این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۵۱-۶۲
عنوان فارسی ساخت ناقل یوکاریوتی دو سیسترونی بیان کننده ژن‌های M۱ و نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزا
چکیده فارسی مقاله هدف: در این پژوهش در راستای راه‌اندازی یک واکسن جامع براساس واکسن ژنی، دو ژن محافظت شده در سویه‌ها و زیرگونه‌های مختلف ویروس آنفلوانزا (M1 و نوکلئوپروتئین) در ناقل دوسیسترونی یوکاریوتی بیان شد. مواد و روش‌ها: پلاسمیدهای M1-pIRES2-EGFP و pIRES2-NP به‌ترتیب با کلون کردن محصولات PCR ژن‌های M1 و نوکلئوپروتئین برگرفته از ویروس آنفلوانزا H1N1 سویه A/Peurto Rico/8/34 در داخل ناقل بیانی pIRES2-EGFP ساخته شد. به‌منظور ساخت پلاسمید دو سیسترونی M1-pIRES2-NP، ژن M1 از پلاسمید M1-pIRES2-EGFP استخراج و در پلاسمید pIRES2-NP ساب کلون شد. در نهایت بررسی بیان این دو پروتئین در سلول‌های یوکاریوتی با ترانسفکشن کلون ساخته شده به داخل سلول BHK-21 با استفاده از ایمونوفلوئورسنس غیر‌مستقیم انجام شد. نتایج: موفقیت در کلونینگ صحیح ژن‌های مذکور با هضم آنزیمی و تعیین توالی قطعات کلون شده به اثبات رسید. بیان صحیح این دو ژن در سلول‌های یوکاریوتی با ترانسفکشن این کلون در رده سلولی BHK-21 و بررسی با روش ایمونو فلورسنس به اثبات رسید. نتیجه‌گیری: بیان همزمان دو ژن M1 و نوکلئوپروتیئن ویروس آنفلوانزا در یک سازه ژنی با واسطه توالی IRES ممکن است.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Construction of a bicistronic eukaryotic vector expressing M1 and NP genes of influenza virus
چکیده انگلیسی مقاله Objective: In this study, two conserved genes (M1 and NP) of influenza virus were expressed in a bicistronic vector in order to develop a universal gene based vaccine. Materials and Methods: Plasmids M1-pIRES2-EGFP, pIRES2-NP were constructed by cloning the PCR products of M1 and NP genes which were amplified from the A/Peurto Rico/8/34 (H1N1) influenza virus strain into the plasmid expression vector pIRES2-EGFP, respectively. For construction of M1-pIRES2-NP bicistronic plasmid, M1 gene was extracted from M1-pIRES-EGFP plasmid and sub-cloned into pIRES2-NP construct. Finally, simultaneous expression of both genes was assessed by transient transfection of bicistronic plasmid into BHK-21 cell lines and subsequent immunofluorescence staining. Results: The results of enzymatic double digestions on the constructed plasmids and sequencing demonstrated the success of cloning processes of above mentioned genes. Correct expression of these genes was confirmed by M1-pIRES2-NP plasmid expression in BHK-21 cell lines confirmed by immunofluoresence microscopy. Conclusion: Simultaneous expression of influenza M1 and NP genes from a bicistronic plasmid containing "IRES" sequence is achievable.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله محمد شناگری | mohammad shenagari
ph.d. student, department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

فرزانه صباحی | farzaneh sabahi
associated professor, department of virology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

معصومه توسطی خیری | masoumah tavasoti kheiri
assistant professor, department of influenza, pasteur institute of iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

کامبیز فرقان پرست | kambiz forghan parast
associated professor, department of bacteriology, faculty of medicine, gilan university of medical sciences, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

عباس جمالی | abbas jamali
post-doctoral fellow, department of influenza, pasteur institute of iran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی گیلان (Guilan university of medical sciences)

حمیدرضا هاشمی | hamidreza hashemi
ph.d. student, department of virology, school of public health, tehran university of medical sciences, iran
سازمان اصلی تایید شده: انستیتو پاستور ایران (Pasteur institute of iran)

شادی خدامرادی | shadi khodamoradi
m.sc. student, department of influenza, pasteur institute of iran, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6172_e39f6542418d500554931f453886d19d.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات