این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۷، شماره ۲، صفحات ۵۰-۶۰
عنوان فارسی بهینه‌سازی رمزه و مقایسه‌ی بیان فاکتوررشد اکتیوین A بصورت نوترکیب در میزبان‌های باکتریایی BL۲۱(DE۳) ، BL۲۱(DE۳)pLysS وRosetta gami BL۲۱(DE۳)
چکیده فارسی مقاله پروتئین اکتیوینA متشکل از دو دایمر βA بصورت یک پری-پرو-پروتئین با طول 426 آمینواسید سنتز می شود که پس ازحذف بخشهای پری و پرو، پروتئین بالغ با طول 116 آمینواسید حاصل می‌شود. این پروتئین که اولین بار از مایع فولیکولی گوسفند بعنوان یک محرک قدرتمند برای تولید هورمون FSH جداسازی شد، دارای عملکردهای گوناگونی مثل حفظ و بقای سلول های عصبی، آپوپتوز، رشد و تمایز در انسان می باشد. از آنجاییکه پروتئین اکتیوینA دارای کاربردهای متعددی در زمینه پزشکی مانند تمایز سلول های بنیادی، ترمیم زخم، درمان بیماری های تحلیل عصبی مانند آلزایمر و ...است برای اولین‏بار در این تحقیق در سه سویه‏ی متفاوت باکتری E.coli بیان شد. از آنجاییکه پروتئین مذکور در ساختار فعال و عملکردی خود دارای پیوندهای دی‏سولفیدی است، محیط احیا کننده‏ی سیتوپلاسم E.coli برای بیان آن مناسب نمی‌باشد لذا، محیط اکسید کننده‌ی پری‏پلاسم جهت تولید آن همراه با تاخوردگی صحیح مورد توجه قرار گرفت. در این تحقیق، cDNA ژن اکتیوین A انسانی بدست آمده از بانک اطلاعاتی NCBI پس از بهینه‌سازی رمزه به همراه پپتید نشانه تغییریافته آنزیم آلفا آمیلاز باکتری باسیلوس لیکنی فورمیس بومی ‌ایران در وکتور بیانی pET21b(+)، ساب کون و سپس به روش ترنسفورماسیون به سویه‌های BL21(DE3)pLysS ،BL21(DE3)Rosetta gami و BL21(DE3) انتقال یافت. پس از بیان همزمان با استفاده از القاگر IPTG ، محتوای پروتئینی استخراج شده از هر سه سویه‏ با استفاده از تکنیکهای SDS-PAGE ، دات بلات و وسترن بلات با یکدیگر مقایسه گردید. نتایج نشان دهنده بیان در هر سه سویه باکتریایی بویژه در Rosetta gamiو DE3 می باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله اکتیوین A، پپتید نشانه آنزیم آلفا آمیلاز، E.coli،
عنوان انگلیسی Codon Optimization and Comparison of Recombinant Human Activin A Expression in BL21(DE3)pLysS, BL21(DE3) Rosetta gami and BL21(DE3) Bacterial Hosts
چکیده انگلیسی مقاله Human activin A is a homodimer of βA subunit which is synthesized in the form of prepro-activin with 426 amino acids; mature activin A with 116 amino acids is processed from this larger precursor protein. This protein which was extracted for the first time from follicular fluid is a strong stimulator of FSH biosynthesis. The functions have been found to be exerted by activin, including roles in cell proliferation, differentiation, apoptosis and survival of neurons. As this protein plays a considerable role in the treatment of neurodegenerative disease such as Alzheimer,s disease and wound repair, in this study for the first time was expressed in three different strains of E.coli. Activin A has disulfide bonds in its native and functional structure, so the cytoplasmic reducing environment of E.coli is not appropriate for its expression. Therefore, the oxidative space of periplasm for production of correctly folded activin A was considered. In this study, h-activin A cDNA and modified Iranian Bacillus Licheniformis α-amylase signal peptide obtained from NCBI data bank after codon optimization was cloned in pET21b(+) vector and transformed to BL21(DE3)pLysS, BL21(DE3)Rosetta gami and BL21(DE3) strains of E.coli. Expression occurred via induction of promoter with IPTG. Consequently, extracted proteins from these three strains were compared with each other using SDS-PAGE, Dot blot and western blot techniques. The data shows activin A expression especially in BL21(DE3) and BL21(DE3)Rosetta gami strains of E.coli.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Activin A, α-amylase signal peptide, E.coli
نویسندگان مقاله زهرا حاجی حسن |
هیات علمی دانشگاه تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

سید کاظم حسینی | seyed kazem
کارشناس ارشد فارغ التحصیل از دانشکده علوم و فنون نوین دانشگاه تهران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تهران (Tehran university)

علیرضا زمردی پور |
هیات علمی پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

نشانی اینترنتی http://biot.modares.ac.ir/article_14172_b459a0479f80654ca86717cfc5752fca.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/899/article-899-501064.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات