این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۴، شماره ۱۱۷، صفحات ۱۲-۲۰
عنوان فارسی همسان سازی و بیان نوترکیب فاکتور بیماریزای EspA مربوط به باکتری E. coliO۱۵۷:H۷
چکیده فارسی مقاله Normal 0 false false false EN-US ZH-TW AR-SA MicrosoftInternetExplorer4 چکیده سابقه و هدف: باکتری E. coliO157:H7 جزء پاتوژن‌های روده‌ای می‌باشد که آسیب‌های جدی در دستگاه گوارش پدید می‌آورد. اتصال باکتری در روده بزرگ به واسطه یک سری از فاکتورهای بیماری زا صورت می‌پذیرد که پروتئین‌های ترشحی نوع 3 نیز جزء این فاکتورها دسته‌بندی می‌شوند. در بین پروتئین‌های موجود در سیستم مذکور، پروتئین EspA نقش اصلی و مهم را در پیکره شکل‌گیری این سیستم ایفا می‌کند. هدف از انجام این تحقیق همسان‌سازی و بیان این پروتئین به شکل نوترکیب جهت دستیابی به یک ساختار و منبع پایدار برای تولید آن به منظور بررسی‌های آینده به عنوان کاندید واکسن می‌باشد. مواد و روش‌ها: طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن espA توسط نرم‌افزار Oligo 7 انجام شد و تکثیر ژن توسط واکنش PCR از روی DNA الگو صورت پذیرفت. واکنش‌های هضم آنزیمی و الحاق ژن درون وکتور بیانی pET28a(+) انجام شد. پس از تأیید همسان سازی ژن مورد نظر، بیان نوترکیب پروتئین EspA با استفاده از القاءگر مصنوعی IPTG صورت پذیرفت. آنالیز وسترن بلات نیز برای تأیید پروتئین EspA صورت پذیرفت. یافته‌ها: همسان سازی ژن espA درون وکتور pET28a(+) به شکل مناسب بین جایگاه های مربوطه صورت پذیرفت و پروتئین EspA پس از القا، بیان نوترکیب مناسب و قابل توجهی را نشان داد. آنتی‌بادی مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی EspA را شناسایی کند. استنتاج: ساختار نوترکیب پایدار محتوی ژن espA تولید گردید که بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین را نشان داد. بنابراین پروتئین EspA را می‌توان در مطالعات آینده برای بررسی میزان ایمن‌سازی علیه E. coli O157:H7 مورد بررسی قرار داد. /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:0 mso-tstyle-colband-size:0 mso-style-noshow:yes mso-style-priority:99 mso-style-qformat:yes mso-style-parent:"" mso-padding-alt:0cm 5.4pt 0cm 5.4pt mso-para-margin:0cm mso-para-margin-bottom:.0001pt mso-pagination:widow-orphan font-size:11.0pt font-family:"Calibri","sans-serif" mso-ascii-font-family:Calibri mso-ascii-theme-font:minor-latin mso-fareast-font-family:PMingLiU mso-fareast-theme-font:minor-fareast mso-hansi-font-family:Calibri mso-hansi-theme-font:minor-latin mso-bidi-font-family:Arial mso-bidi-theme-font:minor-bidi}
کلیدواژه‌های فارسی مقاله پاتوژن روده‌ای، همسان سازی ژن espA، بیان نوترکیب، وسترن بلات
عنوان انگلیسی Cloning and Recombinant Expression of EspA as a Virulence Factor of E. coli O157:H7
چکیده انگلیسی مقاله Abstract Background and purpose: E. coli O157:H7 is one of the intestinal pathogens that mediate serious damages in gastrointestinal track. The bacterium attachment in large intestine is mediated via some colonization factors mainly Type III secretion proteins that are involved in this process. Among these factors, EspA protein plays an important role in system foundation. The aim of this study was cloning and recombinant expression of EspA in order to achieve a stable construct for the protein production and using it as a vaccine candidate in future investigations. Materials and methods: Specific primers were designed by Oligo 7 software and gene amplification was performed by PCR technique on template DNA. Enzymatic digestion and ligation were done by restriction enzymes and T4 ligase enzyme, respectively. Recombinant expression of EspA was induced by IPTG following cloning confirmation. Protein confirmation was done by Western blotting analyze. Results: Results showed that cloning of espA in pET28a (+) vector was performed in an appropriate mode between expected sites. Also, EspA had good and remarkable recombinant expression after induction and the antibody used in western blotting could recognize EspA on nitrocellulose membrane. Conclusion: Stable recombinant construct containing espA gene was fabricated that showed appropriate recombinant expression of protein. So, this protein could be used in future studies as a vaccine candidate against E. coli O157:H7.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله مصطفی بخشی | mostafa bakhshi
phd student in nanobiotechnoligy, biology research center, faculty of basic science, imam hossein university, tehran, iran
دانشجوی دکتری نانوبیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

فیروز ابراهیمی | firouz ebrahimi
assistant professor, department of biology, biology research center, faculty of basic science, imam hossein university, tehran, iran
تهران اتوبان شهید بابایی، دانشگاه امام حسین ع ، گروه و مرکز تحقیقات زیست شناسی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

جمیل زرگان | jamil zargan
assistant professor, department of clinical biochemistry, biology research center, faculty of basic science, imam hossein university, tehran, iran
استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

شهرام نظریان | shahram nazarian
assistant professor, department of clinical biochemistry, biology research center, faculty of basic science, imam hossein university, tehran, iran
استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع ، تهران، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (Imam hosseyn university)

وحیده شیخ زاده | vahideh sheikhzade
msc in food science and technology, islamic azad university, quchan branch, quchan, iran
کارشناسی ارشد تکنولوژی و علوم غذایی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قوچان، گروه علوم و صنایع غذایی، قوچان، ایران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قوچان (Islamic azad university of ghoochan)

نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1269-9&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده بیولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات