این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۴، شماره ۱۱۹، صفحات ۷۲-۸۲
عنوان فارسی طراحی و ساخت کلون بیان کننده داروی ضد انعقادی دسیرودین (هیرودین) به شکل خارج سلولی در اشرشیا کلی
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: هیرودین پلی پپتیدی با 65 تا 66 اسید آمینه است که به عنوان داروی ضدانعقادی، از غدد بزاقی زالو ترشح می‌شود. این دارو، مهارکننده بسیار قوی ترومبین می‌باشد بنابراین می‌تواند رقیبی برای هپارین نیز باشد. هدف از این مطالعه، الحاق توالی سیگنال پپتید pelB (توالی سیگنال پپتید pelB روی سکانس پلاسمید pET-22b تعبیه شده است) و بررسی بیان پروتئین نوترکیب هیرودین در اشرشیاکلی می‌باشد. مواد و روش‌ها: ترادف 66 آمینواسیدی واریانت HV3 ژن هیرودین تهیه و به داخل یک وکتور بیانی قوی (pET-22b) انتقال داده شد. برای تسهیل در تخلیص پروتئین از His-tag در ناحیه N-ترمینال ژن استفاده گردید. سیگنال پپتید pelB در ابتدای ژن با هدف ترشح به فضای پری پلاسمیک و محیط کشت درج شد و ساختار پلاسمیدی حاصله توسط سویه OrigamiB (DE3) باکتری E.coli بیان شد. در نهایت میزان بیان پروتئین تولیدی در ناحیه سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت مقایسه گردید. یافته‌ها: نتایج به‌دست آمده نشان می‌دهد که مقدار پروتئین بیشتری در فضای پری پلاسمیک بیان شده و مقدار کمی پروتئین نیز به محیط کشت ترشح گردیده است. استنتاج: با به کارگرفتن وکتورهایی که قادر به انتقال پروتئین هدف به فضای پری پلاسمیک، که محیطی بسیار مطلوب برای شکل‌گیری باندهای دی سولفید و فلدینگ صحیح پروتئین هدف هستند، احتمال تشکیل اینکلوژن بادی‌ها کاهش یافته و تولید پروتئین‌های محلول و فعال افزایش می‌یابد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Designing and Constructing Clone for Extracellular Expression of the Desirudin Anticoagulant Drug in E.coli
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Hirudin is a 65-66 amino acids polypeptide which is secreted as an anticoagulant compound from salivary glands of medical leech. This drug is a very potent inhibitor of thrombin and is so effective for arterial and venous thrombosis prevention. Therefore, it can compete with heparin. The aim of this study was to add a pelB signal peptide to pET-22b plasmid and to investigate the expression of recombinant hirudin in E.coli. Materials and methods: At first, the 66 nucleotic sequence of hirudin's gene was obtained and entered to a powerful vector (pET-22b). N_terminal His-tag was used for protein purification. We inserted pelB signal sequence at the begining of the gene to secrete protein to periplasmic region and culture medium. The expression of the target protein by origami (DE3) strain was then measured. Finally, the target protein was measured in periplasmic region, cytoplasm and culture medium. Results: The results showed that more protein was expressed in the periplasmic space and a small amount of protein secreted into the culture medium. Conclusion: Using the vectors capable of transferring the proteins to the periplasmic region, that is very favorable space for the formation of disulfide bonds and properly folding of the target protein, could decrease the production of inclusion bodies and increase the production of soluble and active proteins
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله سحر صباغ زاده | sahar sabaghzadeh
msc in cellular and molecular biology, department of biology, pharmaceutical sciences branch, islamic azad university,tehran, iran
علوم پزشکی مازندران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی مازندران (Mazandaran university of medical sciences)

حسن میرزاحسینی | hasan mirzahoseini
assistant professor, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
تهران انستیتو پاستور ایران، بخش بیوتکنولوژی پزشکی
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

دلاور شهباز زاده | delavar shahbazzadeh
assistant professor, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
علوم پزشکی مازندران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی مازندران (Mazandaran university of medical sciences)

طاهره ناجی | tahereh naji
assistant professor, department of biology, pharmaceutical sciences branch, islamic azad university,tehran, iran
علوم پزشکی مازندران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی مازندران (Mazandaran university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4333-2&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده بیوتکنولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات