این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۶، شماره ۴، صفحات ۲۷-۳۷
عنوان فارسی تأثیر بیان پایدار IgG۴ نوترکیب بر رشد سلول‌های Sp۲.۰
چکیده فارسی مقاله هدف: مطالعه تغییرات فیزیولوژیک سلول‌های نوترکیب در مقایسه با سلول‌های والد، اطلاعات مفیدی برای بهبود کارآیی فرایند تولید فراهم می‌نماید. در این مطالعه تأثیر بیان IgG4 کایمریک علیه نشانگر CD33 بر رشد سلول Sp2.0 بررسی شده است. مواد و روش‌ها: ژن‌های نواحی متغیر زنجیره‌های سبک و سنگین آنتی‌بادی تولید شده توسط سلول M195 به ترتیب در ناقل‌های pFUSE-CLIg-hk و pFUSE-CHIg-hG4 همسانه‌سازی شد. پلاسمیدهای نوترکیب در دو مرحله با استفاده از لیپوفکتامین به سلول‌های Sp2.0 منتقل شد. سلول‌های پایدار در محیط حاوی آنتی‌بیوتیک‌های بلاستیسیدین و زئوسین انتخاب شدند. الحاق سازه نوترکیب به ژنوم سلول‌های تراریخت مقاوم به آنتی‌بیوتیک‌ها و همچنین بیان IgG4 با استفاده از روش‌های PCR، RT-PCR و وسترن بلات بررسی شد. برای مطالعه پارامترهای کینتیکی، سلول‌های والد و نوترکیب با چگالی 105×1 سلول در هر میلی‌لیتر محیط کشت در پلیت 12 خانه به مدت 9 روز انکوبه شدند و هر 24 ساعت از سلول‌ها نمونه‌برداری شد و شمارش تعداد سلول زنده و محاسبه درصد زنده بودن انجام گرفت. نتایج: بر اساس نتایج PCR، RT-PCR و وسترن بلات، ایجاد سلول تولید کننده پایدار IgG4 تأیید شد. این مطالعه نشان داد که حداکثر چگالی سلولی برای سلول‌های نوترکیب در مقایسه با سلول‌های والد 46 درصد کاهش یافته است در حالی که در این نمونه‌ها درصد سلول‌های زنده تغییری نکرده است. نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج این تحقیق بیان IgG4 کایمریک در سیستم Sp2.0/pFUSE-CHIg-hG4-pFUSE-CLIg-hk باعث تغییر برخی از پارامترهای رشدی سلول میزبان می‌شود.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله آنتی‌بادی تک دودمانی، IgG4، سلول Sp2.0، حداکثر چگالی سلولی،
عنوان انگلیسی The Effects of Recombinant IgG4 Expression on the Growth of Sp2.0 Cell Lines
چکیده انگلیسی مقاله Objective: The study of physiological changes in recombinant cell lines provides useful information to improve production performance. In this study, we investigate the effects of an anti-CD33 chimeric IgG4 expression on Sp2.0 cell growth. Methods: Variable region genes of light and heavy chains of monoclonal antibody produced by M195 were cloned in pFUSE-CLIg-hk and pFUSE-CHIg-hG4 expression vectors, respectively. Transfection of recombinant plasmids into Sp2.0 cell lines was performed using lipofectamine in two steps. Positive transformant cells were isolated and subjected to PCR, RT-PCR and Western blot analysis to confirm the integration of gene cassettes and the expression of recombinant IgG4. To assess the growth parameters, recombinant and parent Sp2.0 cell lines were seeded at a density of 1×105 cells/ml in duplicate into 12-well plates. For nine days, culture plates were sampled daily and viable cell count and viability determined. Results: The results of PCR, RT-PCR and Western blot analyses confirmed the generation of stable producer cell lines. In recombinant cells, the maximum cell density decreased by 46%. However, it was observed that IgG4 expression had no effect on cell viability of these transfectants. Conclusion: Our results showed that the expression of recombinant IgG4 can change growth parameters in Sp2.0 cell lines that express the pFUSE-CHIg-hG4-pFUSE-CLIg-hk construct.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله هدی جهاندار | hoda jahandar
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

وحید خلج | vahid khalaj
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

لیلا نعمت الهی | leila nematollahi
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

فاطمه زندی | fatemeh zandi
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

سمیه عنایتی | somayeh enayati
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

بهروز وزیری | behrouz vaziri
department of medical biotechnology, biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_10546_8b1402d96630f02d8ba3196b37ddf23e.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات