این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشکده پزشکی اصفهان، جلد ۲۸، شماره ۱۱۹، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی مقایسه‌ی ویژگی‌های سلول‌های استئوبلاست انسانی در دو روش کشت تک لایه‌ای و کشت سه بعدی هیدروکسی آپاتیت- تری‌کلسیم فسفات
چکیده فارسی مقاله خلاصه مقدمه: بیماری ها و آسیب های استخوانی شامل شکستگی های استخوانی در طی تصادفات و تروما در همه ی جوامع شیوع فراوانی دارد و در اکثر موارد استخوان خرد شده قادر به ترمیم نیست؛ به علاوه، روش های درمانی مورد استفاده نظیر پیوند بافت استخوانی به صورت آلوگرافت و اتوگرافت خطرات و مشکلاتی را به دنبال دارد. یکی از راه های درمان، استفاده از سلول های استخوانی خود فرد، کشت آن ها بر روی داربست مناسب و انتقال به بیمار می باشد. در این مطالعه، ضمن کشت سلول های استئوبلاست به صورت تک لایه ای و داربست هیدروکسی آپاتیت-تری کلسیم فسفات (HA-TC)، رفتار این سلول ها در دو نوع کشت متفاوت مورد بررسی قرار گرفت. روش ها: در جریان عمل جراحی کرانیوتومی در بیمارستان الزهرای (س) اصفهان از 5 فرد نمونه ی استخوانی تهیه و به روش استریل به آزمایشگاه ارسال شد. هر نمونه پس از شستشو با PBS به قطعات کوچک تقسیم و پس ازقرار دادن در پلیت محتوی محیط کشت به انکوباتور منتقل گردید. در روز 12-10 سلول ها شروع به خروج از استخوان نموده، پس از پوشاندن کف پلیت با استفاده از آنزیم Trypsin_EDTA ازکف پلیت جدا شد و به دوگروه تقسیم گردید. در گروه اول، سلول ها بر داربست HA-TC و در گروه دیگر به صورت تک لایه ای کشت داده شدند. رنگ آمیزی Van kossa، شمارش سلولی، روش MTT، رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز و روش فلوسایتومتری جهت بررسی ویژگی های سلول های استئوبلاستی به کار گرفته شد. یافته ها: در کشت سلول ها به صورت تک لایه ای، سلول هایی با مورفولوژی فیبروبلاستی و یا دوکی مشاهده شد. با رنگ آمیزی Van kossa وجود رسوبات مواد معدنی در دو گروه مشخص گردید. میزان تکثیر سلولی در داربست HA-TC نسبت به تک لایه ای بیشتر بود (001/0 > P). میزان فعالیت سلول های زنده نیز در داربست HA-TC نسبت به تک لایه ای بیشتر بود (001/0 > P). در رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز وجود گرانول های آبی مشاهده شد؛ در فلوسایتومتری در کشت اولیه 57 درصد سلول ها در پاساژ سوم 5 درصد سلول ها فعالیت آلکالین فسفاتازی از خود نشان دادند. نتیجه گیری: با توجه به نتایج تحقیق حاضر می توان گفت که داربست هیدروکسی آپاتیت- تری کلسیم داربست مناسب تری برای کشت سلول های استئوبلاستی نسبت به کشت تک لایه ای است. احتمال می رود علت این باشد که داربست هیدروکسی آپاتیت- تری کلسیم حاوی کلسیم و اجزای مشابه ماتریکس استخوانی است و وجود تخلخل و منافذ مناسب در این داربست موجب تسهیل تغذیه ی سلول ها نسبت به کشت تک لایه ای می شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی The Characteristics of Human Osteoblast Cells in Two Methods of Monolayer Culture in Hydroxyapatite-Tricalcium Phosphate Scafolds
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background: Bone diseases and injuries, including bone fractures during accidents and trauma, in all communities are prevalent and in most cases, crushed bone is not able to repair; various treatment ways including tissue graft from an allograft or autograft have risks and lead to problems. One method for treatment of bone fractures is using outologous osteoblasts with culturing on suitable scaffolds and then implant of cells to defect region. In this study, we cultured osteoblast cells on monolayer and more calcium phosphate hydroxyapatite (HA-TC) scaffolds and the behavior of these two types of cells in different cultures were analyzed. Methods: During the craniotomy operation in Alzahra hospital in five individual, bone samples were obtained and in sterile technique were sent to the laboratory. Each sample after washing with PBS was cut into small pieces and plates containing the medium culture were transferred to the incubator. In 10-12 days, the cells have started to leave the bones covering the floor plate and after using the enzyme Trypsin_EDTA isolated from plate divided into two groups. One group as HA-TC scaffolding and at the other group as a single layer were cultured. Staining Van kossa, MTT methods, alkaline phosphatase staining and flow cytometry were used to investigate osteoblast cells. Finding: Cultivation monolayer cells with fibroblast morphology were observed or round. Van kossa staining determined the mineral deposits in the two groups. The cell proliferation increased in cellular scaffolding HA-TC more than monolayer (P < 0.001). Results of MTT showed more activity items on living cells scaffold HA-TC than monolayer (P < 0.001). In alkaline phosphatase staining, blue granules were observed; in the flow cytometry, 57 percent of primary cultured cells and 5 percent in the third passage cells showed alkaline phosphatase activity. Conclusion: According to the results of this study, the hydroxyapatite scaffold is better than monolayer scaffold for osteoblast cells culture. This could be because of having more calcium and similar elements to bone matrix facilitate feeding cultured the cells.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله بتول هاشمی بنی | batool hashemi bani
استادیار، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.

فرشته علی اکبری | fereshteh ali akbari
دانشجوی دکتری، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران.

فرزانه صادقی | farzaneh sadeghi
کارشناس ارشد، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

ابراهیم اسفندیاری | ebrahim esfandiari
استاد، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

حسین صادقی | hossein sadeghi
استادیار، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران.

حمید بهرامیان | hamid bahramian
دانشیار، گروه علوم تشریحی، دانشکده ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

نشانی اینترنتی http://jims.mui.ac.ir/index.php/jims/article/view/599
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/103/article-103-319023.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده مقاله پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات