این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۲، شماره ۹۶، صفحات ۵۹-۶۹
عنوان فارسی ارزیابی کینتیکی آنزیم نیتریک اکسید سنتاز استخراج شده از کلیه گوسفند
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: نیتریک اکسید (NO) از طریق نیتریک اکسید سنتاز (NOS) و از ال- آرژینین تولید شده و در پروسه‌های فیزیولوژیکی و پاتولوژیکی متعددی از سیستم‌های بیولوژیکی نقش دارد. در این بررسی، فعالیت‌های کینتیکی NOS جدا شده از کلیه گوسفند مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش‌ها: با استفاده از تکنیک‌های هموژنیزاسیون، رسوب توسط سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی ستونی روی DEAE-32سلولز و'2، '5-ADP-آگاروز، آنزیم NOS از 500 گرم از بافت کلیه گوسفند، جدا و خالص‌سازی شد. در هر مرحله از روند خالص‌سازی این آنزیم، مقدار پروتئین و فعالیت آن با استفاده از روش‌های برادفورد و گریس بررسی شد. یافته‌ها: در این بررسی، وزن ملکولی NOS کلیه گوسفند در الکتروفورزSDS-PAGE، 54 کیلو دالتون بود. فعالیت ویژه، 6/0 واحد بر میلی گرم پروتئین و بازده خالص سازی آن نیز 9/0 درصد (خلوص نسبی 20 برابر) به دست آمد. pH و دمای اپتیم این آنزیم نیز به ترتیب 4/7 و 30 درجه سانتیگراد به دست آمد و انکوباسیون پروتئین نشان داد که در محدوده دمایی 10 تا 30 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه، آنزیم پایدار می باشد. در غلظت 75 میکرو مول از سوبسترای ال-آرژینین، بیشترین فعالیت NOS مشاهده شد. Vmax و Km آنزیم به ترتیب 250 نانو مول در دقیقه در میلی‌گرم پروتئین و 32/5 میکرومول به دست آمد. استنتاج: نزیم NOS از کلیه گوسفند با خلوص نسبی 20 برابر خالص سازی شد و دمای اپتیمم، pH، غلظت مناسب سوبسترا، Vmax و Km آن به ترتیب 30 درجه سانتیگراد، 4/7، 75 میکرومول، 250 نانو مول در دقیقه در میلی گرم پروتئین و 32/5 میکرومول به دست آمد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله نیتریک اکسید سنتاز (NOS)، فعالیت کینتیکی، گوسفند،کلیه
عنوان انگلیسی Kinetic Activity of Isolated Nitric-oxide Synthase Enzyme from Sheep Kidney
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Nitric oxide (NO) is produced by nitric oxide synthase (NOS) from L-arginine and has an important role in a variety of physiological and pathological processes in biological systems. In this study, kinetic activities of isolated NOS were evaluated from sheep kidney. Materials and methods: In this reasearch homogenization, ammonium sulfate precipitation and column chromatography on DEAE-32 Cellulose and 2', 5'-ADP-agarose of 500 grams of sheep kidney were used to purify isolated nitric oxide. In all steps of purification process the amount of protein and its activity was assayed using Bradford and Griess reactions. Results: The molecular weight of sheep kidney on SDS-PAGE electrophoresis was 54 KD. Specific activity was 0.6 units/mg protein and recovery of purification was 0.9% (relative purity was 20 times more). Optimum temperature and pH were 30˚C and 7.4 and incubation of purified enzyme at thermal interval of 10 to 30˚C for 15 minute showed a stable enzyme activity. At 75 μM concentration of L-arginine substrate, the highest level of NOS activity was seen. The Vmax and Km of enzyme were 250 nmol/min/mg protein and 5.32 M, respectively. Conclusion: NOS enzyme from sheep kidney was purified with relative purity of 20 times and their optimum temperature, pH, suitable substrate concentration, Vmax and Km were 30˚C, 7.4, 75 μM, 250 nmol/min/mg proteins and 5.32 µmol, respectively.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Nitric oxide synthase (NOS), kinetic activity, sheep, kidney
نویسندگان مقاله منیژه کدخدایی الیادرانی | manizheh kadkhodaei elyaderani


علی محمد ملک عسکر | ali mohammad malek askar


مراد رستمی | morad rostami


محمد آبرومند | mohammad aberomand


علیرضا خیراله | alireza khirollah


نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1768-2&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات