این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۱، شماره بهار و تابستان ۸۷-، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی به‌کارگیری روش PCR-ELISA با استفاده از ترادف RE در تشخیص کمی توکسوپلاسموز تجربی در مدل موشی (Rattus norvegicus)
چکیده فارسی مقاله هدف: توکسوپلاسما ممکن است ایجاد آسیب در جنین و از انگل‌های فرصت‌طلب در بیماران با ایمنی سرکوب شده است. استفاده از روش‌های مولکولی برای تشخیص بیماری حساس‌تر از روش‌های سرولوژیک است. استفاده از روش PCR-ELISA حساسیت و ویژگی بالا، زمان تشخیص توکسوپلاسموزیس نیز سریع‌تر است. در این پژوهش از روش PCR-ELISA با استفاده از قطعه DNA RE، برای تشخیص توکسوپلاسموزیس به‌کار رفت. از مزایای این روش حساسیت و اختصاصی بودن و در نهایت تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه از روش کمی PCR-ELISA برای تشخیص توکسوپلاسموزیس در 15 سر رت استفاده شد. بدین منظور PCR-ELISA برای تشخیص سریع توکسوپلاسموزیس راه‌اندازی شد. در این روش آغازگرهای اولیگونوکلئوتیدی برای هدف‌گیری ژن RE مربوط به تاکی‌زوئیت به‌طول 138 جفت‌باز انتخاب شده و برای تکثیر DNA توکسوپلاسما گونده‌ای، از فرایند PCR و نشاندار کردن همزمان محصول به‌دست آمده از آن با دیگوکسی‌ژنین استفاده شد. قطعه نشاندار شده با DIG، با پروب اولیگونوکلئوتید بیوتینیله شده اختصاصی دورگه می‌شود و سپس به استرپتاودین پوشش‌دار شده در پلیت اضافه می‌شود. دورگه DNA-DNA ایجاد شده با اضافه کردن آنتی‌بادی ضد دیگوکسی‌ژنین کونژوگه شده با پراکسیداز و با روش کلریمتری قابل شناسایی است. نتایج: با استفاده از سیستم PCR-ELISA، ژن RE توکسوپلاسما گونده‌ای در مدت 4 ساعت و با حساسیت بالا مورد شناسایی قرار گرفت. در ضمن آزمایش‌هایی برای بررسی حساسیت روش به‌کار برده شده، انجام گرفت و منحنی استاندارد مربوط به حساسیت روش نیز رسم شد. DNA توکسوپلاسما پس از 4 ساعت قابل شناسایی است و در این روش عوامل دیگر دخالت ندارند؛ بنابراین فقط این انگل تکثیر و شناسایی می‌شود. نتیجه‌گیری: کارایی PCR-ELISA ارزیابی شد و ارزیابی‌ها نشان داد که از مزیت‌های این روش سریع، حساس، مطمئن و ساده بودن آن است؛ بنابراین می‌توان از آن به‌عنوان یک روش تشخیصی استفاده کرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله رت،توکسوپلاسموزیس،ژن RE
عنوان انگلیسی Application of PCR-ELISA method based on RE domain for diagnosis of toxoplasmosis in experimentally infected rat (Rattus norvegicus)
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Toxoplasmosis may cause significant damage to the developing fetus and is a life-threatening opportunistic infection in immunocompromised persons. Molecular methods are known to be more sensitive and more specific than serological assays for diagnosis of toxoplasmosis. Application of quantitative PCR has evolved sensitive, specific, and rapid method for the detection of RH strain of Toxoplasma gondii DNA. Materials and Methods: In the present study, quantitative PCR-ELISA (Polymerase Chain Reaction-enzyme linked immunosorbent assay) was used for quantization of Toxoplasma gondii in the blood of 15 rats (Rattus norvegicus) infected experimentally with the parasite. In this regard Polymerase PCR-ELISA was developed for rapid detection of Toxoplasma gondii. Specific primers targeting RE gene were selected and used for the amplification of toxoplasmic DNA. DIG-labeled (digoxigenin-labeled) amplicons were hybridized with a specific biotinylated oligonucleotide probe in solution phase and subsequently transferred to streptavidin coated plates. The captured DNA-DNA hybrids were colorimetrically detected by the addition of anti-digoxigenin antibody peroxidase conjugate and substrate. Results: DNA of Toxoplasma gondii were efficiently detected within 4 hours and no interference was encountered in the amplification and detection of the parasite. Conclusion: Efficiency of the PCR-ELISA system was evaluated we found with several advantages in terms of sensitivity, rapidity and simplicity in this system.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله PCR-ELISA
نویسندگان مقاله رقیه نوروزی | Roghaye Norouzi
M.Sc. Student, Department of Medical Parasitology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

عبدالحسین دلیمی اصل | Abdolhossein Dalimi
Professor, Department of Medical Parasitology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
استاد، گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

مهدی فروزنده | Mehdi Forouzandeh
Associated Professor, Department of Medial Biotechnology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشیار، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

فاطمه غفاری فر | Fatemeh Ghaffarifar
Associated Professor, Department of Medical Parasitology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشیار، گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://journals.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-1000-8858&slc_lang=fa&sid=30
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/159/article-159-590231.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات