این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۱، شماره ۱، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی جداسازی و کلونینگ ژن فیوژن (F) از ویروس سرخک سوش واکسینال (AIK-C)
چکیده فارسی مقاله خلاصه مقدمه: ویروس سرخک عضو خانواده پارامیکسو ویروسها و از جنس موربیلی ویروسها است که دارای ژنوم RNA با قطبیت منفی است. روش: در این طرح ابتدا اقدام به استخراج RNA از محیط حاوی ویروسهای سرخک سوش واکسینال AIK-C که روی سلولهای MRC-5 رشد کرده بودند٬ گردید.RNA استخراج شده فورا " جهت ساخت cDNA تک رشته ای با استفاده از واکنش نسخه برداری معکوس مورد استفاده قرار گرفت. cDNA تک رشته ای بعنوان رشته الگو جهت تکثیر ژن F بوسیله پرایمرهای اختصاصی در واکنش PCRاستفاده شد. محصول PCR با طول مورد نظرbp 1662 درون وکتورهای بیانی pET-28a(+) و pET-22b(+) کلون گردید. جهت تایید کلونینگ٬ پلاسمیدهای نوترکیب بدرون سلولهای مستعد E.coli DH5α ترانسفورم شدند وکلونیهای بدست آمده با استفاده از PCR مستقیم غربالگری شدند. سپس پلاسمیدهای نوترکیب بروش لیز قلیایی استخراج شدند یافته ها: هضم آنزیمی پلاسمیدهای نوترکیب با استفاده از آنزیمهای محدود الاثر Nde I وHindIII انجام گرفت که قطعه DNA بطول bp 1662 جداسازی شد. پلاسمید نوترکیب pET-28aF توسط شرکت MWG آلمان تعیین توالی شد. مقایسه این توالی با توالی ژن F ویروس سرخک از بانک ژن (سوش واکسینال ادمونستون (AIK-C) با Accession number : AF266286) انجام گرفت و همولوژی بالایی برای این ژن مشاهده گردید. نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان داد ژن F بسیار حفاظت شده و پایدار است. این پایداری باعث اهمیت بررسی این ژن در تهیه واکسن نوترکیب شده است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله "،ویروس سرخک، "، ژن F، "، پلاسمید، "، کلونینگ،
عنوان انگلیسی Separating and Cloning fusion gene of measles virus (AIK-C) vaccine strain
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Introduction: Measles virus (MV) belongs to the morbilivirus genus of paramyxoviridae family, and has single stranded, negative polarity, non segmented RNA genome. Method: In this research, the total RNA was extracted of measles virus (AIK-C) vaccine strain. The extracted RNA was immediately used in reverse transcription reaction to generate cDNA. The 1st strand cDNA was used to amplify the F gene by specific primers in a reaction PCR. The PCR product with the expected size of 1662 bp was cloned into expression plasmids pET-22b(+) and pET-28a(+). The recombinant plasmids were transformed into competent E.coli DH5α cells and clonies were screened with direct PCR. The recombinant plasmids were extracted by Alkaline lysis and were compared with non- recombinant plasmids in molecular weight. Results: Recombinant plasmids were digested with Nde I and Hind III restriction enzymes. The DNA band with an approximate size of 1662 bp was detected on 1.5% agarose gel. The recombinant plasmid pET-28a(+) was sequenced, comparison of this sequence with the coding sequence F protein of measles virus (AIK-C) in Genbank (AF266286) was revealed high degree of homology and showed that F gene is highly conserved. Conclusion: It was showed that F gene is highly conserved. Thus F gene is important for studing in order to produce recombinant vaccine.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Measles virus", F gene", plasmids", cloning"
نویسندگان مقاله ملیحه اسماعیل زاده خراسانی | esmaeilzadeh khorasani
دانشگاه امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

مجتبی سعادتی |
دانشکاه امام حسین ع
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

خسرو آقایی پور |
موسسه سرم و واکسن سازی رازی

نشانی اینترنتی http://biot.modares.ac.ir/article_3306_fc4655b090753f7f2e331b1649ca4632.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/899/article-899-501076.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات