این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۲، شماره ۱، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی همسانه¬سازی ژن LysA در وکتور بیانی در راستای افزایش تولید اسیدآمینه L- لیزین
چکیده فارسی مقاله L – لیزین یکی از اسیدهای¬آمینه ضروری است که در تغذیه انسان و دام اهمیت بسزایی دارد. این اسیدآمینه به دلیل کاربرد بسیار در صنایع دارویی و غذایی حائز اهمیت می¬باشد. تولید صنعتی لیزین از نظر اقتصادی بسیار مهم است. سالانه چندین هزار تن لیزین در جهان بوسیله Corynebacterium glutamicum تولید می¬شود. روش بررسی: پس از تهیه پرایمرهای اختصاصی با دو توالی برشی برای آنزیم¬های NheI و HindIII، ژن مورد نظر با روش PCR تکثیر یافت و جهت تعیین ترادف و هضم آنزیمی مناسب در وکتور pTZ57R/T کلون گردید. پس از تعیین ترادف و اطمینان از صحت ژن مورد نظر، قطعه ژنی با انتهای چسبنده در وکتور بیانی pET28a کلون و در سویه E.coli BL21(DE3) ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب با روش¬های هضم آنزیمی و تعیین ترادف ارزیابی شد. یافته¬ها: ژن LysA به طول kb 3/1 با توالی صحیح کلون گردید. هضم آنزیمی با موفقیت انجام شد بدین ترتیب که ژن LysA به طور کامل از پلاسمید جدا گردید. همسانه سازی با استفاده از SDS-PAGE تایید شد. بحث: در این مطالعه برای اولین بار بیان ژن آنزیم دی¬آمینوپیمیلات¬دکربوکسیلاز (4.1.1.20 EC) همسانه گردید و وکتور بیانی بررسی شد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Cloning of LysA gene in expression vector in order to increase the production rate of L-lysine
چکیده انگلیسی مقاله Background: L-lysine is essential amino acid for human and animal nutrition. L-lysine is useful as medicament, chemical agent, food material (food industry) and feed additive (animal food). The industrial production of lysine has become an economically important industrial process. Several hundred thousands tones of L-lysine are produced annually worldwide, almost exclusively using Corynebacterium glutamicum. Study methods: To amplify LysA gene from C.glutamicum, two primers with NheI and HindIII restriction sites were designed. PCR was performed and PCR product was ligated with pTZ57R/T. Recombinant plasmid sequence was determined. LysA with sticky end was ligated with digested pET28a vector and ligation mixture was transformed in E.coli BL21(DE3). The recombinant plasmid was isolated with enzymatic digestion and sequencing. Results: LysA gene, a fragment with 1.3 kb, was cloned. PCR products and enzymatic digestion of extracted vectors with HindIII and NheI, sequencing and SDS-PAGE confirmed the authenticity of cloning. Recombinant bacterial colonies were investigated and confirmed by two methods (PCR and enzymatic digestion). Conclusion: In this study for the first time, the expression rate of Meso- diaminopimelate decarboxylase enzyme (EC 4.1.1.20) in this expression vector was investigated and was increased significantly.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سارا چراغی |
انستیتو پاستور
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

عظیم اکبرزاده |
انستیتوپاستور ایران

رضا حاجی حسینی |
دانشگاه پیام نور

هادی انصاری هادیپور | ansari hadipour
دانشگاه اراک
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه اراک (Arak university)

سمیه حمزه ای تاج | hamzehie taj
انستیتوپاستور ایران

سمانه خادمی مزده | khademi mazdeh
انستیتوپاستور ایران

محمدرضا مهرابی | mohammad reza
انستیتوپاستور ایران

علی فرهنگی |
انستیتوپاستور ایران

زهرا صفاری |
انستیتوپاستور ایران

سهیل قاسمی |
انستیوپاستور ایران

نشانی اینترنتی http://biot.modares.ac.ir/article_3310_9812a3796e6d2151232f3121bf7e3f06.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/899/article-899-501068.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات