این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۵، شماره ۱۲۵، صفحات ۱۰-۲۰
عنوان فارسی تولید آزمایشگاهی فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب و ارزیابی عملکرد آن در بقای سلولی
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: فاکتور رشد اپیدرم انسانی (hEGF)، پلی پپتیدی دارای 53 اسید آمینه است که کاربردهای وسیعی در پزشکی و به ویژه ترمیم زخم دارد. هدف از این پژوهش، همسانه سازی، بیان و تخلیص hEGF نوترکیب و بررسی اثر میتوژنیک آن بر دودمان سلولی NIH3T3 بود. مواد و روش‌ها: زیرهمسانه‌سازی ژن hEGF، درون وکتور pET24a صورت گرفت. بیان پروتئین تحت شرایط استاندارد صورت گرفت. از آن جایی که بیان پروتئین به صورت کنجاله‌های نامحلول بود، محلول‌سازی ملایم با استفاده از بافری با pH قلیایی صورت گرفت. در نهایت و پس از ایجاد تاخوردگی مجدد، اثر میتوژنیک این پروتئین در غلظت‌های مختلف بر دودمان سلول NIH3T3مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: محلول‌سازی ملایم کنجاله‌های نامحلول با بافر قلیایی و پس از آن انجام تاخوردگی مجدد دارای بازده بسیار بالایی بود. نتایج آزمون MTT، نشان داد که سلول‌های تیمار شده با فاکتور رشد اپیدرمی بیان شده در این تحقیق، پس از گذشت 72 ساعت، به طور معنی‌داری درصد بقاء بیش‌تری نسبت به کنترل (0001/0< P). نشان دادند. استنتاج: به نظر می‌رسد که سیستم بیان سیتوپلاسمی به کار برده شده در این تحقیق، برای تولید فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب زیست فعال کارامد باشد. روش ارائه شده در این تحقیق، روشی آسان، در دسترس، مقرون به صرفه و با بازده بالا برای محلول‌سازی کنجاله‌های نامحلول و به دست آوردن شکل زیست فعال فاکتور رشد اپیدرم انسانی می‌باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Production of Recombinant Human Epidermal Growth Factor and Assessment of its Activity in Cell Viability
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Human epidermal growth factor (hEGF) is a polypeptide of 53 amino acids with various medical application such as wound healing. The purpose of this study was cloning, expression, and purification of recombinant human EGF (rhEGF) and assessment of its mitogenic effect on NIH 3T3 cells. Materials and methods: Subcloninig of hEGF was performed in to pET24a (+). Protein expression was done under standard conditions. According to the protein expression as inclusion body, mild solubilization using alkaline pH buffer was utilized for protein solubilization. Ultimately, after refolding of solubilized proteins, MTT assay was performed to assess the mitogenic effect of rhEGF in NIH 3T3 cells treated with various concentrations of rhEGF. Results: Mild solubilization of inclusion bodies with alkaline buffer and subsequent refolding had a very high efficiency. MTT assay showed that cells treated with our rhEGF exhibited significantly higher proliferation compared to control after 72 h (P < 0.0001). Conclusion: It seems cytoplasmic expression system is an efficient system for production of recombinant hEGF. The method presented in this study is a simple, accessible, affordable and of high efficiency for solubilization of inclusion bodies which is also helpful in achieving bioactive form of human epidermal growth factor.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سارا پورانوری | sara pouranvari
ph.d in molecular genetics, department of biology, islamic azad university, science and research branch, tehran, iran
phd رشته ژنتیک مولکولی، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

فیروز ابراهیمی | firouz ebrahimi
assistant professor, faculty of basic sciences, biology research center, imam hussein university, tehran, iran
تهران اتوبان شهید بابایی، دانشگاه امام حسین ع ، گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی تهران اتوبان شهید بابایی، دانشگاه امام حسین ع ، گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

غلامرضا جوادی | gholamreza javadi
associate professor, department of biology, islamic azad university, science and research branch, tehran, iran
دانشیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (Islamic azad university science and research branch)

بزرگمهر مداح | bozorgmehr maddah
associate professor, department of chemistry, faculty of basic sciences, imam hussein university, tehran, iran
. دانشیار، گروه شیمی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5029-15&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ژنتیک
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات