این سایت در حال حاضر پشتیبانی نمی شود و امکان دارد داده های نشریات بروز نباشند
پژوهش‌های آسیب‌ شناسی زیستی، جلد ۱۴، شماره ۲، صفحات ۶۳-۷۴
عنوان فارسی ساخت نانوحامل دندریمری پلی آمیدوآمین-پلی اتیلن گلیکول هدف گیرنده TAG۷۲ برای انتقال ژن t-Bid به سلول‌های توموری کولورکتال
چکیده فارسی مقاله هدف: هدف از این تحقیق ساخت و بررسی اثر نانوحامل‌های پلی آمیدوآمین- پلی اتیلن گلیکول هدفمند شده با نانوبادی علیه TAG72 برای انتقال سازه کد کننده ژن t-Bid به سلول‌های آدنوکارسینومای کولون انسانی است. مواد و روش‌ها: ساب‌کلونینگ ژن نانوبادی در ناقل بیانی pSJ برای تولید انبوه پروتئین نانوبادی انجام و سپس نانوبادی با کاربرد ستون نیکل جداسازی شد. فرآیند جداسازی با SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ تأیید شد. افزودن پلی اتیلن گلیکول به نانوذرات پلی آمیدوآمین با نسبت مولی 1 به 2 (پلی آمیدوآمین به پلی اتیلن گلیکول) و هدفمندسازی با نانوبادی علیه TAG72 با نسبت مولی 1 به 1 انجام شد. بار سطحی و اندازه نانوذرات به‌ترتیب با دستگاه زتا سایزر مالورن و نانوسایت بررسی و کارایی حامل ژنی ساخته شده در انتقال ژن کشنده t-Bid به سلول‌های آدنوکارسینومای کولون در محیط آزمایشگاه با آزمون‌های Real Time PCR و تعیین میزان مرگ و میر سلولی بررسی شد. نتایج: نتایج بررسی با نانوسایت و زتا سایزر مالورن، به‌ترتیب ساخت نانوذرات هدفمند با اندازه 92±162 نانومتر و پتانسیل سطحی 57/4+ را نشان می‌دهد. آزمون تأخیر حرکت در ژل، کارآیی حامل ساخته شده را برای دربرگیری و فشرده‌سازی سازه ژنی تأیید می‌کند. نتایج Real Time PCR افزایش بیان ژن هدف در سلول‌های توموری را تأیید می‌کند. نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه کارآیی دندریمرهای پلی آمیدوآمین در انتقال ژن و نیز تأثیر مثبت افزودن پلی اتیلن گلیکول و اتصال نانوبادی علیه TAG72 به این نانوحامل ژنی (برای هدفمندسازی انتقال ژن به سلول) را تأیید می‌کند.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله
عنوان انگلیسی Construction of PEG-PAMAM dendrimer-based TAG72-targeting nanocarrier for t-Bid gene delivery to colorectal tumor cells
چکیده انگلیسی مقاله Objective: The objective of this study is to develop and assess targeted PAMAM-PEG nanocarrier with anti-TAG72 nanobody for t-Bid gene coding construct delivery into the human colonic adenocarcinoma cells. Materials and Methods: Nanobody (Nb) coding sequence was subcloned into pSJ expression vector for large-scale production and then Nb was purified by Ni++ affinity chromatography. SDS-PAGE and western blot analysis were performed to verify purifiction. PAMAM was reacted with PEG at the ratio 1:2 (mol/mol) and anti-TAG72 Nb at the ratio 1:1 (mol/mol). Surface charge and size of resulting nanoparticles were evaluated by Malvern zeta sizer and Nanosight. Efficiency of constructed gene carrier for t-Bid, a killer gene, delivery into colonic adenocarcinoma cells in in vitro was assessed using real time PCR and cell counting assays. Results: Production of nanoparticles with the average size of 162±92 nm and +4.57±0.52 zeta potential was confirmed by nanosight and Malvern zeta sizer in order. Gel retardation assay result verified efficiency of carrier for pDNA comlexation. Real time PCR results confirmed the target gene overexpression in the cancerous cell lines. Conclusion: The results of this research confirms the efficiency of PAMAM dendrimers for gene transferring, positive effect of PEGylation and targeting of nanoparticles by anti-TAG72 nanobody.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله
نویسندگان مقاله فاطمه صفریان | fatemeh safarian
m.sc. student, department of medical biotechnology, faculty of medical science, tarbiat modares university, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

فاطمه رهبری زاده | fatemeh rahbarizadeh
assistant professor, department of medical biotechnology, faculty of medical science, tarbiat modares university, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

سعید امانپور | said amanpour
assistant professor, cancer research center, institute of cancer, tehran university of medical sciences, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (Tarbiat modares university)

زهرا شریف زاده | zahra sharifzadeh
ph.d. student, national cell bank of iran, pasteur institute, iran
سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تهران (Tehran university of medical sciences)

نشانی اینترنتی http://mjms.modares.ac.ir/article_6179_638551c2488e792cc333f2a125a60463.pdf
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده 1
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات