analysis showed that the antibody titer ratio was significantly different compared to the control sample. Conclusion: The designed recombinant antigen showed high antigenicity that could be considered as an immunogen against botulinum type B neurotoxin in future research.  
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Clostridium botulinum, Vaccines,‌ Immunizations, Antibodies, Catalytic domain
نویسندگان مقاله حسین سمیعی ابیانه | Hossein Samiei Abianeh
Department of Medical Biotechnology and Nanotechnology, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
گروه بیوتکنولوژی پزشکی و نانوتکنولوژی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران.

شهرام نظریان | Shahram Nazarian
Biological Sciences Dept., Imam Hosein University, Tehran, Iran
مرکز زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین، تهران، ایران

محمد ابراهیم مینایی | mohammad ebrahim Minaei
مرکز زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین، تهران، ایران

جعفر امانی | Jafar Amani
مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، پژوهشکده سیستم بیولوژی مسمومیت‌ها، بیمارستان بقیها... الاعظم، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌ا...

امیر سجاد حجتی رزگی | Amir Sajjad Hojjati razgi
مرکز زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین، تهران، ایران

محمدرضا رمضانی |
مرکز زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-6742-1&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده بیوتکنولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات