این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۴، شماره ۱۲۰، صفحات ۴۳-۵۳
عنوان فارسی انتخاب اختصاصی فاژهای حاوی قطعه آنتی‌بادی به کمک پروتئین A در تکنیک کتابخانه آنتی‌بادی فاژ
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: تکنیک کتابخانه آنتی‌بادی فاژ یکی از قدرتمندترین روش‌های ساخت قطعات آنتی‌بادی در محیط آزمایشگاه است. با این حال یکی از مشکلات تکنیکی در مسیر انتخاب آنتی‌بادی‌های اختصاصی و عملکردی وجود فاژهای فاقد قطعه آنتی‌بادی در کتابخانه آنتی‌بادی فاژ است. هدف از این مطالعه استفاده از قابلیت اتصال کلون‌های موجود در کتابخانه آنتی‌بادی فاژ به پروتئین A برای خالص‌سازی فیزیکی فاژهای حاوی قطعه آنتی‌بادی از فاژهای فاقد قطعه آنتی‌بادی است. مواد و روش‌ها: کتابخانه آنتی‌بادی فاژ Tomlinson طبق پروتکل مربوطه تکثیر شد. انتخاب آنتی‌بادی علیه گیرنده HER2 در سطح سلول VERO انجام شد. سه چرخه panning در دو گروه صورت گرفت به صورتی که در یک گروه قبل از هر چرخه panning فاژهای تولید شده به‌وسیله پروتئین A متصل به آگاروز خالص‌سازی شدند، در حالی که در گروه کنترل مرحله خالص‌سازی با پروتئین A صورت نگرفت. آنتی‌بادی‌های به دست آمده در انتهای هر چرخه در دو گروه مورد مطالعه به‌وسیله PCR و phage-ELISA مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج آزمون PCR نشان‌دهنده افزایش قابل‌ملاحظه تعداد فاژهای حاوی قطعه آنتی‌بادی پس از خالص‌سازی توسط پروتئین A در انتهای چرخه سوم panning (87 درصد) نسبت به گروه کنترل (41 درصد) است. بعلاوه نتایج آزمون الیزا نیز تأیید انتخاب و تکثیر اختصاصی آنتی‌بادی در گروه فاژ خالص شده با پروتئین A است. استنتاج: این مطالعه اهمیت خالص‌سازی فاژهای حاوی قطعه آنتی‌بادی را برای تولید و انتخاب آنتی‌بادی‌های اختصاصی را در تکنیک کتابخانه آنتی‌بادی فاژ نشان می‌دهد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Protein A-Specific Enrichment of Insert-containing Phage in Antibody Phage Display Library
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Antibody phage display library is a powerful in vitro technology for production of recombinant antibody fragments against a wide variety of antigens. However, the presence of insert-free clones in the phage libraries limited the specific enrichment of antibody fragments in many studies. The aim of this study was to protein A-aided recovery of insert-containing phages in antibody phage display library. Materials and Methods: Tomlinson antibody library was prepared according to the standard protocol. Three rounds of panning were performed in two independent groups on VERO/HER2 cells, considering a step of protein A-aided phage precipitation at the end of each round only in one group. The efficiency of this method was evaluated on the selected clones using PCR and phage-Elisa. Results: The results of PCR showed that 87% of clones contained insert after three rounds of panning using protein A-recovered phages while in the control group only 41% of clones contained insert. Also, the results of phage-ELISA showed specific enrichment of anti-HER2 antibodies in protein A-treated group. Conclusion: This method provided a simple and effective way for selective enrichment of antibody fragments in the phage display antibody libraries.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله رضا ولدان | reza valadan
institute of biotechnology, ferdowsi university of mashhad, mashhad
پژوهشکده زیست فن آوری، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

علیرضا رفیعی | alireza rafiei
molecular and cell biology research center, faculty of medicine, mazandaran university of medical sciences, sari
مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی مازندران (Mazandaran university of medical sciences)

غلامرضا هاشمی تبار | gholamreza hashemitabr
department of pathobiology, faculty of veterinary medicine, ferdowsi university of mashhad, mashhad
گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

محمدرضا باسامی | mohammad reza bassami
department of clinical sciences, faculty of veterinary medicine, ferdowsi university of mashhad, mashhad
گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه فردوسی (Ferdowsi university)

نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4374-5&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ایمونولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات