این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
Physiology and Pharmacology، جلد ۱۸، شماره ۳، صفحات ۲۹۲-۳۰۳
عنوان فارسی سیتوپلاسم اسیدی سبب کاهش فعالیت کانال پتاسیم استخراج شده از شبکه آندوپلاسمی هپاتوسیت های رت می گردد
چکیده فارسی مقاله چکیده: مقدمه- اساساً pH داخل سلولی (pHi) تمام فعالیت های سلول را تنظیم می کند. اما مشخص نیست که کانال پتاسیم شبکه آندوپلاسمی(ER) چگونه به pHi پاسخ می دهد. در این مطالعه، اثر مستقیم pHi بر کانال پتاسیم ER مورد بررسی قرار گرفت. روش ها- در این مطالعه از روش الحاق کانال به داخل غشاء دو لایه لیپیدی استفاده گردید. فسفاتیدیل کولین ( بعنوان لیپید غشایی) از زرده تخم مرغ تازه استخراج گردید. غشاء دو لایه لیپیدی بر روی منفذ μm 150 تشکیل گردید. وزیکول های شبکه آندوپلاسمی کبد پس از هموژنیزه کردن و چند مرحله سانتریفوژ بدست آمد. تمام ثبت ها با فرکانس kHz 1 فیلتر شد و با سرعت kHz 10 نمونه برداری و ذخیره گردید تا بصورت آفلاین توسط نرم افزار PClamp10 آنالیز شود. از وسترن بلات و با استفاده از مارکرهای اختصاصی غشاء پلاسمایی، میتوکندری، دستگاه گلژی و شبکه آندوپلاسمی برای تایید خلوص نمونه استخراج شده استفاده گردید. pH محیط سیس و ترانس توسط pH متر (دقت 001/0 واحد) اندازه گیری شد. آنالیز آماری بر اساس آنالیز تک کانال عاری از نویز Markov انجام گردید. یافته ها- آنتی بادی های مختلف استفاده شده بر علیه نمونه استخراج شده بروش وسترن بلات نشان داد که نمونه های ER خالص بوده و حاوی پروتئین از دیگر ارگانل های سلول نیست. ثبت از کانال حضور یک کانال پتاسیم با کنداکتانس pS596 را نشان داد که توسط mM 5/2 ATP ، گلی بن کلامید µM 100 و تولبوتامید µM 400 مهار گردید. افزایش pHi به 2/8 اثری بر فعالیت کانال نداشت. کاهش pHi به 7/6 باعث کاهش فعالیت کانال و مهار کامل فعالیت کانال در pHi 2/6 بدست آمد. نتیجه گیری- نتایج ما نشان می دهد که اسیدی شدن داخل سلول فعالیت کانال پتاسیم ER را مهار می کند. احتمالاً تنظیم مستقیم فعالیت کانال پتاسیم ER توسط pHiاهمیت زیادی جهت درک ما در فرایند هومئوستاز ER دارد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Cytoplasmic acidification reduces potassium channel activities in the endoplasmic reticulum of rat hepatocytes
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: Intracellular pH (pHi) regulates essentially all aspects of cellular activities. However, it is unknown how endoplasmic reticulum (ER) potassium channels sense pHi. In this study, we investigate the direct effects of pHi on ER potassium channels. Methods: We used channel incorporation into the bilayer lipid membrane method. L-α-phosphatidylcholine, a membrane lipid, was extracted from fresh egg yolk. Bilayer lipid membrane was formed in a 150 μm diameter hole. Rough endoplasmic reticulum vesicles were obtained from the liver after homogenization and several centrifugations. All single channel recordings were filtered at 1 kHz and stored at a sampling rate of 10 kHz for offline analysis by PClamp10. The purity of cell fractions was confirmed by western blot using specific markers of mitochondria, plasma membrane, endoplasmic reticulum, and Golgi. The pH was measured with a pH meter (0.001 unit accuracy). Statistical analysis was performed based on Markov noise free single channel analysis. Results: Western blotting and antibodies directed against various cellular proteins revealed that ER fractions did not contain specific proteins of the other subcellular compartments. Single channel recordings revealed a 596 pS K+ channel, which was inhibited by 2.5 mM ATP, 100 μM glibenclamide and 400 μM tolbutamide. No effect of increasing pHi to 8.2 was found but decreasing pHi to below about 6.7 produced a marked inhibition of channel activity, with complete block being observed at pHi 6.2. Conclusion: Our results indicate that intracellular acidification inhibits ER K+ channel activities. The direct regulation of ER K+ channels by pHi has important implications for ER homeostasis.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله ناصر خدایی | naser khodaee
dept. of physiology, medical school, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)

مایده قاسمی | maedeh ghasemi
dept. of physiology, medical school, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)

جواد فحانیک بابایی | fahanik babaei javad
dept. of physiology, medical school, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی (Shahid beheshti university of medical sciences)

رضا صغیری | reza saghiri
dept. of biochemistry, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

افسانه الیاسی | afsaneh eliasi
dept. of biochemistry, pasteur institute of iran, tehran, iran

سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://www.phypha.ir/ppj/browse.php?a_code=A-10-769-1&slc_lang=en&sid=en
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده Cellular and Molecular BioMedicine
نوع مقاله منتشر شده Original Research
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات