این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۲۱، شماره ۲، صفحات ۱۰۱-۱۰۶
عنوان فارسی طراحی روش غربالگری سریع چهار جهش شایع ژن بتاگلوبین در جمعیت ایران با ‌استفاده از روش منحنی ذوب با تفکیک بالا
چکیده فارسی مقاله اهداف: تالاسمی بتا، یک بیماری خونی و ژنتیکی است، شیوع ناقلین این بیماری در جمعیت ایران بالاست. بررسی غربالگری قبل از ازدواج برای تعیین ناقلین تالاسمی بتا، به تشخیص سریع و قابل اعتماد نیاز دارد. هدف پژوهش حاضر طراحی روش غربالگری سریع چهار جهش‌ شایع ژن بتا گلوبین جمعیت ایران با استفاده از روش ذوب با تفکیک بالا (HRM) بود. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربی حاضر هشت نمونه از افراد مبتلا و ناقل تالاسمی بتا با ژنوتیپ‌های (G>A) IVSI-110، A) IVSII-I (G>، (IVSI-5 (G>C و CD36/37 (-T) در شرایط هموزیگوت و هتروزیگوت و یک نمونه کنترل (فرد سالم) انتخاب شدند. بعد از گرفتن خون، استخراج DNA با روش نمکی انجام شد. برای اطمینان، نمونه‌ها به‌صورت دوتایی ران شدند و دو نمونه کنترل بدون DNA نیز به‌کار رفت. آغازگرها، با کمک نرم‌افزارهای Gene Runner 6.0.28، Primer Express v 3.0.1 3/1) و Primer3 v. 0.4.0 طراحی شدند و روش HRM برای تعیین جهش‌های فوق به‌کار رفت. یافته‌ها: بهترین غلظت مناسب DNA، 5نانوگرم بر میکرولیتر به‌دست آمد. در مرحله تفاوت نمودار به‌وضوح تفاوت منحنی‌ها در شرایط هتروزیگوت، نرمال و هموزیگوت مشاهده شد. در جهش IVSII-IG>A در منحنی ذوب برخلاف انتظار دو قله در نمونه‌ها دیده شد، علت آن حضور یک پلی‌مورفیسم در نزدیکی جهش بود. نتیجه‌گیری: روش HRM قابلیت تشخیص چهار جهش شایع ژن بتاگلوبین را دارد و می‌تواند بین فرد هتروزیگوت و هموزیگوت و فرد سالم نیز در یک جهش واحد افتراق ایجاد کند. روش HRM توان بالایی داشته و می‌تواند 96 نمونه DNA را در مدت دو ساعت آنالیز کند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله بتا تالاسمی، جهش، ایران
عنوان انگلیسی Designing a Rapid Screening Method for Detection of Four ‎Common Beta Globin Gene Mutations in Iranian Population by ‎High-Resolution Melting Analysis
چکیده انگلیسی مقاله Aims: Beta-thalassemia is a blood and genetic disorder. Prevalence of beta-thalassemia trait is high in Iranian population. Therefore, for detection of carriers' status in premarital screening we need to establish reliable and rapid scanning method. The aim of this study is development a rapid method to detect four common beta globin gene mutations in Iranian population by HRM (High-Resolution Melting Analysis. Materials and Methods: In this experimental study, eight samples of beta-thalassemic carriers and illness with IVSI-110 (G>A), IVSII-I (G>A), IVSI-5 (G>C) and CD36/37 (-T) genotypes in Homozygote and heterozygote conditions and one control sample (healthy person) were selected. After blood collection, DNA extraction was performed using salting out method. To ensure, the samples were run binary, and two control samples without DNA were used. Primers were designed with Gene Runner 6.0.28, Primer Express v 3.0.1 3/1) and Primer3 v. 0.4.0 and HRM method was used to determine the above mutations. Findings: The best concentration of DNA was obtained at 5ng/μl. In the difference plot step, the differences between the curves were clearly observed in heterozygous, normal and homozygous conditions. Unexpectedly, in the mutation IVSII-IG>A in the melting curve was seen two peaks in the samples; it was due to the presence of a polymorphism near the desired mutation. Conclusion: The HRM method is capable of detecting the four common beta globin gene mutations, and, it can differentiate between heterozygote and homozygous in a single mutation. This method is high throughput, which can analyze 96 samples of DNA in 2hours.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Beta- thalassemia, Mutation, Iran
نویسندگان مقاله محمد حمید | M. Hamid
Molecular Medicine Department, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
بخش پزشکی مولکولی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

سمیه مروتی‌شریف‌آباد ‌ | S. Morovati Sharif Abad ‎
Molecular Medicine Department, Biotechnology Research Center, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
بخش پزشکی مولکولی، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://journals.modares.ac.ir/browse.php?a_code=A-30-24381-1&slc_lang=fa&sid=30
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/159/article-159-729668.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات