این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Journal of Reproduction and Infertility، جلد ۷، شماره ۴، صفحات ۳۴۹-۳۵۸
عنوان فارسی بررسی اثر فاکتور رشد NGF، RA، Shh بر تمایز سلول‌های بنیادی جنینی موش به سلول‌های عصبی و الیگوسیتی
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: سلول‌های بنیادی جنینی (ES) سلول‌های همه توانی هستند که توانایی تمایز به انواع سلول‌های تخصصی بالغ را دارا می‌باشند و در حال حاضر و آینده نزدیک امکان استفاده از این سلولها در درمان بسیاری از بیماریها با روش سلول درمانی وجود دارد. به نظر می‌رسد در آینده بتوان برخی بیماری‌های سیستم عصبی را با استفاده از فاکتورهای مؤثر بر تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های عصبی و گلیالی درمان نمود، لذا در این تحقیق سلول‌های بنیادی جنینی موش به صورت همه توان و تمایز نیافته کشت و تکثیر داده شد و سپس تأثیرات فاکتورهای رشد NGF، Shh، RA به منظور القای تمایز این سلولها به سلول‌های عصبی و گلیالی مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: سلول‌های بنیادی جنینی (از موش نژاد 129 بنام CCB) را روی فیبروبلاست جنینی موش نژاد C57/BL6 کشت و تکثیر داده و با روش قطرات معلق از آنها اجسام جنینی (EBs) تهیه شد. بعد از انتقال و کشت کلونی‌های EBs بر روی پلیت کشت پوشانیده با فیبرونکتین، فاکتورهای القایی NGF وShh به ترتیب با غلظت‌های ng/ml50 و 100، ng/ml300 و 500 و RA با غلظت M1و در گروه‌های دیگر bFGF با غلظت ng/ml20 به محیط کشت اختصاصی سلول‌های پیش‌ساز عصبی اضافه شد تا سلولها به سمت تمایز عصبی هدایت شوند. به منظور بررسی تمایز به انواع سلول‌های عصبی و گلیالی با روش RT-PCR بیان ژن‌های اختصاصی سلول‌های عصبی شامل S100، Olig-2،Nurr-1، Nkx2.2 و Nestin ارزیابی شد و علاوه بر این از روش ایمونوسیتوشیمی برای تأیید حضور پروتئین MAP-2 استفاده شد. نتایج: در این تحقیق، بررسی‌های مولکولی نشان داد که هر یک از این فاکتورهای رشد با تأثیر در بیان ژن‌های‌ اختصاصی سلول‌های عصبی یک یا چند مسیر مولکولی را فعال می‌کنند که در تمایز سلول‌های مختلف سیستم عصبی نقش اساسی دارند. رنگ‌آمیزی اختصاصی این سلولها با آنتی‌بادی MAP-2 نشان داد که سلول‌های حاصل دارای زوائد دندریتی خاص سلول‌های عصبی یا نورون هستند. نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های این تحقیق سلول‌های بنیادی جنینی همه توان و تمایز نیافته در حضور فاکتورهای رشد RA، NGF، Shh به سلول‌های عصبی و اولیگودندروسیتی تمایز می‌یابند؛ به‌طوریکه هر یک از این عوامل در مسیر خاص تمایزی سلول‌های تخصصی سیستم عصبی مؤثر بوده و حتی میزان غلظت افزوده شده عوامل فوق نیز بر چگونگی تمایز یافتن این سلولها مؤثر می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Evaluating the effects of NGF, RA and Shh growth factors on murine embryonic stem cell differentiation into neurons and oligocytes
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: Embryonic stem (ES) cells are pluripotent cells that can differentiate into all types of specific adult cells and are used for cell therapy in certain diseases. It seems that the inductive factors may be used to produce neurons and gliocytes out of ES cells for the treatment of some nervous system diseases in future. In this research, pluripotent and undifferentiated murine embryonic cells were cultured and effects of the growth factors NGF, RA and Shh were studied for the induction of neural and glial differentiations. Materials & Methods: CCB ES cell line derived from mouse strain 129 were cultured on inactivated embryonic fibroblasts from C57/BL6 mice and embryonic bodies (EBs) were pre-pared and transplanted onto culture plates covered by fibronectin and growth factors NGF, Shh and RA with respective concentrations of 50 and 100 ng/ml, 300 and 500 ng/ml and 1 μM and in some groups bFGF with a concentration of 20 ng/ml were added to the specific culture medium for neural cell precursors to induce cell differentiation into neural cells. For studying differentiation into many types of neurons and oligodendrocyte, gene expression of specific neu-ral genes such as nestin, Nkx2-2, Nurr1, S100 and Olig-2 were assessed by RT-PCR and immu-nocytochemistry assays were used to confirm the presence of MAP-2 protein. Results: In this study, genetic evaluations showed that each of the previously mentioned growth factors activate some molecular mechanisms that have essential effects on differentiation into different kinds of nervous system cells by affecting the expression of marker genes. Cytoche-mistry of these cells by monoclonal MAP-2 antibody showed the resultant cells have dendrites that are specific for neural cells or neurons. Conclusion: The findings indicated that pluripotent and undifferentiated CCB ES cells underwent differentiation into neural cells and oligodendrocytes under the effects of NGF, Shh and RA growth factors and this neural induction was confirmed by the presence of molecular and antigenic markers in these cells. Each of these factors was effective in the induction of different-tiation of specialized neural cells and even different concentrations of the factors induced parti-cular cell differentiations.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
نشانی اینترنتی http://www.jri.ir/article/256
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/128/article-128-376980.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات