این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Journal of Reproduction and Infertility، جلد ۷، شماره ۱، صفحات ۳۷-۴۵
عنوان فارسی اثرات ضدیخ‌های مختلف بر میزان شکست DNA در جنین‌های خوک تولید شده به روش In vitro
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: تاکنون از ضدیخ‌های زیادی جهت انجماد جنین‌های مرحله قبل از لانه‌گزینی به منظور جلوگیری از تشکیل یخ داخل سلولی استفاده شده است، ولی با این وجود تعداد زیادی از جنینها پس از ذوب به دلایل مختلفی از جمله نوع ضدیخ مورد استفاده و به دنبال آن شکست DNA جنین، در اثر سمیت ضدیخ از بین می‌روند. اتیلن‌گلیکول، 1و2 پروپاندیول و گلیسرول ضدیخ‌های معمول می‌باشند که به طور وسیعی برای انجماد جنین حیوانات گوناگون و همچنین انسان استفاده می‌شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی اثرات ضدیخ‌های مختلف روی میزان شکست DNA بلاستوسیست‌های خوک به منظور تعیین ضدیخ مناسب برای انجماد جنین خوک بود. روش بررسی: تعداد 197 بلاستوسیست خوک به روش In vitro تولید شدند و به طور تصادفی به چهار گروه تقسیم گردیدند. تعداد 40 بلاستوسیست به‌عنوان گروه کنترل به مدت یک ساعت در محلول PBSبدون ضدیخ قرار گرفتند. بقیه بلاستوسیستها در سه گروه متفاوت در معرض 3 نوع محلول ضدیخ با غلظت 10% به مدت یک ساعت در یک روش 3 مرحله‌ای در درجه حرارت اتاق قرار گرفتند. به‌طوریکه40 بلاستوسیست در معرض اتیلن‌گلیکول و 40 بلاستوسیست در معرض 1و2 پروپاندیول و 40 بلاستوسیست در معرض گلیسرول قرار گرفتند. شواهد مورفولوژیک از زنده ماندن بلاستوسیستها پس از 24 ساعت کشت مجدد در گروه‌های مختلف در محیط NCSU-37، براساس تشکیل مجدد حفره بلاستوسل به وسیله مشاهده استریومیکروسکوپی با بزرگنمایی 40 برابر ارزیابی گردید. شاخص میزان شکست DNA در آنها پس از نشانه‌گذاری با تکنیک TUNEL و رنگ‌آمیزی زمینه‌ای با PI مشخص شد. داده‌ها با آنالیز واریانس و آزمون تعقیبی فیشر و با کمک نرم افزار Stutview مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و سطح معنی‌داری 05/0 در نظر گرفته شد. نتایج: قرار گرفتن بلاستوسیست‌های خوک در معرض ضدیخ‌های مختلف، منجر به افزایش تعداد هسته‌هایی با شکست DNA می‌شود. در ضمن، میزان شاخص شکست DNA در بلاستوسیست‌های دارای بلاستوسل نسبت به بلاستوسیست‌های فاقد بلاستوسل، بدون توجه به نوع ضدیخ کمتر بود. نتیجه‌گیری: براساس نتایج این مطالعه در معرض ضدیخ قرار گرفتن بلاستوسیست‌های خوک، میزان شکست DNA را افزایش می‌دهد و در این میان اتیلن‌گلیکول کمترین میزان سمیت را دارد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله ضد یخ، سمیت سلولی، خوک، شکست DNA، بلاستوسیست، آپوپتوزیس
عنوان انگلیسی Influence of cryoprotectants on DNA fragmentation of in vitro produced porcine blastocysts
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: The aim of the present study was to investigate the effects of different cryoprotectants (CPs) on DNA fragmentation of in vitro produced blastocysts to determine an appropriate cryoprotectant for embryo cryopreservation. Therefore, the precise aims of the study were to assess the toxic effects of different cryoprotectants in terms of survival rate and to evaluate the effects of different CPs on DNA fragmentation in in vitro produced porcine blastocysts. Ethylene glycol, 1,2 propanediol and glycerol are common cryoprotectants widely used for embryo cryopreservation in different animals as well as humans. Materials & Methods: 197 porcine blastocysts were produced in vitro and 160 blastocysts were random-ly selected and divided into 4 groups. 40 blastocysts were placed in phosphate buffer solution (PBS) with-out any cryoprotectants for 1 hour in room temperature (23-25C) as the control group. The rest of the blastocysts were exposed to 3 different cryoprotectants (10% solutions) ethylene glycol (EG), 1, 2 pro-panediol (PG) and glycerol (Gly) for 1 hour in a 3- step method in room temperature. The survival rate was assessed after culture in NCSU-37 medium for 24 hours as the proportion of recovered embryos with the reformation of blastocele observed by stereomicroscopy at 40 magnifications. The apoptotic indices were evaluated after staining by TUNEL technique to label apoptotic nuclei and later were counter-stained by propidium iodide (PI) to label all nuclei and were analyzed by fluorescent microscopy. Then, the sur-vival rate was compared with the data obtained from the control group. Through ANOVA and Fishers exact test the data were analyzed while employing StatView software and the level of significance was considered as 0.05%. Results: Exposing porcine blastocysts to different cryoprotectants results in an increase in DNA fragmentation, although the apoptotic index in blastocysts with blastocele compared to those without them were lower in the study, disregard of the kind of cryoprotectant. Conclusion: It is concluded that CPs can decrease the survival rate of porcine blastocysts by increasing the percentage of DNA fragmentation but EG has the least effect on DNA fragmentation.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
نشانی اینترنتی http://www.jri.ir/article/222
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/128/article-128-377013.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات