این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۱، شماره بهار و تابستان ۸۷-، صفحات ۰-۰
عنوان فارسی طراحی و به‌کارگیری روش RT-PCR ELISA Multiplex برای تشخیص عفونت همزمان HCV و HIV-۱
چکیده فارسی مقاله هدف: علیرغم غربالگری خون‌های اهدایی با روش‌های حساس مبتنی بر شناسایی آنتی‌بادی، همچنان خطر انتقال عفونت‌های ویروسی وجود دارد. بنابراین طراحی روش‌های حساس مبتنی بر شناسایی اسید نوکلئیک مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این تحقیق طراحی روشی حساس‌تر در مرحله شناسایی نسبت به روش‌های معمول و همچنین تشخیص همزمان عفونت‌های ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت C در یک نمونه است. مواد و روش‌ها: پس از طراحی آغازگرها و پروب‌های اختصاصی دو ویروس و بهینه‌سازی روش واکنش زنجیره‌ای چندگانه، مرحله نشاندار کردن محصول با استفاده ازنوکلئوتیدهای متصل به دیگوگسی‌ژنین انجام شد. محصول به‌دست آمده ابتدا به دو قسمت مجزا تقسیم و پس از واسرشت شدن در شرایط قلیایی با پروب اختصاصی مجاور شد. پروب‌های حاوی بیوتین انتهایی پس از اضافه شدن به پلیت پوشش یافته با استرپت آویدین متصل شدند. پس از شستشو، آنتی‌بادی ضد دیگوگسی‌ژنین متصل به آنزیم آلکالن فسفاتاز به چاهک‌ها اضافه شد. در مرحله نهایی شستشو انجام و سوبسترا اضافه شد. با استفاده از روش رنگ‌سنجی نمونه‌های مثبت و منفی از نظر عفونت قابل شناسایی هستند. نتایج: 35 نمونه با روش طراحی شده مورد آزمایش قرار گرفتند، که شامل 27 نمونه مثبت و 8 نمونه منفی تأیید شده و 4 نمونه پانل استاندارد بودند. هیچ‌گونه نتیجه مثبت یا منفی کاذب مشاهده نشد. نتیجه‌گیری: روش طراحی شده دارای حساسیت و اختصاصیت قابل قبولی برای تشخیص عفونت ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک و ویروس هپاتیت C در دوره پنجره می‌باشد به‌علاوه امکان کمی کردن روش وجود دارد، که در کنترل بیمار و پایش درمان مفید است. همچنین در کنار حساسیت بسیار بالا هزینه و زمان کمتری برای انجام آزمون نیاز است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی A novel sensitive multiplex RT-PCR ELISA method for detection of HIV-1/HCV co-infection
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Despite sensitive antibody based blood donor screening, infection can be transmitted during window period. Therefore sensetive methods bosed on nucleic acid tests (NATs) have been considered. The aim of this project was to design a more sensitive method for detection of PCR products and diagnosis of HIV-1/HCV co-infection accurately. Materials and Methods: After designing specific primers and probes, the Multiplex RT-PCR method was optimized and the PCR products were labeled with Digoxigenin. The PCR product was denatured under alkaline condition and was hybridized with the specific probe that had a biotin at 5' end, and then was added to streptavidin coated wells. After washing an antibody against DIG, conjugated with alkaline phosphates enzyme was used, following second washing, the substrate (ABTS) solution was added to each reaction well. Development of green color shows the positive where as no color shows negative results. Results: 35 samples were tested with the developed method including 27 positive samples, 8 confirmed negative and 4 standard panels. False negative or positive reactions were not observed. Conclusion: This method had acceptable sensitivity and specificity for detecting HCV and HIV-1 infections during window period, also the method can be quantified which can be used for the flow-up and treatment of patients. In addition to the very high sensetivity of the test, it is cost effective and takes less time to performe.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله HIV I,HCV,Co-infection,Multiplex RT-PCR ELISA
نویسندگان مقاله زهرا خانلری | Zahra Khanlari
M.Sc. Student, Department of Virology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

مهرداد روانشاد | Mehrdad Ravanshad
Assistant Professor, Department of Virology, School of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
استادیار، گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

منوچهر رسولی | Manouchehr Rasouli
Assistant Professor, Department of Immunology, Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran
استادیار، گروه ایمنی شناسی، مرکز تحقیقات میکروب شناسی بالینی استاد البرزی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران

مازیار ضیائیان | Mazyar Ziyaeyan
Assistant Professor, Department of Virology, Professor Alborzi Clinical Microbiology Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran
استادیار، گروه ویروس شناسی، مرکز تحقیقات میکروب شناسی استاد البرزی، دانشکده علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران

نشانی اینترنتی http://journals.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-1000-513&slc_lang=fa&sid=30
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/159/article-159-590234.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات