این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۱۰۷-۱۱۷
عنوان فارسی بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S۱۰۰ A۸ , S۱۰۰ A۹ کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: کالپروتکتین، S100 A8 و S100 A9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S100 A8 و S100 A9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید. روش کار: در این مطالعه تجربی از pET15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S100 A8, S100 A9 انسانی و از ( E.coli BL21 (DE3 به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از طریق SDS-PAGE مورد ارزیابی قرارگرفت. خالص سازی پروتئینها با استفاده از رزین Ni-NTA و بر اساس میل ترکیبی آن به His-Tag پروتئین های نوترکیب انجام گرفت. ساختار سوم پروتئین ها با طیف سنج فلورسانس بررسی شد. یافته ها: زیر واحدهای مذکور 4-3 ساعت بعد از القاء و دمای 37 درجه سانتی گراد بیان بالایی را نشان دادند. درصد بالایی از پروتئین S100A9 در فاز اینکلوژن بادی نشان داده شد، در حالیکه زیر واحد S100A8 عمدتا بصورت محلول بیان گردید. S100A8 و S100A9 در غلظت mM 100 ایمیدازول خالص سازی گردید. در بررسی طیف سنجی نشان داده شد که اسید آمینه تریپتوفان در ساختار های داخلی قرار گرفته و کمتر در معرض محیط آبی است. نتیجه گیری: در این مطالعه زیر واحدهای S100A8 و S100A9 بصورت نوترکیب بیان شده و تخلیص گردید. همچنین، ساختار آنها مورد تایید قرار گرفت.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Evaluating Gene Expression, Purification and Structural Characterization of the Calprotectin Subunits of S100 A8and S100 A9
چکیده انگلیسی مقاله Background & objectives: Calprotectin, S100A8 and S100A9 are involved in important processes including cell signaling and regulation of inflammatory responses. In this study, recombinant expression, purification and structural characterization of S100A8 and S100A9 were accomplished. Methods : In this experimental study, pET15b was used as vector of human S100A8 and S100A9 coding sequences, hosted by E.coli BL21 (DE3). Gene expression and purification attempts were evaluated using SDS-PAGE. Protein purification was accomplished using Ni-NTA resin based on its affinity for His-tag present on recombinant proteins. Tertiary structure of proteins were evaluated using spectrofluorimetry. Results : The subunits were over expressed 3-4 hours following induction at 37 °C. S100A9 was expressed mainly as inclusion body while S100A8 was found to be expressed mainly as a soluble protein. Purification of S100A8 and S100A9 was achieved at 100 mM imidazole. Spectroscopic studies showed that the amino acid tryptophan is in the internal structures and is less exposed to the aqueous environment. Conclusion : In this study, a recombinant S100A8 and S100A9 subunits were expressed and purified and also their structures were confirmed.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله حمیده اصغری | hamideh asghari


نعمت الله غیبی | nematollah gheibi


کوروش گودرزوند چگینی | kourosh goodarzvand chegini


مهدی سهمانی | mahdi sahmani


داریوش ایلغاری | darioush ilghari


نشانی اینترنتی http://jarums.arums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-27-584&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده تخصصی
نوع مقاله منتشر شده مقاله اصیل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات