این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۲۰، شماره ۸۰، صفحات ۳۴-۴۳
عنوان فارسی ارزیابی کمی و بهینه سازی تشخیص DNA آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه خون با استفاده از تکنیک Real time PCR
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: آسپرژیلوزیس مهاجم عفونت فرصت طلب جدی ناشی از گونه های مختلف قارچ آسپرژیلوس است که اغلب در افراد دارای نقص سیستم ایمنی رخ می دهد. اساسا، تشخیص سریع و زودرس آن، از پیشرفت این عفونت قارچی جلوگیری بعمل می آورد. هدف از این مطالعه تعیین کمی و بهینه سازی DNA آسپرژیلوس فومیگاتوس در خون با استفاده از تکنیک Real time PCR بود.مواد و روش ها: پنج میلی لیتر خون داوطلب سالم را با رقت های مختلفی از کونیدی های آسپرژیلوس فومیگاتوس (106 تا 101) آلوده شد. استخراج DNA از خون با استفاده از گلوله شیشه ای و کیت QIAmp DNA Blood Mini Kit انجام شد. پرایمر و پروب های هیبریدیزاسیون برای تکثیر سکانس های اختصاصی گونه متعلق به ژن18S rRNA آسپرژیلوس فومیگاتوس طراحی و با استفاده از روشReal time و تکنیک FRET مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: تمامی واکنش های PCR با DNA دیگر گونه های قارچی منفی بودند که نشان دهنده اختصاصیت 100 درصد این روش بود. آنالیز دمای ذوب آسپرژیلوس فومیگاتوس تنها در یک نقطه حداکثر سیگنال دمایی را با پروب در دمای 69.16 C نشان دادکه به تشخیص آسپرژیلوس فومیگاتوس کمک می کند. حداقل مقدار DNA (100fg) CFU 110 معادل 10 کونیدی یا سلول در هر واکنش PCR مشخص گردید که نشان دهنده حساسیت بالای این روش می باشد.استنتاج: روش Real time PCR با بکارگیری پروب های هیبریدیزاسیون دارای اختصاصیت و حساسیت بالا برای اندازه گیری بار قارچی جهت تشخیص زودرس و مانیتورینگ درمان می باشد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله آسپرژیلوزیس مهاجم، Quantitative PCR، تشخیص
عنوان انگلیسی Quantification and optimization of detection Aspergillus fumigatus DNA in blood sample using Real Time PCR
چکیده انگلیسی مقاله Background and purpose: Ïnvasive aspergillosis (ÏÂ) is a serious opportunistic infection caused by various species of Âspergillus in immnucompromissed individuals. Basically, rapid and early diagnosis prevents ÏÂ progression. The purpose of this study was to quantify and optimize detection of Âspergillus fumigatus DNÂ in blood samples using Real Time PÇR. Materials and methods: Five milliliter blood samples of healthy volunteers were spiked with various dilutions of conidial suspension of Âspergillus fumigatus (106 to 101). DNÂ was extracted from blood using glass beads and QÏÂmp DNÂ Blood Mini Kit. The primers and hybridization probes were designed to amplify the 18S rRNÂ genes using the LightÇycler system and Fluorescence Resonance Ënergy Transfer. Results: Âll PÇR reactions were negative with other species of fungal DNÂ with 100% specificity. Melting curve analysis showed the species- specific melting temperature patterns on 69.14oÇ which help to differentiate Âspergillus fumigatus. The lower limit was determined 101 ÇFÜ (100 fg) or 10 conidia or cells per PÇR reaction which indicates a high sensitivity. Çonclusion: Real-time PÇR method employing hybridization probes is a highly specific and sensitive approach to determine the fungal load for early diagnosis and monitoring treatment.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Ïnvasive aspergillosis, quantitative PÇR, diagnosis
نویسندگان مقاله مجتبی نبیلی | m nabili


طاهره شکوهی | t shokohi
department of parasitology amp;amp; mycology, faculty of medicine, çellular and molecular research çenter, mazandaran üniversity of medical sciences, sari, ïran
ساری کیلومتر 18 جاده خزرآباد، دانشکده پزشکی، گروه انگل شناسی و قارچ شناسی

سیدمحمدباقر هاشمی سوته | m b hashemi soteh


قاسم جانبابایی | gh jan babaie


سیدرضا عقیلی | s r âghili


زهرا حسینی خواه | z hoseinikhah


نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-645&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات