این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Journal of Reproduction and Infertility، جلد ۵، شماره ۱، صفحات ۲۳-۳۵
عنوان فارسی طراحی یک روش الایزا با استفاده از آنتی‌ژن‌های سطحی اسپرم جهت اندازه‌گیری آنتی‌بادی ضد اسپرم و مقایسه آن با تست SpermMar
چکیده فارسی مقاله مقدمه: تاثیر آنتی‌بادی ضداسپرم با میزان شیوع 26-6% در ایجاد ناباروری به خوبی شناخته شده‌است. لذا اندازه‌گیری آن در سرم و یا مایعات بیولوژیک مردان و زنان از اهمیت کلینیکی برخوردار است. امروزه یکی از مهمترین موضوعات مورد بحث در ناباروری ایمونولوژیک، طراحی روشی استاندارد جهت اندازه‌گیری ASA می‌باشد. مطالعات انجام شده نشان می‌دهند که روش الایزا در بین روش‌های تشخیص ASA، در صورتی‌که از آنتی‌ژن‌های سطحی اسپرم با حداقل آلودگی به آنتی‌ژن‌های غیر‌اسپرمی وآنتی‌ژن‌های داخلی اسپرم استفاده گردد، روشی بسیار حساس و قابل اعتماد بوده و بهتر از سایر روش‌های تشخیص و اندازه‌گیری ASA می‌باشد. بنابراین هدف از مطالعه حاضر طراحی یک روش الایزا با روش قابل قبول استخراج آنتی‌ژن‌های سطح اسپرم و با حداقل آلودگی به سایر پروتئین‌‌های اسپرم جهت تعیین میزان ASA می‌باشد. مواد و روشها: در این مطالعه، تکنیک الایزای غیرمستقیم با استفاده از سه روش مختلف استخراج آنتی‌ژن‌های سطح اسپرم شامل روش سونیکاسیون، استفاده از دترجنت سدیم دودسیل سولفات و نیز استفاده از دترجنت لیتیوم دی‌یدوسالیسیلات، طراحی گردید. در نهایت پس از طراحی روش، الایزای طراحی شده با آنتی‌ژن حاصل از سه روش مختلف استخراج آنتی‌ژن‌های سطح اسپرم، به همراه دو کیت الایزای تجاری مشابه با تست روتین مراکز درمان ناباروری (SpermMar) مورد مقایسه قرار گرفته است. نتایج: در تجربه عملی از 28 سرم مشکوک به ASA که توسط تستSpermMar ، 16 مورد جواب مثبت داشتند، به روش الایزای طراحی شده با آنتی‌ژن‌های حاصل از دترجنت LIS، 14 سرم، جواب مثبت حقیقی نشان داد و تنها 2 مورد جواب منفی کاذب وجود داشت و جواب مثبت کاذب نیز مشاهده نگردید؛ در حالیکه در روش سونیکاسیون فقط 5 مـورد مثبت حقیقی داشت و 11 مورد جواب منفی کاذب نشان ‌داد. روش استفاده از دترجنت SDS نیز 13 مـورد مثبت حقیقی، 3 مورد جواب منفی کاذب و 4 مورد جواب مثبت کاذب نشان داد. به علاوه، دو کیت تجاری به ترتیب 7 و4 مورد جواب مثبت حقیقی نشان داد. در هر دو کیت‌های تجاری 1 مورد جواب مثبت کاذب و نیز به ترتیب با 9 و12 مورد جواب منفی کاذب همراه بودند. براساس نتایح حاصل روش الایزا با استفاده از دترجنت LIS، حساسیت(5/87%) مناسبی داشته و از ویژگی و کارآیی بسیار بالایی در مقایسه با سایر روش‌ها برخوردار است (به ترتیب 100% و 8/92%). از طرف دیگر همبستگی معنی‌داری نیز بین روش طراحی شده وSpermMar وجود دارد(572/0=r). نتیجه گیری: براساس نتایج این مطالعه روش الایزای طراحی شده با استفاده از آنتی‌ژن‌های استخراج شده از سطح اسپرم به کمک دترجنت LIS دارای حداقل نتایج کاذب است و بهتر از سایر روش‌های استخراج آنتی‌ژن‌های سطحی اسپرم و کیت‌های مشابه خارجی جهت تشخیص و تعیین میزان ASA می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Designing an ELISA method using sperm surface antigens for detection of antisperm antibody in comparison with SpermMar test
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: The role of antisperm antibodies with a prevalence of 6-26% is well known in immunological infertility. Thus, there is clinical importance to determine ASA levels in both male and female. Nowadays, one of the most important discussed controversies in the field of immunological infertility is establishing an standard method to determine ASA. It seems that ELISA method will be more sensitive, specific and more diagnostic in determination of ASA if sperm surface antigens could be used as coated antigens, with least contamination to sperm intracellular antigens and nonspermic antigens. So, the aim of this study is designing an ELISA method by using the best method of sperm antigens extraction with at least contamination. Materials and Methods: In this study we designed an ELISA method with three different extraction methods of sperm antigens including sonication method, using SDS detergent, and application of LIS detergent, then we compared ELISA method based on the three extraction methods as well as two similar commercial ELISA kit (IBL Co, and Bioserv Co) with SpermMar test. Results: Comparing designed method with commercial kit indicated that among 28 sera which had 16 positive sera and 12 negative sera by SpermMar, 14 sera were true positive by LIS method and only 2 cases were false negative without any false positive results, whereas there were 5 true positive results and 11 cases false negative by the sonication method. The SDS method also had 13 true positive results with 3 false negative and 4 false positive results. In addition, two commercial kit had in turn 7 and 4 cases true positive and both of them had 1 case false positive and in turn 9 and 12 cases with false negative result. ELISA method designed by LIS detergent has adequate sensitivity (87.5%) with higher specificity (100%) and efficacy (92.8 %) than other extraction methods. There is a significant correlation between this designed method and SpermMar test (r=0.572). Conclusion: The results of this study indicated that ELISA method by LIS antigens has at least contamination with nonspermic antigens and it is better than other extraction methods and commercial ELISA kits for detection of antisperm antibody.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
نشانی اینترنتی http://www.jri.ir/article/140
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/128/article-128-377093.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات