این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
فیض، جلد ۲۱، شماره ۱، صفحات ۲۸-۳۴
عنوان فارسی بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان VEGF۱۱۱b در سلول های انسانی HEK-۲۹۳
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: VEGF111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) است که اخیرا به­ عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول­ های HEK293 به­ منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است. مواد و روش ها: توالی VEGF111b توسط نرم­افزار OLIGO و اطلاعات ژن بانک NCBI طراحی و داخل وکتور pBUD.cE4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pBUD.VEGF111b با استفاده از کیت لیپوفکتامین به داخل سلول­ های HEK293 ترانسفکت شد. تولید VEGF111b 48 ساعت بعد از ترانسفکشن در عصاره لیز سلولی توسط وسترن بلاتینگ و آنتی ­بادیHuman anti-VEGF بررسی شد. میزان ترشح VEGF111b در عصاره لیز سلولی و محیط کشت سلولی به روش ELISA اندازه گیری گردید. نتایج: کلونیتگ صحیح قطعهVEGF111b در وکتور pBUD.cE4.1 توسط هضم آنزیمی و ژل الکتروفورز تائید شد. مشاهده باند شارپ 12 کیلودالتن در نتایج وسترن بلات عصاره لیز سلولی نشان­گر تولید پپتید نوترکیب VEGF111b در سلول­ های HEK293 بود. نتایج الایزا در جذب نوری 450 نانومتر برای VEGF111bدر محیط کشت سلولی و عصاره لیز سلولی به­ ترتیب برابر با 2/81±19/20 pg/ml و pg/ml7/42± 32/87 بود. و در نمونه ­های کنترل منفی بیان VEGF-111b مشاهده نشد. نتیجه گیری: یافته های این مطالعه نشان­گر قابلیت بالای انتقال و ترشح VEGF111b از دیواره سلول­ های HEK293 به محیط کشت سلولی بدون شکستگی و هضم پروتئولیتیکی است. به ­نظر می­ رسد تولید تجاری این پپتید دارویی و تخلیص از محیط کشت سلولی HEK293 با بازدهی بالا امکان­ پذیر باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله فاکتور رشد اندوتلیال عروقی A، ترشح، HEK293
عنوان انگلیسی Evaluation of anticancer peptide VEGF111b secretion in HEK293 human cells
چکیده انگلیسی مقاله Background: VEGF111b is a new isoform of vascular endothelial growth factor (VEGF) recently considered as a new anticancer drug. The aim of this study was to evaluate the VEGF111b secretion from HEK293 cell wall in order to commercial production of this recombinant factor. Materials and Methods: After the design of VEGF111b sequence using OLIGO software and NCBI gene bank data, it was cloned into the pBUD.cE4.1 vector. The pBUD.VEGF111b recombinant vector was transfected into HEK293 cells using lipofectamine kit. Forty-eight hours after the transfection the production of VEGF111b was estimated by Western blotting and Human anti VEGF antibody. The VEGF111b secretion into cell culture and cell lysate extract was measured using ELISA. Results: The correct cloning of VEGF111b into pBUD.cE4.1vector was confirmed using enzymatic digestion and gel electrophoresis. The observed production of recombinant peptide in HEK293 was confirmed with 12KDa band in cell lysate extract of Western blotting. The ELISA results at 450 nanometer absorbance for cell culture media and cell lysate extract were 19.20±2.81 pg/ml and 32.87±7.42 pg/ml, respectively. However, no VEGF111b expression was observed in negative controls. Conclusion: The findings of this study indicate the powerful ability of transformation and secretion of VEGF111b from HEK293 cell wall to cell culture media with no breaking and proteolytic digestion. It seems that the commercial production and purification of this therapeutic peptide from HEK293 cell culture would be possible with high efficiency.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Vascular Endothelial Growth Factor A, Secretion, HEK293
نویسندگان مقاله مرتضی صادقی | morteza sadeghi
human genetic research center, baqiyatallah medical sciences university, tehran, i. r. iran.
مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (Baqiyatallah university of medical sciences)

زهره حجتی | zohreh hojati
department of biology, faculty of sciences, university of isfahan, isfahan, i. r. iran.
بخش ژنتیک، گروه زیست شناسی، دانشگاه اصفهان، اصفهان
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه اصفهان (Isfahan university)

نشانی اینترنتی http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-176-1324&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/24/article-24-327692.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده عمومی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات