این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
صفحه اصلی
درباره پایگاه
فهرست سامانه ها
الزامات سامانه ها
فهرست سازمانی
تماس با ما
JCR 2016
جستجوی مقالات
جمعه 28 آذر 1404
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان
، جلد ۲۲، شماره ۵، صفحات ۱۱۱-۱۲۰
عنوان فارسی
بیان پروکاریوتی پروتئین کایمر سه تایی۳M۲e-HA۲-NP حاصل از نواحی حفاظت شده پروتئینهای ویروس آنفلوانزای A/H۱N۱ در راستای دست یابی به واکسن زیر واحدی فراگیر
چکیده فارسی مقاله
زمینه و هدف: ویروس آنفلوانزا A یک پاتوژن تنفسی مهم است که باعث بیماری و مرگ و میر گسترده در طول اپیدمیهای فصلی و پاندمی ها میشود. واکسنهای رایج آنفلوانزا توانایی ایجاد ایمنی مؤثر در برابر سویههای مختلف ویروس آنفلوانزا را ندارند. طراحی واکسنهای فراگیر با استفاده از آنتیژنهای حفاظت شدهی ویروس آنفلوانزا در جهت رفع این محدودیت میباشد. ناحیه بیرونی پروتئین M2 آنفلوانزا (M2e)، ساقه هماگلوتینین (HA2) و نوکلئوپروتئین (NP) بخشهای بسیار حفاظت شده در میان زیرگونههای مختلف ویروس آنفلوانزا A هستند. هدف این مطالعه، افزودن بخشی از ژن NP به سازهی دوتایی 3M2e-HA2 و بیان کایمر سه تایی در سیستم پروکاریوتی بود. این پروتئین نوترکیب کاندید آنتیژنی نوید بخشی برای تولید واکسن فراگیر محسوب میشود. روش بررسی: ابتدا بخشی از ژن NP ویروس آنفلوانزای انسانی سویه A/H1N1(PR/8/34) با روش PCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده تکثیر شد. ژن تکثیر شده در وکتور کلونینگ pGEM-TEasy کلون شد. سپس ژن NP تایید شده در وکتور بیانی نوترکیب pET28a-3M2e-HA2 در پایین دست قطعهی HA2 کلون شد. پس از تایید کلونینگ، پروتئین کایمر در باکتری E.coli سویه BL21(DE3) بیان شد. یافتهها: نتایج Colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین ترادف نشان دادند که قطعه انتخابی ژن NP در وکتور نوترکیب pET28a-3M2e-HA2 به درستی جایسازی شده است. بیان پروتئین کایمرتوسط SDS-PAGE بررسی و با آزمایش وسترن بلات تایید شد. استنتاج: طراحی و تولید پروتئین نوترکیب 3M2e-HA2-NP میتواند گام مهمی درجهت تولید واکسن فراگیر به منظور مقابله با زیرگونههای مختلف ویروس آنفلوانزا باشد. واژه های کلیدی: واکسن آنفلوانزا، پروتئین کایمر، 3M2e، HA2، NP وصول مقاله:18/11/95 اصلاحیه نهایی:27/3/96 پذیرش:21/5/96
کلیدواژههای فارسی مقاله
واکسن آنفلوانزا، پروتئین کایمر، 3M2e، HA2، NP
عنوان انگلیسی
Prokaryotic expression of chimeric trimer protein (3M2e-HA2-NP) derived from conserved domains of influenza virus A/H1N1 as a promising universal subunit vaccine
چکیده انگلیسی مقاله
Background and Aim: Influenza A virus is an important respiratory pathogen which can cause high rates of morbidity and mortality during seasonal epidemics and pandemics. Current vaccines are not capable of producing effective immunity against different influenza virus subtypes. Designing universal vaccines using conversed domains of influenza virus antigens can overcome this limitation. The ectodomain of influenza M2 protein (M2e), the hemagglutinin stalk domain (HA2), and nucleoprotein (NP) are the most conserved sequences among subtypes of influenza A viruses. The aim of this study was to attach part of the NP gene into the binary structure of 3M2e-HA2 and assessment of expression of a chimer trimer protein in prokaryotic system. This recombinant protein is considered as a promising antigenic candidate for a universal vaccine production. Materials and Methods: First, part of the NP gene segment of human influenza A/H1N1(PR/8/34)was amplified by PCR using designed specific primers. This amplified gene was cloned into pGEM-TEasy cloning vector. Then, the confirmed segment of NP gene was subcloned into PET28a/3M2e-HA2 recombinant expression vector, downstream of the HA2 segment. After confirmation of cloning, the chimer protein was expressed in E.coli BL21(DE3). Results: The results of colony PCR, restriction enzyme digestion and sequencing indicated that the NP gene segment was correctly cloned into PET28a/3M2e-HA2. Chimer protein expression was analyzed by SDS-PAGE and confirmed by Western blotting. Conclusion: Design and production of recombinant protein (3M2e-HA2-NP) could be an important step towards the development of a universal influenza vaccine. Keywords: Influenza vaccine, Chimer protein, 3M2e, HA2, NP. Received: Feb 6, 2017 Accepted: Aug 12, 2017
کلیدواژههای انگلیسی مقاله
Influenza vaccine, Chimer protein, 3M2e, HA2, NP.
نویسندگان مقاله
شکوفه حاتمی | shokofeh hatami
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran.
بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
فاطمه فتوحی | fatemeh fotouhi
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran.
بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
مریم صالحی | maryam salehi
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran.
بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
الهه ناظری | elahe ghaderi
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran.
بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
حدیث شکوفی | hadis shokohi
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran.
بخش آنفلوانزا و سایر ویروسهای تنفسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
بهرخ فرهمند | behrokh farahmand
department of influenza and other respiratory virus, institute pasteur of iran, tehran, iran
بخش آنفلوانزا و سایر ویروس های تنفسی انستیتو پاستور ایران
سازمان اصلی تایید شده
: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)
نشانی اینترنتی
http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-182&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله
دریافت فایل مقاله
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده
fa
موضوعات مقاله منتشر شده
عمومی
نوع مقاله منتشر شده
پژوهشی
برگشت به:
صفحه اول پایگاه
|
نسخه مرتبط
|
نشریه مرتبط
|
فهرست نشریات