این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۱، شماره ۱، صفحات ۵۴-۶۰
عنوان فارسی انتقال ژن به سلولهای کبدی رده LMH جوجه بوسیله لنتی ویروسهای نوترکیب
چکیده فارسی مقاله لنتی ویروسها از جمله موثرترین ویروسهای نوترکیب برای انتقال ژن به سلولها و بافتهای پستانداران بشمار میرود. در این مطالعه، عملکرد لنتی ویروسهای انسانی را در انتقال ژن خارجی به سلولهای طیور بررسی کردیم. سه ناقل لنتی ویروسی بنامهای ناقل انتقال (ناقل ترانسفر حامل ژن گزارشگر GFP)، ناقل بسته بندی و ناقل غشائی را همزمان به سلولهای مولد ویروس (رده HEK-293T) منتقل کردیم. سوپرناتان سلولهای ترانسفکت شده را پس از 24 و 48 ساعت جمع آوری نموده از فیلتر گذراندیم. سپس آن را به ستونهای پروتئینی Amicon حاوی فیلتر 100 کیلو دالتونی منتقل کرده و بخش اعظم سوپرناتان را با استفاده از سانتریفوژ از نمونه ها جدا کردیم. بدین ترتیب استوکی در حجم 500 µl از سوپرناتان غلیظ شده و مملو از ویریونها را بدست آوردیم. برای ترانسدوکشن سلولهای کبدی جوجه رده LMH رقتهای مختلفی از این استوک ویروسی تغلیظ شده را به محیط کشت این سلولهای در حال رشد اضافه کردیم. 48 ساعت بعد آلودگی سلولی و بیان ترانسژنهای گزارشگر را مشاهده کردیم که میزان بیان آنها 96 ساعت پس از آلودگی به 100% افزایش یافت. نتایج مزبور نشان میدهد که سلولهای با منشاء جوجه را نیز میتوان بوسیله لنتی ویروسهای با منشاء انسانی آلوده ساخت. همچنین با توجه به نیاز به تیتر بالای ویروس برای انتقال موفقیت آمیز ژنها، روش فیلتراسیون تیتر بالایی از ویروس را تولید میکند و از نظر کارایی قابل مقایسه با روشهای سنتی از جمله روش اولتراساتریفوژ بوده و از نظر هزینه، حجم کار و زمانبری بر آنها ارجحیت دارد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله لنتی ویروسها، سلولهای LMH، انتقال ژن، ترانسژن،
عنوان انگلیسی Recombinant lentivirus-mediated gene transfer into chicken cell line LMH
چکیده انگلیسی مقاله Lentiviruses are considered one of the most effective recombinant viruses for gene transfer to mammalian cells and tissues. In this study, the potential of HIV-1-based lentiviral vector to deliver transgenes into avian cells was examined. We co-transfected human embryonic kidney cell line HEK-293T with three lentivirus vectors called transfer, packaging and envelope vectors. We collected the supernatant from transfected cells 24 and 48 hours post-transfection and filtered them immediately. Then we subjected the filtered supernatant to Amicon protein columns for concentration purposes. Centrifugation removed a larger part of the supernatant presumably free of viruses and left behind a small volume of darken solution full of virions. We thereby produced a 500-µl-volume of virus stock. Various dilutions of this stock were added to chicken liver cell line LMH. The initial sign of infection appeared within 48 hours and by 96 hours post-infection 100% the LMH cells positively expressed transgenes. Our results indicated that the human HIV-1-based lentivirus vectors are capable of transducing and transferring foreign genes into chicken cells. Given the need for a high-titer virus stock for successful target cell transduction, our results indicate that the filtration method of virus concentration is able to produce high virus titer and is cost-effective and less time consuming than ultracentrifugation or other traditional methods.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Lentivirus, LMH cells, Gene transfer, transgene
نویسندگان مقاله عباس رحیمی |
دپارتمان ژنتیک مولکولی،پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری و دانشکده کشاورزی، زابل
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

موسی گردانه |
اتوبان تهران-کرج- بلوار پژوهش- پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مسعود علی پناه |
استادیار،دانشکده کشاورزی، دانشگاه زابل
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه زابل (Zabol university)

یاسین پناهی |
اتوبان تهران-کرج بلوار پژوهش- پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک
سازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

نشانی اینترنتی http://biot.modares.ac.ir/article_3303_234bf90d080311a2533bd979a7eb8d6f.pdf
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/899/article-899-501078.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات