این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
صفحه اصلی
درباره پایگاه
فهرست سامانه ها
الزامات سامانه ها
فهرست سازمانی
تماس با ما
JCR 2016
جستجوی مقالات
چهارشنبه 26 آذر 1404
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستان
، جلد ۲۲، شماره ۶، صفحات ۴۹-۶۲
عنوان فارسی
ارزیابی ایمنی زائی پروتئین کایمر نوترکیب در بردارنده Intimin - EspA -Stx۲b علیه باکتری E.coli O۱۵۷ H۷
چکیده فارسی مقاله
زمینه و هدف: انتروهموراژیک اشرشیا کلی (EHEC) باعث طیف گسترده ای از عفونت ها مانند اسهال، کولیت هموراژی و سندرم همولیتیک اورمیک می شود. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیکی در عفونت E.coli O157: H7، واکسن ها روشی امید بخش برای پیشگیری از عفونت را ارائه می کنند. پروتئین های کایمر نوترکیب دربردارنده چندین ایمونوژن می توانند ایجاد ایمنی علیه عفونت های باکتریایی را القاء کنند. هدف از این مطالعه بررسی ایمنی زایی آنتی ژن کایمر سه ظرفیتی Intimin - EspA -Stx2b علیه باکتری E.coli O157 H7 بود. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی-آزمایشگاهی، پروتئین کایمر نوترکیب تحت تاثیرIPTG در E.coli BL21 DE3 بیان شد. بیان پروتئین توسط SDS-PAGE و وسترن بلات ارزیابی شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA تخلیص گردید. ایمنی زایی در موش ها با پروتئین خالص انجام و تیتر آنتی بادی توسط ELISA تعیین شد. بعد از ایمنی زایی، موشها با باکتری آلوده ، ریزش باکتری و مرگ و میر حیوان ها بررسی گردید. بررسی آماری با آزمون های دانکن و T-test با نرم افزار SPSS انجام شد. یافته ها: پروتئین در میزبان E.coli BL21 (DE3) بیان شد و آنالیز SDS-PAGE بیان پروتئین نوترکیب با وزن مولکولی kD 63 را نشان داد. پروتئین کایمر توسط وسترن بلات تایید شد. نتایج ELISA نشان داد که ایمنی زایی با پروتئین پاسخ هومورال به EspA، Intimin و Stx2bرا القاء کرد. ریزش باکتری در موش های ایمن تا cfu/ml 2 10 و مرگ و میر نیز تا 60 درصد کاهش یافت. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پروتئین کایمر پاسخ ایمنی هومورال را تحریک کرده و باعث حفاظت موش ها در برابر چالش با E. coli O157: H7 می شود. کلمات کلیدی: انتروهموراژیک اشرشیاکلی؛ اینتیمین؛ شیگا توکسین؛ پروتئین ترشحی اکلای؛ پروتئین کایمر؛ ایمنی زایی وصول مقاله:14/6/96 اصلاحیه نهایی:12/7/96 پذیرش:18/7/96
کلیدواژههای فارسی مقاله
عنوان انگلیسی
Immunogenic evaluation of recombinant chimeric protein containing EspA -Stx2b- Intimin against E.coli O157 H7
چکیده انگلیسی مقاله
Background and Aim: Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) cause a wide spectrum of infections, such as diarrhea, hemorrhagic colitis and hemolytic–uremic syndrome. Considering the risks associated with antibiotic therapy against EHEC infection, vaccines can be a promising method for prevention of infections. Recombinant chimeric proteins containing multiple immunogens could induce immunity against bacterial infections. The aim of this study was to evaluate immunogenecity of trivalent chimeric antigen EspA -Stx2b -Intimin against E.coli O157 H7 infection. Material and Methods: In this descriptive-laboratory study,recombinant chimeric protein was expressed in E.coli BL21 DE3 by use of IPTG. The protein expression was evaluated by SDS-PAGE and western blotting analysis. The recombinant protein was purified using Ni–NTA affinity chromatography. The immunization was conducted in mice with purified protein and antibody titers were determined by ELISA. Following immunization, mice were infected with E.coli O157:H7 and evaluated for bacterial shedding and mortality. Using SPSS software, statistical analysis was performed by Duncan's test and T-test. Results: The protein was expressed in E.coli BL21 (DE3) and SDS-PAGE analysis showed expression of recombinant protein with molecular weight of 63kD. Western blot analysis confirmed presence of chimeric protein. ELISA results showed that immunogenic properties of chimeric protein induced humoral response to EspA, intimin and Stx2b. Bacterial shedding in immunized mice decreased to 102 cfu/ml and mortality rate was reduced to 60%. Conclusion: The results showed that the chimeric protein induced humoral response and protected the mice against E.coli O157:H7. Keywords: Enterohemorrhagic Escherichia coli; Intimin; Shiga toxin; E.coli secreted protein A, Chimeric protein, Immunogenicity. Received: Sep 5, 2017 Accepted: Oct 10, 2017
کلیدواژههای انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله
مجتبی طاهری | mojtaba taheri
biology research center, faculty of science, imam hussein university, tehran, iran
دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران.
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
شهرام نظریان | shahram nazarian
biology research center, faculty of science, imam hussein university, tehran, iran
مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
فیروز ابراهیمی | firooz ebrahimi
biology research center, faculty of science, imam hussein university, tehran, iran
مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
مصطفی بخشی | mostafa bakhshi
biology research center, faculty of science, imam hussein university, tehran, iran
دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
جواد فتحی | javad fathi
biology research center, faculty of science, imam hussein university, tehran, iran
دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده
: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)
نشانی اینترنتی
http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-189&slc_lang=fa&sid=en
فایل مقاله
اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/33/article-33-568155.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده
fa
موضوعات مقاله منتشر شده
عمومی
نوع مقاله منتشر شده
پژوهشی
برگشت به:
صفحه اول پایگاه
|
نسخه مرتبط
|
نشریه مرتبط
|
فهرست نشریات