این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
ارمغان دانش، جلد ۲۲، شماره ۲، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی مقایسه عملکردی مونوسیت های جدا شده از فلاسک های کشت در روش‌های لیدوکائین/EDTA ، تریپسین و PBS سرد/EDTA
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: دسترسی آسان، استحصال سریع و پتانسیل بالای درمانی سلولهای مونوسیت، موجب شده است که در تحقیقات سلول درمانی توجه ویژهای به این سلول شود. مونوسیتها از جمله سلولهای چسبنده به فلاسک محسوب میگردند. بنابراین یافتن روش جداسازی مناسب که کمترین آسیب به سلول و عملکرد آن برساند از اهمیت خاصی برخوردار است. در این مطالعه به مقایسه قابلیتهای عملکردی مونوسیت بعد از جداسازی با سه روش لیدوکائین/EDTA ، تریپسین و PBS سرد/EDTA پرداخته است. روش بررسی: در این مطالعه تجربی،بعد از استخراج سلول­های تک هسته­ای خون محیطی از موش BALB/c ، سلول­هاcell/ml) 107×1) در محیط کشت RPMI در فلاسک کشت T25 به مدت 4 ساعت انکوبه شدند. بعد از اتمام زمان انکوباسیون سلول­های غیر چسبنده (عمدتا لنفوسیتها) با دو بار شستشوی آرام جدا شده و از فلاسک خارج گردیدند. سپس برای جداسازی سلول­های مونوسیت چسبیده از 3 روش تریپسین، روش لیدوکائین و فسفات بافر سالین سرد استفاده گردید و بعد از جداسازی سلول­ها با هر روش، قابلیت­های عملکردی مونوسیت­ها سنجیده شد و با هم دیگر مقایسه گردیدند. داده­ها به شیوه آنالیز واریانس یک طرفه تحلیل شدند. P< 0.05 به عنوان سطح معنی دار در نظر گرفته شد. یافته­ها: نتایج حاصل نشان داد که، میزان استحصال، زنده مانی،فعالیت متابولیک، درصد فاگوسیتوز، انفجار تنفسی، میزان نیتریک اکساید و قابلیت مخمر کشی در سلول­هایی که با روش لیدوکائین جداشده بودند نسبت به گروه­های دیگر به طور معنی داری بیشتر بود.هرچند که شیوه استفاده از تریپسین با وجود اینکه موجب استحصال سلول بیشتری نسبت به روش PBS سرد می­شود ولی این سلول­ها در مقایسه با روش لیدوکائین/EDTA و یا PBS سرد/EDTA، اختلال فیزیولوژیک قابل توجهی دارند. برداشت نوترال رد توسط سلول‌های مونوسیت جداسازی شده با روش تریپسین نسبت به دو روش دیگر در سطح پایین­تری می­باشد. در مقایسه بین شیوه PBS سرد و لیدوکائین به نظر می­رسد که بین مونوسیت­های به دست آمده از دو روش فوق از نظر برداشت نوترال رد اختلاف معنی داری وجود ندارد. نتیجه گیری: در مقایسه با روشهای تریپسین و PBS سرد/EDTA ،روش لیدوکائین/EDTA یک مناسب جهت جداسازی مونوسیتهای چسبیده به کف فلاسک به دلیل استحصال سلولهای بشتر و کارآمد می­باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Functional Comparison of monocytes isolated from culture flask by lidocaine/EDTA, trypsin and cold-PBS/EDTA
چکیده انگلیسی مقاله Background & aim: Easy access, quick recovery and high therapeutic potential of monocyte cells, led to special attention to this cell in cell therapy. Monocytes are flask-adherent cells. Therefore, it is important to find a suitable separation methods with minimal damage to the cells and their functions. This study was done to investigate the comparison between monocytes functions after isolation with three different protocols including: lidocaine / EDTA, trypsin and cold PBS / EDTA. Methods: In this experimental study, isolated mononuclear cells (1×107 cell/ml) from the peripheral blood of BALB/c mice were incubated for 4 hours in T25 culture flasks in RPMI culture mediua. After the incubation time, non-adherent cells (mainly lymphocytes) were separated by two washes. Then, tree different method including trypsin, lidocaine and cold PBS, were used to isolate adherent monocytes. The functional activity of monocytes was evaluated after isolating cells by each method. The data were analyzed using one-way ANOVA. p< 0.05 were considered statistically significant. Results: The results showed that the isolation rate, viability, metabolic activity, phagocytosis percent respiratory burst, yeast cidal and the levels of nitric oxide in cells that were isolated using lidocaine were significantly higher than other groups. However, trypsin led to isolate more cells than the cooled PBS but these cells had more physiologic impairment compared to lidocaine / EDTA or cold PBS / EDTA. Neutral red uptake by trypsin isolated monocyte was lower the cells isolated by other procedures. The results indicate there is no significant difference for neutral red intake between cold PBS and lidocaine. Conclusion: lidocaine / EDTA is a valuable procedure to achieve higher calls with appropriated efficacy compared to trypsin or cold PBS / EDTA procedure.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله هادی اسمعیلی گورچین قلعه | hadi esmaili gourvarchin galeh
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, urmia university, urmia, iran.
دانشگاه ارومیه
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه ارومیه (Urmia university)

میثم ابطحی فروشانی | meysam abtahi froushani
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, urmia university, urmia, iran.
دانشگاه ارومیه
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه ارومیه (Urmia university)

ناهیده افضل آهنگران | nahideh afzal ahangaran
department of microbiology, faculty of veterinary medicine, urmia university, urmia, iran.
دانشگاه ارومیه
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه ارومیه (Urmia university)

سیامک ناجی حدادی | siamak naji hadai
solid tumor research center, urmia university of medical sciences, urmia, iran.
دانشگاه علوم پزشکی ارومیه
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی ارومیه (Urmia university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-337-3&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ایمونولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات