این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۱، شماره ۸۴، صفحات ۲۳-۳۱
عنوان فارسی جدا نمودن ژن تنظیمی استرپتومایسین فاقد پروموتر [StrR۲] از استرپتومایسز گریزئوس
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: استفاده از PCR برای شناسایی و جدا نمودن ژن ‌ها یک روش نسبتا سریع و دقیق می باشد. نکته قابل تامل در این تکنیک هدفمند طراحی نمودن پرایمرهای مورد استفاده می‌ باشد. پرایمرها طوری طراحی می ‌شوند که نه تنها ویژگی‌ های ژنوم در نظر گرفته شود، بلکه کلونینگ ژن نیز منظور و یا به عبارت دیگر تسهیل گردد. آنتی بیوتیک استرپتومایسین توسط استرپتومایسز گریزئوس با به کار بردن دسته ژنی Str با بیش از 25 ژن تولید می ‌شود. این دسته ژنی دارای ژن StrR است که پروتئین تنظیم کننده اختصاصی این دسته ژنی را کد می ‌نماید. هدف از این تحقیق جدا نمودن ژن StrR2 بدون پروموتر آن و سپس کلونینگ آن بود.مواد و روش ها: جهت جدا نمودن ژن StrR بدون پروموتر ذاتی خود، StrR2 فاقد پروموتر آغازگرهای مختلفی طراحی گردید. یک جفت از این آغازگرها (St Nes)، ژن StrR را در ژنوم شناسایی کرد و همچنین Nested-PCR برای شناسایی ژن StrR2 تکثیر شده نیز به کار رفت. در سایر آغازگرها (Str nP2 و Str nP1) جایگاه ‌های BamHI و XbaI طراحی شد، این آغازگرها نه تنها ژن StrR2 را تکثیر کردند، بلکه جایگاه ‌های برش آنزیمی در قطعات تکثیر شده را نیز ایجاد کردند.یافته ها: ژن StrR2 فاقد پروموتر با استفاده از PCR تکثیر گردید و ساختار آن مورد تایید قرار گرفت. کلونینگ این ژن به‌ طور موفقیت آمیز صورت گرفت. سپس ساختار پلاسمیدهای نوترکیب با استفاده از روش ‌های مختلف چون الکتروفورز،PCR وهضم آنزیمی مورد تایید قرار گرفت.استنتاج: با استفاده از این وکتور می ‌توان ژن StrR2 فاقد پروموتر را در وکتورهای ویژه استرپتومایسز که واجد پروموترهای القایی هستند ساب کلون نمود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله استرپتومایسین، ژن StrR2 فاقد پروموتر، استرپتومایسز گریزئوس
عنوان انگلیسی Isolation of the Promoterless Streptomycin Regulatory Gene (StrR2) from Streptomyces Griseus
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Polymerase chain reaction (PÇR) is a rather quick and accurate method employed for gene detection and isolation. Primer designing is an important issue in this technique and plays a critical role in considering both the genome properties and cloning of the isolated genes. Streptomycin antibiotic is produced by Streptomyces griseus using str gene cluster with more than 25 genes. This gene cluster contains StrR gene encoding a specific protein regulator of this cluster. The pathway specific transcriptional activator then induces transcription of other genes in the str gene cluster. Ïn this study, the researchers aimed at isolating promoterless StrR2 gene and then cloning it. Materials and methods: To isolate promoterless StrR gene, a set of primers (StrR2) was designed. Ône pair of these primers (St Nes) detected the StrR from the genome. Moreover, Nested-PÇR was then used to detect amplified StrR2 gene. Sites for BamHÏ and XbaÏ were designed in other primers (Str nP1and Str nP2). These primers not only amplified the StrR2 gene but also created restriction enzyme sites in the amplified fragments. Results: Üsing PÇR, the promoterless StrR2 gene was amplified and its structure was confirmed. This gene was successfully cloned, too. The correct structure of the recombinant plasmids was confirmed using different techniques such as gel electrophoresis, PÇR and restriction digestion analysis. Çonclusion: Üsing this vector, one can subclone the promoterless StrR2 gene in the Streptomyces expression vectors containing inducible promoters.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Streptomycin, promoterless StrR2 gene, Streptomyces griseus
نویسندگان مقاله زهره حجتی نجف آبادی | z hojati
department of biology, faculty of sciences, üniversity of ïsfahan, ïsfahan, ïran
اصفهان دانشگاه اصفهان، دانشکده علوم، گروه زیست شناسی
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه اصفهان (Isfahan university)

مجید متولی باشی | m motovali bashi


غلامرضا بیدخوری | gh r bidkhori


نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-666&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات