این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
زیست فناوری، جلد ۹، شماره ۱، صفحات ۱-۸
عنوان فارسی تولید رده نوترکیب HEK۲۹۳T با بیش-بیانی پایدار miR-۱ به عنوان مدل مطالعات قلبی
چکیده فارسی مقاله زمینه و هدف: القای مصنوعی بیش-بیان miRNA راهکار مناسبی جهت القای موثرتر تمایز سلولی می باشد. نقش موثر microRNA-1 (mir-1) در تکوین و تمایز سلولهای قلبی گزارش شده است. لنتی ویروس یک ناقل کارآمد برای تهیه رده های سلولی پایدار می باشد. هدف این مطالعه تولید رده سلولی با بیش-بیان پایدار miR-1 جهت ایجاد یک مدل زیستی برای مطالعات قلبی می باشد. روش بررسی: پس از کلون کردن ژن miR-1، کلونهای نوترکیب انتخاب شدند و حضور قطعه ژنی در وکتور نوترکیب با توالی یابی تایید شد. وکتور حاملmir-1 به همراه وکتورهای کمکی در سلولHEK293T به صورت ویروس نوترکیب بسته بندی شد. ترااآلایی سلول های HEK293T با ویروس نوترکیب جهت تولید رده پایدار انجام شد. سپس کارآیی تراآلایی و رقت موثر ویروس با نشانگر GFP سنجش شد. تغییرات بیان mir-1 با روش qPCR بررسی شد. یافته ها: بیشترین میزان بیان GFP مربوط به سلول های آلوده شده با رقت 150 میکرومول بود. نشانگر فلورسنت GFP موجب تسهیل فرآیند بهینه سازی و تخلیص سلول های نوترکیب شد. در ارزیابی qPCR، بیان mir-1 در سلول های تراآلایی شده در مقایسه با سلول های گروه کنترل افزایش قابل ملاحظه ای داشت. نتیجه گیری: رده سلولی پایدار نوترکیب بیش-بیان کننده miR-1 می تواند به عنوان مدل زیستی مناسبی جهت بررسی فرآیندهای تکامل و تکوین قلب، غربالگری داروهای قلبی و مهندسی بافت عضله قلبی استفاده شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله تمایز قلبی،تراآلایی ویروسی سلول،مدل زیستی،
عنوان انگلیسی Production of Recombinant HEK293T with Stable Over-Expression of miR-1 as Model for Cardiac Studies
چکیده انگلیسی مقاله Backgrounds and Objectives: Induced artificial over-expression of miRNAs is an appropriate approach to more effective cell differentiation. The significant role of microRNA-1(mir-1) in development and differentiation of cardiac cells has been reported. Lentivirus is an effective vector for stable cell line production. The aim of this study is the production of a stable cell line with mir-1 overexpression to provide a biological model for cardiac studies. Materials and Methods: After cloning of mir-1 gene, recombinant clones were selected and the recombination was confirmed by sequencing. The mir-1 carrying vector and auxiliary vectors were packaged in the HEK293T to produce the recombinant virus. The infection of HEK293T by recombinant virus was performed in order to achieve stable cell line. Then, GFP fluorescent marker evaluated the efficiency of transfection and effective virus dilution. Finally, the alteration in expression level of mir-1 was assessed by qPCR. Results: The most GFP expression was detected in transfected cells by 150 micromole dilution. GFP fluorescent marker facilitated optimization and purification of recombinant cells. qPCR investigation demonstrated the significant increase in expression of mir-1 in transfected cells in comparison to controls. Conclusion: The stable recombinant mir-1 over-expressing cell line can be utilized as a suitable biological model for investigation of cardiac evolution and development, screening of cardiac pharmaceutics as well as myocardiac tissue-engineering approaches.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله بهناز بخشنده | behnaz bakhshandeh
University of Tehran
دانشگاه تهران- پردیس علوم- گروه بیوتکنولوژی

مهسا راسخی |
دانشجو

مسعود سلیمانی |
هیات علمی- دانشگاه تربیت مدرس

مجید صادقی زاده |
هیات علمی- دانشگاه تربیت مدرس

علی سلیمی |
هیات علمی- دانشگاه بقیه الله

نشانی اینترنتی http://journals.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-22-20160-1&slc_lang=fa&sid=22
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات