این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
صفحه اصلی
درباره پایگاه
فهرست سامانه ها
الزامات سامانه ها
فهرست سازمانی
تماس با ما
JCR 2016
جستجوی مقالات
یکشنبه 23 آذر 1404
ارمغان دانش
، جلد ۲۱، شماره ۱۲، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی
همسانه سازی و توالی یابی ژنهای ویرولانسompA و smpAاسنیتوباکتربامانی جدا شده از نمونه-های بیمارستانی
چکیده فارسی مقاله
چکیده اسنیتوباکتربامانی یک پاتوژن نوظهور و مهم در بروز عفونت های مختلف بیمارستانی از قبیل، عفونت دستگاه ادراری، بیمارستانی، مننژیت و دستگاه تنفسی می باشد. این میکروارگانیسم حدود سه دهه است که شیوع گسترده ای پیدا کرده و به کلاس های مختلف آنتی بیوتیک مقاوم شده اند. هدف از این مطالعه جداسازی، کلونینگ و توالی یابی دو ژن ویرولانس کاندیدای تهیه واکسن بر علیه اسنیتوباکتربامانی می باشد. مواد و روش ها: تعداد 30 نمونه عفونت های مختلف بیمارستانی(عفونت زخم، خون و عفونت های ادراری) از بیمارستانهای امام علی(ع) و آیت الله کاشانی شهرکرد تهیه شد. نمونه ها بر روی محیط های بلاد آگار و مک کانکی آگار کشت داده شدند. جداسازی و تشخیص به روشهای میکروسکوپی، کشت میکروبی و بیوشیمیایی انجام شد. دو ژن ompA و smpA با تکنیک PCR جداسازی و درون وکتور پلاسمیدی pTZ57R/T کلون شدند. صحت سازواره نوترکیب به دو روش PCR و هضم آنزیمی دوگانه انجام شد. دو ژن ompA و smpA کلون شده در پلاسمید pTZ57R/T توالی یابی شدند. نتایج: از 30 نمونه جمع آوری شده، 10 ایزوله اسنیتوباکتربامانی(33/33%)تشخیص داده شد. الکتروفورز محصولات PCR دو باند 1150 و 411 جفت بازی بدست آمد که به ترتیب مربوط به ژنهای ompA و smpA بود. پلاسمید pTZ57R/T دارای بازده بالا و صحت همسانه سازی به دو روش PCR و هضم آنزیمی دوگانه دو باند 1150 و 411 جفت بازی را نشان داد. نتایج توالی یابی تشابه 95-90 درصدی دو ژن ompA و smpA با توالی رفرنس در ncbi را تایید کرد. نتیجه گیری: نتایج بدست آمده نشان داد که پلاسمید pTZ57R/T برای کلون سازی قطعات بزرگDNA مناسب می باشد و با توجه به حفاظت شدگی بالای دو ژن ompA و smpA برای ساخت واکسن می توان از آنها استفاده نمود.
کلیدواژههای فارسی مقاله
اسنیتوباکتربامانی، همسانه سازی، ompA، smpA
عنوان انگلیسی
Cloning and sequencing of the ompA and smpA virulence genes of Acentobacter baumanniiisolated from clinical samples
چکیده انگلیسی مقاله
Abstract Background: Acinetobacterbaumannii has emerged as a medically important pathogen because of the increasing number of infections produced by this organism over the preceding three decades and the global spread of strains with resistance to multiple antibiotic classes. So, aim of this research, amplification, cloning and sequencing two virulence factor genes Acinetobacterbaumannii isolated from patients. Materials and Methods: Collecting samples of Acinetobacterbaumannii taken from different clinical cases of wounds, septicemia, and urinary tract infections. That was accomplished by taking (30) samples from Imam Ali and Kashani hospitals Shahrekord Township. Samples were cultured on solid media (McConkey and blood agars), and according to microscopical, cultural, and biochemical were identified. The coding sequence of AcinetobacterbaumanniiompA and smpA genes was isolated by PCR method. The ompA and smpA genes was inserted into pTZ57R/T as T/A cloningvector. Transformation was confirmed with plasmid extraction, followed by double digestion and PCR methods. Result: A. baumannii isolates were identified in 10 different patients. All isolates (33.33%) were recovered from patients in the intensive care unit (ICU). As a result of PCR and double digestion two band 1150 and 411bp ompA and smpA genes respectively were observed. The sequences was found to be 90-95% similar to that ref sequences obtained in GenBank. The sequence of ompA and smpA genes amplified by the specific primer is closely matched (90 and 95% respectively) with aA. baumannii strains. Conclusion: Transformation experiments revealed that these plasmids were capable to transform E. coli NB, an observation which indicates the ability of these plasmids to easy carrier large sequence into host. The ompA and smpA genes had “perfect” match (similarity, 90 and 95% respectively) with sequences of their corresponding gene (ompA and smpA genes) from GenBank as determined by using BLAST. So of this genes can used to construct DNA vaccine against Acinetobacterbaumannii.
کلیدواژههای انگلیسی مقاله
Acinetobacter baumannii, cloning, ompA, smpA
نویسندگان مقاله
حسین انصاری |
دانشگاه آزاد اسلامی واحد مرودشت
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه آزاد اسلامی مرودشت (Islamic azad university of marvdasht)
محمد کارگر |
دانشگاه آزاد جهرم
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه آزاد اسلامی جهرم (Islamic azad university of jahrom)
مهدی بیژن زاده |
دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز (Ahvaz jundishapur university of medical sciences)
مجتبی جعفری نیا |
دانشگاه آزاد اسلامی واحد مرودشت
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه آزاد اسلامی مرودشت (Islamic azad university of marvdasht)
عباس دوستی |
4 مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی
نشانی اینترنتی
http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-846-1&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله
دریافت فایل مقاله
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده
fa
موضوعات مقاله منتشر شده
میکروبیولوژی
نوع مقاله منتشر شده
پژوهشی
برگشت به:
صفحه اول پایگاه
|
نسخه مرتبط
|
نشریه مرتبط
|
فهرست نشریات