این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران، جلد ۱۸، شماره ۶۶، صفحات ۵۱-۶۲
عنوان فارسی تعیین گونه مالاسزیاهای جدا شده از بیماران مبتلا به پیتیر یازیس ورسیکالر و درماتیت سبوروئیک، با روش PCR-RFLP
چکیده فارسی مقاله سابقه و هدف: اعضای جنس مالاسزیا مخمرهای چربی دوست هستند که فلور طبیعی پوست انسان بوده و با تعدادی بیماریهای پوست مرتبط می باشند. این ارگانیسم در شرایط خاصی مسبب بیماری پیتیریازیس ورسیکالر و درماتیت سبوروئیک می باشد. گونه های مالاسزیا را می توان از طریق خصوصیات مرفولوژیک و بیوشیمیایی شناسایی کرد ولی این روشهای فنوتیپی معمولا زمان بر و فاقد قدرت تمایز کافی است؛ لذا روش های مولکولی شناسایی سریع تر و صحیح تری را فراهم می کند. هدف از این مطالعه تعیین گونه های مالاسزیا جدا شده از بیماران مبتلا به پیتیریازیس ورسیکالر،درماتیت سبوروئیک،درماتیت اتوپیک با روش PCR –RFLP است.در این مطالعه ناحیه ITS1 از DNA ریبوزومی جهت تقویت در آزمایش PCR مورد استفاده قرار گرفت. آنگاه پلی مرفیسم موجود در قطعات تقویت شده به وسیله روشRFLP با استفاده از آنزیم های C‏fOI و BS+F5I و ایجاد قطعات متفاوت مورد بررسی قرار گرفت و با توجه به الگوهای مختلف DNA های هضم شده گونه های مالاسزیا شناسایی شد.مواد و روش ها: جمعا 63 گونه مالاسزیا 30 استرین جدا شده از بیمار مبتلا به پیتیریازیس ورسیکالرو 33 استرین جدا شده از بیماران مبتلا به درماتیت سبوروئیک مورد مطالعه قرار گرفت. جهت بررسی مولکولی، DNA ژنومی مخمرهای مالاسزیا جدا شده از محیط کشت استخراج گردید. ناحیه ITS1 (بین 18S و (5.8S از DNA ریبوزومی بوسیله واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) تقویت گردید. تعدادی از محصولات با یرایمر(forward) ITS1 تعیین توالی شد و با جستجو در بانک ژنی گونه مالاسزیا تعیین گردید. آنگاه پلی مرفیسم موجود در قطعات تقویت شده به وسیله روشRFLP با استفاده از آنزیم های CfOI و BS+F5I و ایجاد قطعات متفاوت مورد بررسی قرار گرفت و با توجه به الگوهای مختلف DNAهای هضم شده گونه های مالاسزیا شناسایی شد.یافته ها: از 37 بیمار مبتلا به پیتیریازیس ورسیکالر (20 زن، 17 مرد) که محدودهسنی آنها بین 64-2 سال بود، در 30 مورد (81.1 درصد) کلنی مالاسزیا روی محیط کشت رشد کرد و مالاسزیا گلوبوزا از 16 بیمار (53.3 درصد)، مالاسزیا فور فور از 12 بیمار 40 درصد و مالاسزیا سیمپودیالیس از 2 بیمار (6.7 درصد) جدا شد. از 41 بیمار مبتلا به درماتیت سبوروئیک (22 زن، 19 مرد) که محدودهسنی آنها بین 52-1 سال بود. در 33 مورد (80.5 درصد) کلنی مالاسزیا روی محیط کشت رشد کرد و مالاسزیا فور فور از 14 بیمار (42.4 درصد)، مالاسزیا گلوبوزا از 13 بیمار (39.4 درصد)، مالاسزیا رستریکتا از 5 بیمار (15.2 درصد) و مالاسزیا سیمپودیالیس از یک بیمار (3 درصد) جدا شد. نتایج به دست آمده از آزمایش PCR- RFLP با نتایج به دست آمده از تعیین توالی نمونه های DNA و خصوصیات مرفولوژیک و بیوشیمیایی مطابقت کامل داشت. توالی های بررسی شده از 93 تا 99 درصد با توالی رفرانس خود در بانک ژنی شباهت داشت.استنتاج: گونه های غالب جدا شده در بیماران پیتیریازیس ورسیکالر به ترتیب فراوانی مالاسزیا گلوبوزا و مالاسزیا فور فور و گونه های غالب جدا شده در بیماران درماتیت سبوروئیک به ترتیب فراوانی مالاسزیا فورفور و مالاسزیا گلوبوزا بودند. همچنین الگوی حاصل از هضم آنزیمی قطعه ITS1 در مورد مالاسزیاهای بررسی شده روشی ساده، سریع و تکرار پذیر برای شناسایی گونه های مهم مالاسزیا می باشد اما جهت اطمینان، توصیه می شود این روش در مورد بیماران بیشتری مورد استفاده قرار گیرد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Identification of Malassezia Species isolated from patients with pityriasis versicolor and seborrhoeic dermatitis by PCR-RFLP
چکیده انگلیسی مقاله Background and Purpose: Lipophilic yeast of the genus Malassezia are members of normal human cutaneous micro flora which are also associated with several skin diseases. It is strongly suspected that Malassezia species are responsible for pityriasis versicolor (PV), and seborrhoeic dermatitis (SD). Considering various sensitivities among Malassezia species to antifungal, accurate species identification will facilitate the treatment of relevant diseases. Malassezia species can be identified through their morphological features and bio-chemical characteristics. However, these phenotypic methods are usually time consuming, and lack sufficient discriminatory power. Development of DNA- based methods for detection and identification of Malassezia species provide helpful alternatives for solving problems. The aim of this study was to examine the distribution of Malassezia species in patients with pityriasis versicolor and seborrhoeic dermatitis, using molecular methods. Materials and methods: A total of 63 clinical isolates of Malassezia spp, 30 strains isolated from patients with PV and 33 strains isolated from patients with SD, were studied. To investigate the strains at molecular level, genomic DNA of Malassezia isolates were extracted and amplified within the ITS1 region (located between 18S and 5.8S rDNA) by polymerase chain reaction (PCR) assay. DNA sequencing of ITS1 of rDNA in Malassezia spp was performed to type the species. Restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis of ITS1 PCR product with two restrictive enzymes CFOI and BSTF5I, was used in subsequent species identification. Results: In this study, 37 patients with PV (20 females, 17 males 2 to 64 years old), 81.1% (30 case) yielded growth of Malassezia in culture, while the frequency of isolation of M. globosa was 53.3% (16 case), M .furfur 40% (12 case) and M. sympodialis 6.7% (2 case). Of the 41 patients with SD (22 females, 19 males 1 to 52 years old), 80.5% (33 case) yielded growth of Malassezia in culture, while the frequency of M. furfur was 42.4% (14 case), M.globosa 39. 4% (13 case), M. restrict 15.2% (5 case) and M. sympodialis 3% (1 case). This PCR-RFLP Profile allows us to clearly identify important Malassezia species. The results of the PCR-RFLP analyses of clinical isolates were in complete agreement with those from DNA sequencing, morphological features and bio-chemical characterization. Conclusion: In patients with PV, the most frequently isolated species were M. globosa, followed by M .furfur. However, in patients with SD, the most frequently isolated species were M. furfur, followed by M. globosa. The PCR-RFLP system applied for the ITS1 fragment of the rDNA is a reliable, simple and rapid method for identification of the most important Malassezia species, but further work will be necessary in applying these techniques to additional patients.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله طاهره شکوهی | t shokohi
faculty of medicine, mazandaran university of medical sciences, sari, iran
دکترای قارچ شناسی پزشکی، استاد دانشگاه علوم پزشکی مازندران
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی مازندران (Mazandaran university of medical sciences)

زهره حاج حیدری | z hajheidari


آزیتا بذرگر | a barzgar


سیدمحمدباقر هاشمی سوته | m b hashemi sooteh


محمدتقی هدایتی | m t hedayati


سیدرضا عقیلی | s r aghili


پروانه افشار | p afshar


نشانی اینترنتی http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-511&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی-کامل
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات