این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۰، شماره پاییز و زمستان۸۶-، صفحات ۸۵-۹۳
عنوان فارسی مهار بیان ژن نوکلئوستمین در رده سلولی سرطانی مثانه با واسطه استراتژی RNAi
چکیده فارسی مقاله هدف: نوکلئوستمین جزء خانواده‌ای از پروتئین‌های هستکی است که به میزان زیادی در سلول‌های بنیادین جنینی، عصبی و مزانشیمی بیان می‌شود و در تنظیم خودبازسازی این سلول‌ها نقش دارد. بیش‌بیان این ژن در رده‌های سلولی سرطانی متعدد و نیز بافت‌های توموری چون تومورهای معده، کبد و پروستات نشان داده شده است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی آثار سرکوب بیان این ژن در رده سلولی سرطانی مثانه با روش RNAi است. مواد و روش‌ها: پس از تأیید بیان ژن نوکلئوستمین در رده سلولی سرطانی 5637، الیگونوکلئوتیدهای 21 تایی بر علیه آن به داخل سلول ترانسفکت شده و سرکوب بیان ژن با روش RT-PCR، ایمونوسیتوشیمی و وسترن بلات تأیید شد. آنالیز رشد سلولی با شمارش سلول‌ها انجام گرفت. تغییرات در چرخه سلولی و رخداد مرگ برنامه‌ریزی شده سلول به ترتیب با رنگ‌آمیزی سلول‌ها با رنگ پروپیودیم آیودید وآنکسین V-FITC مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: ژن نوکلئوستمین به میزان بالایی در سلول‌های 5637 بیان می‌شود. بررسی بیان ژن نوکلئوستمین با روش نیمه‌کمی و پس از تیمار با الیگونوکلئوتیدهای اختصاصی بر علیه این ژن، کاهشی در حدود 85 درصد را در مقایسه با گروه‌های کنترل نشان داد. علاوه بر این، نتایج ایمونوسیتوشیمی و وسترن بلات نیز تأییدکننده سرکوب بیان ژن در حد پروتئین بود. بررسی منحنی رشد سلول‌ها نشان داد که با گذشت 72 ساعت، کاهش قابل ملاحظه‌ای در تعداد سلول‌های گروه تیمار شده با الیگونوکلئوتیدهای نوکلئوستمین قابل مشاهده است. بررسی چرخه سلولی نیز بیانگر رخداد مرگ برنامه‌ریزی شده سلول پس از مهار نوکلئوستمین بود که رنگ‌آمیزی اختصاصی با آنکسین V-FITC نیز این یافته را تأیید نمود. نتیجه‌گیری: بیان ژن نوکلئوستمین نقش مهمی در تکثیر سلولی و جلوگیری از مرگ برنامه‌ریزی شده سلول در سلول‌های رده سرطانی 5637 ایفا می‌کند. مطالعات بیشتر در زمینه سرکوب بیان این ژن در محیط بدن می‌تواند در آینده راهگشای یافتن هدف‌های درمانی بالقوه برای سرطان مثانه شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله نوکلئوستمین،رده سلولی سرطان مثانه 5637
عنوان انگلیسی Knocking down of nucleostemin gene expression in human bladder cancer cell line by RNA interference strategy
چکیده انگلیسی مقاله Objective: Nucleostemin (NS) is a recently identified gene that is expressed mainly in the nucleoli of neuronal, embryonic and mesenchymal stem cells which plays a role in their self renewal. Over expression of this gene has been reported in several cancer cell lines tumoral tissues including gastric, hepatic and prostate cancer. In this study, we investigated the effects of suppression of this gene by RNAi technique in a human bladder cancer cell line. Materials and Methods: After confirmation of expression of nucleostemin in the bladder cancer cell line 5637, 21-mer oligoes against NS were transfected into cells and suppression of NS was confirmed by RT-PCR, immunocytochemistry (ICC) and western blotting. Proliferation assays were done by counting the cell numbers. Changes in cell cycle and apoptosis induction were assessed by staining cells with Propidium Iodide and Annexin V-FITC respectively. Results: Our results revealed that nucleostemin is highly expressed in 5637 carcinoma cells. Expression of NS, by semi-quantitative RT-PCR, after treatment with specific oligoes against it, decreased around 85% in comparison to control groups. In addition, ICC and western blotting further confirmed the suppression of nucleostemin at the protein levels. Analysis of cell proliferation assays showed a considerable decline in the number of cells, specially, 72 h after treatment of cells with oligoes against NS. Cell cycle analysis after NS suppression showed increase of sub-diploid events, characteristic of apoptotic cells that were confirmed by staining cells with Annexin V-FITC dye. Conclusion: It seems that nucleostemin expression plays an important role in the induction of cell proliferation as well as inhibition of apoptosis occurrence in 5637 cells. Further studies focusing on suppression of this gene in vivo, may help to find potential therapeutic strategies to cure bladder cancer.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله RNAi,RNAi,Nucleostemin,Bladder cancer cell line 5637
نویسندگان مقاله پروانه نیک‌پور | Parvaneh Nikpour
Department of Genetics, School of Basic Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

سیدمهدی جعفرنژاد | Seyed Mehdi Jafarnejad
Department of Genetics, Medical Nanotechnology & Tissue Engineering Research Center of Taleghani Hospital, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran
گروه ژنتیک، مرکز تحقیقات نانوتکنولوژی پزشکی و مهندسی بافت بیمارستان طالقانی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران

مهدی فروزنده | Mahdi Forouzandeh
Department of Medical Biotechnology, School of Medical Science, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

سیدجواد مولی | Seyed Javad Mowla
Department of Genetics, School of Basic Science, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://journals.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-1000-910&slc_lang=fa&sid=30
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/159/article-159-590278.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات